人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

69479 Human hypothetical protein LOC433328 ELISA Kit  人假定蛋白LOC433328  48T
69480 MYD88(Human myeloid differentiation primary response gene 88) ELISA Kit  人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88  48T
69481 Ifi205(Human interferon activated gene 205) ELISA Kit  人干擾素活化基因205  48T
69482 H2-K1(Human Histocompatibility 2-K1-K region) ELISA Kit  人組織相容性2-K1-K 區(qū)  48T
69483 LILRB4(Human leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4) ELISA Kit  人白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4  48T
69484 CLEC4E(Human C-type lectin domain family 4 member e) ELISA Kit  人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E  48T
69485 Human Hypothetical protein LOC677168 ELISA Kit  人假定蛋白LOC677168  48T
69486 Ly6a(Human lymphocyte antigen 6 complex locus A) ELISA Kit  人淋巴細(xì)胞抗原6復(fù)合物基因座A  48T
69487 EAR1(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 1) ELISA KIT  人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員1  48T
69488 MLKL(Human mixed lineage kinase domain-like) ELISA Kit  人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域  48T
69489 PPARGC1(Human peroxisome proliferative activated receptor gama coactivator 1 alpha) ELISA Kit  人過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α  48T
69490 human similar to cDNA sequence BC027382 ELISA Kit  人類似cDNA順序BC027382  48T
69491 human similar to RIKEN cDNA 4931408D14 gene ELISA kit  人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因  48T
69492 RCOR3(Human REST corepressor 3) ELISA Kit  人REST協(xié)阻抑因子3  48T
69493 COLEC11(Human collectin sub-family member 11) ELISA Kit  人集蛋白亞家族成員11  48T
69494 Alpha1 Beta-GP(Human Alpha1 Beta glycoprotein) ELISA Kit  人α1β糖蛋白  48T
69495 sTREM-1(Human soluble Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1) ELISA Kit  人可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1  48T
69496 MSTN(Human Myostatin) ELISA Kit  人肌抑素  48T
69497 MLZE(Human melanomaderived leucine zipper extra-nuclear factor) ELISA Kit  人黑素瘤衍生*拉鏈額外核因子  48T
69498 UGT2B4(Human uridine dipho-sphate glucuronosyltransferase 2 family polypeptide B4) ELISA Kit  人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶2家族肽B4  48T
69499 PPP1R1A(Human protein phosphatase 1 regulatory subunit A) ELISA Kit  人蛋白磷酸酶1調(diào)控/抑制因子亞基1A  48T
69500 ABCG2(Human ATP-binding cassette transporter G2) ELISA Kit  人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2  48T
69501 GDI(Human Guanine nucleotide dissociation Inhibitor) ELISA Kit  人鳥苷酸解離抑制因子  48T
69502 OTF2B(Human octamer transcription factor 2B) ELISA Kit  人八聚體轉(zhuǎn)錄因子  48T
69503 OTF2A(Human octamer transcription factor 2A) ELISA Kit  人八聚體轉(zhuǎn)錄因子  48T
69504 DUTP(Human deoxyuridinetriphate) ELISA Kit  人脫氧尿三磷酸  48T
69505 CMR(Human costimulatory molecules recptor) ELISA Kit  人協(xié)同刺激分子受體  48T
69506 PG(Human peptidoglycan) ELISA Kit  人肽聚糖  48T
69507 LAM(Human Lipoarabinomannan) ELISA Kit  人脂阿拉伯甘露聚糖  48T
69508 MN(Human Mannose) ELISA Kit  人甘露糖  48T
69509 MR(Human mannose receptor) ELISA Kit  人甘露糖受體  48T
69510 CpG-ODN(Human CpG oligodeoxynucleotide) ELISA Kit  人未甲基化寡聚脫氧核苷酸  48T
69511 IRAP(Human ICE protease-activating factor) ELISA Kit  人ICE蛋白酶激活因子  48T
69512 NON(Human nonmethylated oligonucleotide0 ELISA Kit  人非甲基化寡核苷酸  48T
69513 Human Protein Z ELISA Kit  人蛋白Z  48T
69514 Human Protein S ELISA Kit  人蛋白S  48T
69515 sEPCR(Human soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit  人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體  48T
69516 C/EBP Epsilon (Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon) ELISA Kit  人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε  48T
69517 C/EBP Delta(Human CCAAT/enhancer binding protein deta) ELISA Kit  人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ  48T
69518 C/EBP Alpha(Human CCAAT/enhancer binding protein alpha) ELISA Kit  人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α  48T
69519 2,3-DPG(Human 2,3-Disphosphoglycerate,2) ELISA Kit  人2,3-二磷酸甘油酸  48T
69520 LUM(Human lumican) ELISA Kit  人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白  48T
69521 NHE3(Human Na+/H+ exchanger 3) ELISA Kit  人Na+/H+交換體3  48T
69522 OFQ/N(Human orphanin FQ/nociceptin) ELISA Kit  人孤腓肽  48T
69523 ST1(Human Stromelysin-1) ELISA Kit  人基質(zhì)裂解素  48T
69524 ST2(Human Stromelysin-2) ELISA Kit  人基質(zhì)裂解素  48T
69525 ST3(Human Stromelysin-3) ELISA Kit  人基質(zhì)裂解素  48T
69526 LXA4(Human Lipoxin A4) ELISA Kit  人脂氧素A4  48T
69527 PR3-ANCA(Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit  人蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體 人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒 48T
69528 Beta-LPH(Human Beta-lipotropic hormone) ELISA Kit  人β-促脂素  48T
69529 LTA(Human lipoteichoic acids) ELISA Kit  人脂磷壁酸  48T
69530 AD(Human amiodarone) ELISA Kit  人乙胺碘呋酮  48T
69531 SA(Human Sialic acid) ELISA Kit  人唾液酸  48T
69532 SM(Human sphingomyelin) ELISA Kit  人鞘磷脂  48T
69533 UFC(Human urinary free cortisol) ELISA Kit  人尿游離*  48T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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