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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人周期素依賴性激酶1(CDK-1)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人周期素依賴性激酶1(CDK-1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人周期素依賴性激酶1(CDK-1)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
69705 mIgA(Human membrane IgA) ELISA Kit 人表面膜免疫球蛋白A 48T
69706 Ig-j(Human immunoglubin joining chain) ELISA Kit *j鏈 48T
69707 HB- Beta(Human Beta-subunits of hemoglobin) ELISA Kit 人血紅蛋白β亞基 48T
69708 SIgA(Human secretory immunoglobulin A) ELISA Kit 人分泌型免疫球蛋白A 48T
69709 SIgA(Human secretory immunoglobulin A) ELISA Kit 人分泌型免疫球蛋白A(人唾液) 96T
69710 F XII a(Human activated coagulation factor XII ) ELISA Kit 人活化*Ⅻ 48T
69711 Human Free Protein S,FP-S ELISA Kit 人游離蛋白S 48T
69712 APT(Human Abnormal prothrombin) ELISA Kit 人異常*原 48T
69713 CIC(Human circulating immune complex) ELISA Kit 人循環(huán)免疫復(fù)合物 48T
69714 PA-IgM(Human Plaet associated antibody) ELISA Kit 人血小板相關(guān)抗體IgM 48T
69715 FPA(Human fibrinopeptide A) ELISA Kit 人血纖肽/纖維蛋白肽A 48T
69716 Plg(Human Plasminogen) ELISA Kit 人纖溶酶原 48T
69717 CTLA-4/CD152(Human cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4) ELISA Kit 人細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4 48T
69718 Lambda -IgLC(Human lambda immunoglobulin light chain) ELISA Kit *輕鏈lambda 48T
69719 pMHC(Human peptide major histocompatibility complex) ELISA Kit 人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物 48T
69720 CLA(Human cutaneous lymphocyte-associated antigen) ELISA Kit 人皮膚淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原 48T
69721 T-TM(Human thrombinthrombomodulin compound) ELISA Kit 人*血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物 48T
69722 Hc(Human Hemolytic complement) ELISA Kit 人溶血補(bǔ)體 48T
69723 TCR(Human T cell receptor) ELISA Kit 人T細(xì)胞受體 48T
69724 LAC/LA(Human lupus anticoagulant) ELISA Kit 人狼瘡抗凝抗體 48T
69725 Human soluble fibrin monomer complex,SFMC ELISA Kit 人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物 48T
69726 Human sreum albumin,HSA ELISA Kit 人血清白蛋白 48T
69727 Human 2,3-dinor thromboxane B2,2,3-dinor-TXB2 ELISA Kit 人2,3Dinor血栓烷B2 48T
69728 Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit 人11去氫血栓烷B2 48T
69729 Human thrombomodulin,TM ELISA Kit 人血栓調(diào)節(jié)蛋白 48T
69730 Human Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA Kit 人纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物 48T
69731 Human plaet membrane glycoprotein II b III a,GP- II b III a ELISA Kit 人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa 48T
69732 Human thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit 人血小板反應(yīng)蛋白/*敏感蛋白1 48T
69733 Human alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit 人血漿α顆粒膜蛋白 48T
69734 Human terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit 人末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9 48T
69735 Human Complement 4,C4 ELISA Kit 人補(bǔ)體蛋白4 48T
69736 Human Complement 3,C3 ELISA Kit 人補(bǔ)體蛋白3 48T
69737 Human coagulation factor II ,F II ELISA Kit 人*Ⅱ 48T
69738 Human leucocyte antigen B27,HLA-B27 ELISA Kit 人類白細(xì)胞抗原B27 48T
69739 Human Haptoglobin,Hpt/HP ELISA KIT 人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白 48T
69740 Human 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit 人血清總補(bǔ)體 48T
69741 Human Complement fragment 4a,C4a ELISA Kit 人過(guò)敏毒素/補(bǔ)體片斷4 48T
69742 Human Complement fragment 5a,C5a ELISA Kit 人補(bǔ)體片斷5a 48T
69743 Human Complement fragment 3a,C3a ELISA Kit 人補(bǔ)體片斷3a 48T
69744 Human coagulation factor VIII related antigen,F VIII -Ag ELISA Kit 人*Ⅷ相關(guān)抗原 48T
69745 Human coagulation factor IX ,F IX ELISA Kit 人*Ⅸ 48T
69746 Human coagulation factor X ,F X ELISA Kit 人*Ⅹ 48T
69747 Human von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子 48T
69748 Human plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit 人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物 48T
69749 Human thrombin-antithrombin complex,TAT ELISA Kit 人*抗*復(fù)合物 48T
69750 Human anti-thrombin receptor,ATR ELISA Kit 人抗*受體 48T
69751 Human thrombin receptor,TR ELISA Kit 人*受體 48T
69752 Human Factor VIII -related Antigen,F VIII Ag ELISA Kit 人第八因子相關(guān)抗原 48T
69753 Human Fibrinogen,Fbg ELISA Kit 人血纖蛋白原 48T
69754 Human major histocompatibility complex I ,MHC I /HLA I ELISA Kit 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類 48T
69755 Human Anti-Thrombin III ,AT- III ELISA Kit 人抗*Ⅲ抗體 48T
69756 Human thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit 人血栓前體蛋白 48T
69757 Human lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3 48T
69758 Human major histocompatibility complex III ,MHC III /HLA- III ELISA Kit 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類 人周期素依賴性激酶1(CDK-1)ELISA試劑盒48T
69759 Human major histocompatibility complex II ,MHC II /HLA- II ELISA Kit 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類 48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人周期素依賴性激酶1(CDK-1)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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