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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-23 18:48:17瀏覽次數(shù):160次
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人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
69199 ADAM10(Human A Disintegrin And Metalloprotease 10) ELISA Kit 人解整合素樣金屬蛋白酶10 48T
69200 MMP11(Human matrix metalloproteinase 11) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶11 48T
69201 TS(Human thymidylate synthetase) ELISA Kit 人胸苷酸合成酶 48T
69202 TPHuman thymidinephosphorylase) ELISA Kit 人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶 48T
69203 PARP(Human Poly ADP ribose polymerase) ELISA Kit 人多聚ADP核糖聚合酶 48T
69204 GCK(Human glucokinase) ELISA Kit 人葡萄糖激酶 48T
69205 MAO(Human monoamine oxidase) ELISA Kit 人單胺氧化酶 48T
69206 cPLA2(Human cytosolic phospholipase A2) ELISA Kit 人胞漿型磷脂酶A2 48T
69207 DAO(Human diamine oxidase) ELISA Kit 人二胺氧化酶 48T
69208 COX-2(Human cyclooxygenase-2) ELISA Kit 人環(huán)加氧酶2 48T
69209 CDK5(Human Cyclin Dependent Kinase 5) ELISA Kit 人周期素依賴性激酶5 48T
69210 KLK 10(Human Kallikrein 10) ELISA Kit 人*10 48T
69211 PLC Gamma1(Human Phospholipase C Gamma1) ELISA Kit 人磷酯酶Cγ鏈 48T
69212 NA(Human neuraminidase) ELISA Kit 人神經(jīng)氨酸酶 48T
69213 PIPLC(Human phosphoinositide-specific phospholipase C) ELISA Kit 人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C 48T
69214 PLC(Human Phospholipase C) ELISA Kit 人磷酯酶C 48T
69215 Tyk-2(Human tyrosine kinase2) ELISA Kit 人*激酶2 48T
69216 ICE(Human Interleukin 1 Beta converting enzyme) ELISA Kit 人白介素1β轉(zhuǎn)換酶 48T
69217 ILK-1(Human integrin-linked kinase 1) ELISA Kit 人整合素連接激酶1 48T
69218 CYP21B(Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase) ELISA Kit 人細胞色素P450c21B/21-羥化酶 48T
69219 TdT(Human terminal deoxynucleotidyl transferase) ELISA Kit 人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶 48T
69220 IDO(Human indoleamine 2,3-dioxygenase) ELISA Kit 人吲哚胺2,3-雙加氧酶 48T
69221 PRSS(Human serine protease) ELISA Kit 人*蛋白酶 48T
69222 Syk(Human spleen tyrosine kinase) ELISA Kit 人脾臟*激酶 48T
69223 STK(Human serine/threonine protein kinase) ELISA Kit 人*/*蛋白磷酸酶 48T
69224 IRAK(Human interleukin receptor associated kinase) ELISA Kit 人白介素受體相關激酶 48T
69225 UK(Human urokinase) ELISA Kit 人* 48T
69226 PCK(Human phosphoenolpyruvate carboxykinase) ELISA Kit 人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 48T
69227 Human trypsin ELISA Kit 人* 48T
69228 BACE1(Human Beta-site APP-Cleaving Enzyme 1) ELISA kit 人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1 48T
69229 PDI(Human Protein disulfide-isomerase precursor) ELISA Kit 人蛋白二硫化物異構酶前體 48T
69230 PDIA3(Human protein disulfide-isomerase A3) ELISA Kit 人蛋白二硫化物異構酶A3 48T
69231 SDH(Human sorbitol dehydrogenase) ELISA Kit 人*脫氫酶 48T
69232 PPI(Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase) ELISA Kit 人肽基脯氨酰順反異構酶 48T
69233 OCT(Human ornithine carbamoyl transferase) ELISA Kit 人*氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶 48T
69234 vaspin(Human Visceral adipose-specific serine protease inhibitor) ELISA Kit 人內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑 48T
69235 PP(Human Protein Phosphatase) ELISA Kit 人蛋白磷酸酶 48T
69236 TrxR(Human thioredoxin reductase) ELISA Kit 人硫氧還蛋白還原酶 48T
69237 HLE(Human leukocyte exastase) ELISA Kit 人白細胞彈性蛋白酶 48T
69238 Human Elastase ELISA Kit 人彈性蛋白酶 48T
69239 AMS/AMY(Human Alpha-Amylase) ELISA Kit 人α* 48T
69240 ALP(Human alkaline phosphatase) ELISA Kit 人堿性磷酸酶 48T
69241 AZU(Human azurocidin) ELISA Kit 人天青殺素 48T
69242 ATA(Human Angiotensinase A) ELISA Kit 人血管緊張肽酶A 48T
69243 PAMY(Human Pancreatic Amylase) ELISA Kit 人胰* 48T
69244 AlphaENOL(Human Alpha-enolase) ELISA Kit 人α烯醇化酶 48T
69245 Human Collagenase Type II ELISA Kit 人膠原酶II 48T
69246 Human Collagenase I ELISA Kit 人膠原酶I 48T
69247 P-PKC(Human phospho Protein Kinase C) ELISA Kit 人磷酸化蛋白激酶C 48T
69248 pERK(Human phospho-extracellular signal-regulated kinase) ELISA Kit 人磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶 人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒 48T
69249 AChE(Human Acetylcholinesterase) ELISA Kit 人乙酰*酯酶 48T
69250 GOD(Human glucose oxidase) ELISA Kit 人葡萄糖氧化酶 48T
69251 TH(Human tyrosine hydroxylase) ELISA Kit 人*羥化酶 48T
69252 DDC(Human dopamine decarboxylase) ELISA Kit 人多巴胺脫羧酶 48T
69253 NNE(Human non-neuronal enolase) ELISA Kit 人非神經(jīng)元性烯醇化酶 48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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