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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-14 13:35:00瀏覽次數(shù):140次
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人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
69367 PG-C(Human Pepsinogen C) ELISA Kit 人*原C 48T
69368 PG-A(Human Pepsinogen A) ELISA Kit 人*原A 48T
69369 PLAUR/uPAR(Human Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor) ELISA kit 人*型纖溶酶原激活物受體 48T
69370 uPA(Human urokinase plasminogen activator) ELISA kit 人*型纖溶酶原激活物 48T
69371 Tie-2(Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2 ELISA Kit 人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域*激酶2 48T
69372 MMP-8(Human Matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶 48T
69373 (MMP-7(Human Matrix metalloproteinase 7) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶7 48T
69374 MMP-3(Human Matrix metalloproteinase 3) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶3 48T
69375 MMP-2/Gelatinase A(Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A 48T
69376 MMP-13(Human Matrix metalloproteinase 13) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶13 48T
69377 MMP-10(Human Matrix metalloproteinase 10) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶10 48T
69378 MMP-1(Human Matrix metalloproteinase 1) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶1 48T
69379 Flt3(Human FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit 人FMS樣*激酶3 48T
69380 Flt-3L(Human FMS-like tyrosine kinase 3 ligand) ELISA Kit 人FMS樣*激酶3配體 48T
69381 ACE(Human Angiotensin converting enzyme) ELISA Kit 人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 48T
69382 AMBP(Human alpha-1-microglobulin/bikunin precursor) ELISA Kit 人α1微球蛋白/bikunin前體 48T
69383 Human podocin ELISA Kit 人Podocin 48T
69384 Human Nephrin ELISA Kit 人腎病蛋白 48T
69385 Alpha1-MG(Human Alpha1-microglobulin) ELISA Kit 人α1微球蛋白 48T
69386 ALB(Human microalbunminuria) ELISA Kit 人尿微量白蛋白 48T
69387 AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質(zhì)抗體 48T
69388 RANA(Human rheumatoid arthritis associated nuclear artigen) ELISA Kit 人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原 48T
69389 THP(Human T-H glycoprotein) ELISA Kit 人TH糖蛋白 48T
69390 GTE-AGE(Human Glomerular tissue extract-advanced glycosylation end products) ELISA Kit 人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物 48T
69391 UP(Human Proteinuria) ELISA Kit 人尿蛋白 48T
69392 LMP7/PSMB99Human low molecular-weight protein/proteasome beta-type subunit) ELISA Kit 人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白酶體9 48T
69393 Alpha2-MG(Human Alpha2 macroglobulin) ELISA Kit 人α2巨球蛋白 48T
69394 Kim-1(Human Kidney injury molecule 1) ELISA Kit 人腎損傷分子1 48T
69395 AQP-5(Human Aquaporin 5) ELISA Kit 人水通道蛋白5 48T
69396 AQP-4(Human Aquaporin 4) ELISA Kit 人水通道蛋白4 48T
69397 AQP-3(Human Aquaporin 3) ELISA Kit 人水通道蛋白3 48T
69398 AQP-2(Human Aquaporin 2) ELISA Kit 人水通道蛋白2 48T
69399 AQP-1(Human Aquaporin 1) ELISA Kit 人水通道蛋白1 48T
69400 AQP-0(Human Aquaporin 0) ELISA Kit 人水通道蛋白0 48T
69401 RF(Human rheumatoid factor) ELISA Kit 人類風(fēng)濕因子 48T
69402 ASO(Human anti-streptolysin O) ELISA Kit 人抗鏈球菌溶血素O/抗O 48T
69403 ACA(Human adrenal cortex antibody) ELISA Kit 人腎上腺皮質(zhì)抗體 48T
69404 GBM(Human glomerular basement membrane antibogy) ELISA Kit 人抗腎小球基底膜抗體 48T
69405 BMG/ Beta2-MG(Human Beta2-microglobulin) ELISA Kit 人β2微球蛋白 48T
69406 ANX- V (Human Annexin V ) ELISA Kit 人膜聯(lián)蛋白Ⅴ 48T
69407 TBM(Human tubular basement membrane antibogy) ELISA Kit 人抗腎小管基底膜抗體 48T
69408 AP13(Human apelin 13) ELISA Kit 人apelin 13 48T
69409 AP36(Human Apelin 36) ELISA Kit 人Apelin 36 48T
69410 Tn-T(Human Troponin T) ELISA Kit 人肌鈣蛋白T 48T
69411 ES-Ab(Human anti-Endostatin antibody) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮抑素抗體 48T
69412 Agtr I a(Human angiotensin II receptor type I a) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅱ受體Ⅰa型 48T
69413 ANGPTL3(Human angiopoietin-like protein 3) ELISA Kit 人血管生成素樣蛋白3 48T
69414 Alpha Actin(Human Alpha-Actin) ELISA Kit 人α肌動蛋白 48T
69415 ANKRD1(Human cardiac ankyrin repeat domain 1) ELISA Kit 人心肌錨蛋白重復(fù)域1 48T
69416 LEPR(Human Leptin Receptor) ELISA Kit 人瘦素受體 48T
69417 AT2R(Human Angiotensin II Receptor 2) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅱ受體2 48T
69418 ANG II R-1(Human angiotension II receptor 1) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅱ受體1 48T
69419 ANG-4(Human Angiopoietin 4) ELISA Kit 人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒 人血管生成素4 48T
69420 sMHC-1(Human soluble myosin heavy chain 1) ELISA Kit 人可溶性肌球蛋白重鏈1 48T
69421 HSF-1(Human Heat Shock Factor 1) ELISA Kit 人熱休克因子1 48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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