人1,25二羥基*3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人1,25二羥基*3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

69255 CHAc(Human choline acetylase) ELISA Kit  人*乙?；? 48T
69256 ICD(Human isocitrate dehydrogenase) ELISA Kit  人異檸檬酸脫氫酶  48T
69257 Try- II (Human Trypsinogen-2) ELISA Kit  人*原Ⅱ  48T
69258 ADA(Human adenosine deaminase) ELISA Kit  人腺苷脫氨酶  48T
69259 HAase(Human Hyaluronidase) ELISA Kit  人透明質(zhì)酸酶  48T
69260 AST(Human Aspartate aminotransferase) ELISA Kit  人天*氨基轉(zhuǎn)移酶  48T
69261 ACP(Human Acid Phosphatase) ELISA Kit  人酸性磷酸酶  48T
69262 GPI(Human glucose-6-phosphate isomerase) ELISA Kit  人葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶  48T
69263 PGM(Human Phosphoglucomutase) ELISA Kit  人磷酸葡萄糖變位酶  48T
69264 LAP(Human Leucine aminopepridase) ELISA Kit  人亮氨酰氨基肽酶  48T
69265 SK(Human Streptokinase) ELISA Kit  人鏈激酶  48T
69266 RNASE(Human Ribonuclease) ELISA Kit  人核糖核酸酶  48T
69267 LPO(Human lipid peroxlde) ELISA Kit  人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶  48T
69268 PON(Human paraoxonase) ELISA Kit  人對氧磷酶  48T
69269 PK(Human pyruvate kinase) ELISA Kit  人丙酮酸激酶  48T
69270 BetaGD(Human Beta-glucuronidase) ELISA Kit  人β葡萄糖醛酸苷酶  48T
69271 Human Beta-glucosidase ELISA Kit  人β葡糖苷酶  48T
69272 Human Beta-lactamase ELISA Kit  人β內(nèi)酰胺酶  48T
69273 Beta Manase(Human Alpha mannosidase) ELISA Kit  人β甘露糖苷酶  48T
69274 BetaGAL(Human Alpha-galactosidase) ELISA Kit  人β半乳糖苷酶  48T
69275 IDUA(Human Alpha-L-iduronidase) ELISA Kit  人αL艾杜糖苷酸酶  48T
69276 Alpha2-AP(Human Alpha2-Antiplasmin) ELISA Kit  人α2抗纖溶酶  48T
69277 NAG(Human N-acetyl- Beta-D-glucosaminidase) ELISA Kit  人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶  48T
69278 PAL(Human L-Phenylalanine ammonla-lyase) ELISA Kit  人L苯*解氨酶  48T
69279 5-NT(Human 5-Nucleotidase) ELISA Kit  人5核苷酸酶  48T
69280 1,3- BetaD-Glu(Human 1,3- BetaD glucosidase) ELISA Kit  人1,3-βD葡葡糖苷酶  48T
69281 CK(Human Creatine Kinase) ELISA Kit  人肌酸激酶  48T
69282 TR(Human targeted ribonuclease) ELISA Kit  人靶向核糖核酸酶  48T
69283 PKC(Human protein kinase C) ELISA Kit  人蛋白激酶C  48T
69284 ALD(Human Aldolase) ELISA Kit  人醛縮酶  48T
69285 L-LDH(Human L-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit  人L-乳酸脫氫酶  48T
69286 ASM(Human acid sphingomyelinase) ELISA Kit  人酸性神經(jīng)鞘磷脂酶  48T
69287 ALOX-5(Human arachidonate 5-lipoxygenase) ELISA Kit  人花生四烯酸5脂加氧酶  48T
69288 5-LO/LOX(Human 5-lipoxygenase) ELISA Kit  人5脂加氧酶  48T
69289 AC-1(Human adenylyl cyclase 1) ELISA Kit  人腺苷酸環(huán)化酶1  48T
69290 sAC(Human Soluble Adenylate Cyclase) ELISA Kit  人可溶性腺苷酸環(huán)化酶  48T
69291 ODC(Human Ornithine decarboxylase) ELISA Kit  人*脫羧酶  48T
69292 PTK/CD115(Human protein tyrosine kinase) ELISA Kit  人蛋白*激酶  48T
69293 PTP/PTPase/CD148(Human protein tyrosine phosphatase) ELISA Kit  人蛋白*磷酸酶  48T
69294 TACE(Human TNF Alpha converting enzyme) ELISA Kit  人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶  48T
69295 PMN Elastase(Human Polymorphonuclear Elastase) ELISA Kit  人多形核白細胞彈性蛋白酶  48T
69296 uPA/PLAU(Human urokinase-type plasminogen activator) ELISA Kit  人*型纖溶酶原激活物  48T
69297 KLK 8(Human urokinase-type plasminogen activator) ELISA Kit  人*8  48T
69298 KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit  人*6  48T
69299 FDA(Human Fructose-1,6-bisphosphate aldolase) ELISA Kit  人果糖1,6二磷酸醛縮酶  48T
69300 cath-D(Human cathepsin D) ELISA Kit  人組織蛋白酶D  48T
69301 HSL(Human hormone sensitive lipase) ELISA Kit  人激素敏感性脂肪酶  48T
69302 PK(Human pancreatickininogenase) ELISA Kit  人*  48T
69303 ACO-2(Human aconitase 2) ELISA Kit  人烏頭酸酶2  48T
69304 26S PSM(Human 26S proteasome) ELISA Kit  人26S蛋白酶體  48T
69305 CDK-4(Human Cyclin-dependent kinase 4) ELISA Kit  人周期素依賴性激酶4  48T
69306 PLAP(Human Placental alkaline pkosphatase) ELISA Kit  人胎盤堿性磷酸酶  48T
69307 RTKs(Human receptor tyrosine kinase) ELISA Kit  人受體*激酶  48T
69308 MAPK(Human mitogen activited protein kinase) ELISA Kit  人絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶  人1,25二羥基*3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA試劑盒48T
69309 LZM(Human Lysozyme) ELISA Kit  人*  48T

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。 
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人1,25二羥基*3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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