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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-14 13:34:59瀏覽次數(shù):149次
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人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
69311 sPL-A2(Human soluble Phospholipase A2) ELISA Kit 人可溶性磷脂酶A2 48T
69312 DNase- I (Human deoxyribonuclease I ) ELISA Kit 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ 48T
69313 Arg(Human Arginase) ELISA Kit 人*酶 48T
69314 NAP(Human neutrophilic alkaline phosphatase0 ELISA Kit 人中性粒細胞堿性磷酸酶 48T
69315 ALK(Human anapastic lymphoma kinase) ELISA Kit 人間變性淋巴瘤激酶 48T
69316 CKMB(Human cytokinin MB) ELISA Kit 人激動異構(gòu)酶/細胞分裂素MB 48T
69317 MLCK(Human myosin light chain kinase) ELISA Kit 人肌球蛋白輕鏈激酶 48T
69318 GSTpi(Human glutathione S-transferases0 ELISA Kit 人*硫轉(zhuǎn)移酶pi基因 48T
69319 GSTs(Human glutathione S-transferases) ELISA Kit 人*S轉(zhuǎn)移酶 48T
69320 DUB(Human deubiquitinating enzyme) ELISA Kit 人泛素分解酶 48T
69321 sPLA2(Human secreted phospholipase A2) ELISA Kit 人分泌型磷脂酶A2 48T
69322 E3/UBPL(Human E3/ubiquitin-protein ligase) ELISA Kit 人泛素連接酶 48T
69323 MCT(Human mast cell tryptase) ELISA Kit 人肥大細胞類* 48T
69324 DT(Human dopachrome tautomerase) ELISA Kit 人多巴色素異構(gòu)酶 48T
69325 E2/UBCE(Human E2/ubiquitin-conjugating enzyme) ELISA Kit 人泛素結(jié)合酶 48T
69326 PDI(Human protein disulfide isomerase) ELISA Kit 人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶 48T
69327 CAD(Human caspase activated deoxyribonuclease0 ELISA Kit 人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶 48T
69328 Gamma-ECS(Human Gamma-glutamyl systeine synthetase) ELISA Kit 人γ谷氨酰半*合成酶 48T
69329 E1/UBAE(Human E1/ubiquitin-activating enzyme) ELISA Kit 人泛素激活酶 48T
69330 PP(Human Pepsin) ELISA Kit 人* 48T
69331 HK(Human Hexokinase) ELISA Kit 人己糖激酶 48T
69332 PDH E1(Human pyruvate dehydrogenase-E1) ELISA Kit 人丙酮酸脫氫酶E1 48T
69333 GSK(Human glycogen synthase kinase) ELISA Kit 人糖原合成酶激酶 48T
69334 Casp-9(Human Caspase-9) ELISA Kit 人胱天蛋白酶9 48T
69335 Casp-3(Human Caspase 3) ELISA Kit 人胱天蛋白酶3 48T
69336 NE(Human neutrophil elastase) ELISA Kit 人中性粒細胞彈性蛋白酶 48T
69337 CA-2(Human carbonic anhydrase 2) ELISA Kit 人碳酸酐酶2 48T
69338 ADAM8(Human A Disintegrin And Metalloprotease 8) ELISA Kit 人解整合素樣金屬蛋白酶8 48T
69339 MPO(Human myeloperoxidase) ELISA Kit 人髓過氧化物酶 48T
69340 Gzms-B(Human granzymes B) ELISA Kit 人顆粒酶B 48T
69341 Gzms-A(Human granzymes A) ELISA Kit 人顆粒酶A 48T
69342 CIAP(Human Calf intestinal alkaline phosphatase) ELISA Kit 人牛小腸堿性磷酸酶 48T
69343 SOD(Human Super Oxidase Dimutase) ELISA Kit 人超氧化物歧化酶 48T
69344 DPP IV (Human dipeptidyl peptldase IV ) ELISA Kit 人二肽基肽酶Ⅳ 48T
69345 HD(Human Histone Deacetylase) ELISA Kit 人組織蛋白去乙?;? 48T
69346 Human Methylase ELISA Kit 人甲基化酶 48T
69347 TRACP-5b9Human tartrate-resistant acid phosphatase 5b) ELISA Kit 人抗酒石酸酸性磷酸酶5b 48T
69348 PI3K(Human Phosphotylinosital 3 kinase) ELISA Kit 人磷酸肌醇3激酶 48T
69349 PKB(Human protein kinase B) ELISA Kit 人蛋白激酶B 48T
69350 HO-2(Human heme oxygenase 2) ELISA Kit 人血紅素氧合酶2 48T
69351 M2-PK (Human Pyruvate Kinase) ELISA Kit 人丙酮酸激酶M2型同工酶 48T
69352 TPO(Human Thyroid-Peroxidase) ELISA Kit 人甲狀腺過氧化物酶 48T
69353 AFU(Human alpha-L-fucosidase) ELISA Kit 人αL巖藻糖苷酶 48T
69354 eNOS(Human Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit 人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶 48T
69355 HO-1(Human heme oxygenase 1) ELISA Kit 人血紅素氧合酶1 48T
69356 iNOS(Human inducible nitric oxide synthase) ELISA KIT 人誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶 48T
69357 PL-A2(Human Phospholipidase A2) ELISA Kit 人磷脂酶A2 48T
69358 NOS(Human nitric oxide synthase) ELISA Kit 人一氧化氮合成酶 48T
69359 TE(Human omerase) ELISA Kit 人端粒酶 48T
69360 MMP-5(Human matrix metalloproteinase 5) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶5 48T
69361 MMP-4(Human matrix metalloproteinase 4) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶4 48T
69362 MMP-9/Gelatinase B(Human matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B 人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒 48T
69363 NSE(Human Neuron-specific enolase) ELISA Kit 人神經(jīng)特異性烯醇化酶 48T
69364 CK-MB(Human Creatine Kinase MB isoenzyme) ELISA Kit 人肌酸激酶同工酶MB 48T
69365 PAP(Human Prostatic Acid Phosphatase) ELISA Kit 人前列腺酸性磷酸酶 48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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