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公司動(dòng)態(tài)

腦紅蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒的研發(fā)與應(yīng)用

閱讀:219發(fā)布時(shí)間:2014-7-25

利用ELISA檢測(cè)試劑盒技術(shù)研發(fā)一種靈敏、快速檢測(cè)人血清中腦紅蛋白(Ngb)含量的檢測(cè)試劑盒,并探討其在正常人血清樣本檢測(cè)中的應(yīng)用。方法:采用熱誘導(dǎo)的原核表達(dá)體系獲得重組人源腦紅蛋白(rhNgb),通過凝膠過濾和陰離子交換層析等制備rhNgb純品;將適量rhNgb純品免疫動(dòng)物獲得抗rhNgb單克隆抗體和多克隆抗體;用雙抗體夾心ELISA技術(shù)制備rhNgb-ELISA檢測(cè)試劑盒;用該試劑盒對(duì)410例正常人血清中Ngb的含量進(jìn)行檢測(cè),其中包括1.5歲以下嬰兒血清55例、19~70歲成人血清355例。結(jié)果:用制備的rhNgb-ELISA試劑盒檢測(cè)發(fā)現(xiàn)Ngb在正常人血清中的分布與年齡存在明顯的相關(guān)性,表現(xiàn)為"兩頭高、中間低"的趨勢(shì),嬰兒和老年人血清中Ngb的含量分別為1.6708±0.4945和2.1962±0.6703μmol/L,而中年人血清中Ngb的含量為0.3622±0.0716μmol/L。結(jié)論:采用雙抗夾心ELISA技術(shù)并結(jié)合嚴(yán)格的質(zhì)量控制,研發(fā)了靈敏的rhNgb-ELISA檢測(cè)試劑盒,并初步獲得了正常人血清中Ngb的含量分布情況,為臨床缺血及缺氧性腦損傷等相關(guān)疾病的輔助診斷治療提供了參考信息。


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