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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-21 03:05:25瀏覽次數(shù):174次
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人周期素依賴性激酶2(CDK-2)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人周期素依賴性激酶2(CDK-2)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人周期素依賴性激酶2(CDK-2)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
69649 F XII (Human coagulation factor XII ) ELISA Kit 人*Ⅻ 48T
69650 F X III (Human coagulation factor X III ) ELISA Kit 人*ⅩⅢ 48T
69651 F III (Human coagulation factor III 0 ELISA Kit 人*Ⅲ 48T
69652 C1q(Human Complement 1q) ELISA Kit 人補體1q 48T
69653 GP- IV (Human plaet membrane glycoprotein IV ) ELISA Kit 人血小板膜糖蛋白Ⅳ 48T
69654 Human Thymosin Alpha1 ELISA Kit 人*α1 48T
69655 CCP(Human complement control protein) ELISA Kit 人補體調(diào)節(jié)蛋白 48T
69656 PBP/CXCL7(Human plaet basic protein) ELISA Kit 人血小板堿性蛋白 48T
69657 HLA-C(Human leukocyte antigen C) ELISA Kit 人類白細(xì)胞抗原C 48T
69658 HLA-E(Human leukocyte antigen E) ELISA Kit 人類白細(xì)胞抗原E 48T
69659 HLA-A(Human leukocyte antigen A) ELISA Kit 人類白細(xì)胞抗原A 48T
69660 SAP(Human Serum amyloid P) ELISA Kit 人血清淀粉樣蛋白P 48T
69661 MBLR(Human Mannma binding lectin receptor) ELISA Kit 人甘露糖凝集素受體 48T
69662 PL/Fbn(Human plasmin/fibrinolysin) ELISA Kit 人纖溶酶/纖維蛋白溶酶 48T
69663 BCR(Human B cell receptor) ELISA Kit 人B細(xì)胞受體 48T
69664 mIgM(Human membrane IgM) ELISA Kit 人表面膜免疫球蛋白M 48T
69665 mIgD(Human membrane IgD) ELISA Kit 人表面膜免疫球蛋白D 48T
69666 KIR(Human killer cell immnoglobulin-like receptor) ELISA Kit 人殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體 48T
69667 KLR(Human killer cell lectin-like receptor) ELISA Kit 人殺傷細(xì)胞凝集素樣受體 48T
69668 APC(Human activated protein C) ELISA Kit 人活化蛋白C 48T
69669 Human Protein C ELISA Kit 人蛋白C 48T
69670 PF-3(Human plaet factor 3) ELISA Kit 人血小板因子3 48T
69671 F1+2(Human prothrombin fragment 1+2) ELISA kit 人*原片段F1+2 48T
69672 MBP/MBL(Human Mannma binding protein/mannan binding lectin) ELISA Kit 人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素 48T
69673 MAC(Human membrane attack complex) ELISA Kit 人膜攻擊復(fù)合物 48T
69674 EL(Human EuglobulinLysis) ELISA Kit 人優(yōu)球蛋白 48T
69675 f-Hb(Human free haemoglobin) ELISA Kit 人游離血紅蛋白 48T
69676 PRM1(Human Protamine 1) ELISA Kit 人*1 48T
69677 HbCO(Human carboxyhemoglobin) ELISA Kit 人一氧化碳血紅蛋白 48T
69678 PAIg(Human plaet-associated immunoglobulins) ELISA Kit 人血小板相關(guān)免疫球蛋白 48T
69679 PAC3(Human plaet-associated Complement 3) ELISA Kit 人血小板相關(guān)補體3 48T
69680 TX-A2(Human Thromboxane A2) ELISA Kit 人血栓素A2 48T
69681 HbH(Human Hemoglobin H) ELISA Kit 人血紅蛋白H 48T
69682 HbC(Human Hemoglobin C) ELISA Kit 人血紅蛋白C 48T
69683 Human Fibrin ELISA Kit 人纖維蛋白 48T
69684 FPB(Human fibrinopeptide B) ELISA Kit 人血纖肽/纖維蛋白肽B 48T
69685 PLGA(Human plasminogen activator) ELISA Kit 人纖溶酶原激活劑 48T
69686 SmIg(Human Surface Membrane Immunoglobulin) ELISA Kit 人細(xì)胞膜表面免疫球蛋白 48T
69687 PA(Human prealbumin) ELISA Kit 人前白蛋白 48T
69688 CG(Human Cryoglobulin) ELISA Kit 人冷球蛋白 48T
69689 EMP(Human erythrocyte membrane protein) ELISA Kit 人紅細(xì)胞膜蛋白 48T
69690 MHB(Human Methemoglobin) ELISA Kit 人高鐵血紅蛋白 48T
69691 LMWH(Human low molecular weight heparin) ELISA Kit 人低分子肝素 48T
69692 C3SP(Human Complement 3 split product) ELISA Kit 人補體3裂解產(chǎn)物 48T
69693 C3bR(Human Complement fragment 3b rccptor) ELISA Kit 人補體片段3b受體 48T
69694 C1INH(Human Complement 1 inhibitor autoantibody) ELISA Kit 人補體1抑制物抗體 48T
69695 BF(Human factor B) ELISA Kit 人B因子 48T
69696 HLA-G(Human leukocyte antigen G) ELISA Kit 人類白細(xì)胞抗原G 48T
69697 C3b(Human Complement fragment 3b) ELISA Kit 人補體片斷3b 48T
69698 C4b(Human Complement fragment 4b) ELISA Kit 人補體片斷4b 48T
69699 C4d(Human Complement fragment 4d) ELISA Kit 人補體片斷4d 48T
69700 C5b(Human Complement fragment 5b) ELISA Kit 人補體片斷5b 48T
69701 IgH(Human immunoglobulin heavy chain) ELISA Kit *重鏈 48T
69702 IgHV(Human immunoglobulin heavy chain variable region) ELISA Kit *重鏈可變區(qū)人周期素依賴性激酶2(CDK-2)ELISA試劑盒 48T
69703 poly-IgR(polyimmunoglobulinreceptor) ELISA Kit 人多免疫球蛋白受體 48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人周期素依賴性激酶2(CDK-2)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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