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閱讀:234發(fā)布時(shí)間:2013-5-13
哈爾濱醫(yī)科大學(xué)*臨床學(xué)院科研人員利用小神經(jīng)球傳代方法在體外培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞,可在10個(gè)月時(shí)間內(nèi)傳代25代,從單一的細(xì)胞擴(kuò)增至10萬(wàn)個(gè)細(xì)胞。目前,這一方法已在哈醫(yī)大衛(wèi)生部細(xì)胞移植重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室普遍應(yīng)用,并已發(fā)表多篇學(xué)術(shù)論文。
臨床上,脊髓損傷后的軸突再生和功能恢復(fù)仍是難以逾越的障礙,對(duì)傷者而言脊髓損傷的破壞性是嚴(yán)重和持久的。目前,很多學(xué)者對(duì)發(fā)育的干細(xì)胞培養(yǎng)和應(yīng)用潛力有著濃厚的研究興趣,因?yàn)檫@些細(xì)胞可以提供神經(jīng)元,神經(jīng)元細(xì)胞作為再生軸突的靶點(diǎn),能促進(jìn)神經(jīng)環(huán)路的重建。
哈醫(yī)大神經(jīng)外科梁鵬博士在國(guó)家自然科學(xué)基金的支持下,利用小神經(jīng)球傳代方法建立的神經(jīng)干細(xì)胞體外長(zhǎng)期培養(yǎng)傳代系統(tǒng),證實(shí)在細(xì)胞傳代和誘導(dǎo)分化時(shí),將干細(xì)胞增殖形成的神經(jīng)球消化成小的含10~20個(gè)細(xì)胞的小神經(jīng)球,可明顯提高細(xì)胞的體外存活能力和增殖能力。利用小神經(jīng)球傳代方法在體外可培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞達(dá)到10個(gè)月,傳代25代,從單一的細(xì)胞可擴(kuò)增至10萬(wàn)個(gè)細(xì)胞。多次傳代后細(xì)胞凍存對(duì)細(xì)胞的存活力無(wú)明顯影響,多向分化潛力表現(xiàn)出穩(wěn)定性。生長(zhǎng)曲線顯示,細(xì)胞數(shù)量在經(jīng)過了很多次傳代后始終呈指數(shù)擴(kuò)增狀態(tài),為神經(jīng)干細(xì)胞的研究和移植提供了大量細(xì)胞來(lái)源。
在此基礎(chǔ)上,課題組還成功建立了神經(jīng)干細(xì)胞小神經(jīng)球脊髓斷端多點(diǎn)移植技術(shù),利用神經(jīng)球移植到大鼠橫切的脊髓斷端,觀察截癱恢復(fù)情況。研究發(fā)現(xiàn),小神經(jīng)球脊髓移植大鼠在體外和受傷大鼠脊髓內(nèi)誘導(dǎo)分化的神經(jīng)元,顯著高于傳統(tǒng)的神經(jīng)干細(xì)胞懸液移植法,細(xì)胞存活率顯著增加。應(yīng)用神經(jīng)示蹤技術(shù),證實(shí)受傷大鼠脊髓皮質(zhì)脊髓束再生,并和遠(yuǎn)端神經(jīng)元之間建立了突觸。與之相一致的是,脊髓損傷后截癱大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能也得到了明顯改善。
課題組還進(jìn)一步明確了神經(jīng)干細(xì)胞對(duì)脊髓損傷的修復(fù)機(jī)制。這些機(jī)制主要包括:促進(jìn)受傷神經(jīng)元軸突的再生延長(zhǎng)和再髓鞘化,以及脊髓損傷后神經(jīng)環(huán)路的重建;在國(guó)內(nèi)外提出人胚神經(jīng)干細(xì)胞對(duì)脊髓損傷存在與先前研究不同的修復(fù)機(jī)制,即神經(jīng)干細(xì)胞在移植治療脊髓疾病時(shí),除了細(xì)胞替代效果外,還可通過營(yíng)養(yǎng)支持,即細(xì)胞基質(zhì)的作用,促進(jìn)神經(jīng)環(huán)路的再通。
專家認(rèn)為,該研究成果擴(kuò)充了神經(jīng)干細(xì)胞的來(lái)源,為脊髓損傷神經(jīng)干細(xì)胞移植治療帶來(lái)了良好的前景。
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