人骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

69143 Human Resistin ELISA KIT   人抵抗素  48T
69144 ALP-B(Human Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit  人骨特異性堿性磷酸酶B  48T
69145 OT/BGP(Human Osteocalcin/Bone gla protein) ELISA kit  人骨鈣素/骨*蛋白  48T
69146 sRANKL(Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand) ELISA Kit  人可溶性核因子κB受體活化因子配基  48T
69147 1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3(Human 1,25-dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit  人1,25二羥基*3  48T
69148 Human histon-H2b ELISA Kit  人組蛋白H2b  48T
69149 OPG(Human Osteoprotegerin) ELISA KIT  人骨保護(hù)素  48T
69150 BMPR- II (Human Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit  人骨成型蛋白受體Ⅱ  48T
69151 BMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A) ELISA Kit  人骨成型蛋白受體1A  48T
69152 BMP-4(Human Bone morphogenetic protein 4) ELISA Ki  人骨成型蛋白4  48T
69153 BMP-2(Human Bone morphogenetic protein 2) ELISA Kit  人骨成型蛋白2  48T
69154 cAMP(Human cyclic adenosine monophosphate) ELISA Kit  人*  48T
69155 MASP(Human mannan binding lectin associated serine protease) ELISA Kit  人甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)*蛋白酶  48T
69156 CDK-7(Human Cyclin-dependent kinase 7) ELISA Kit  人周期素依賴性激酶7  48T
69157 CDK-2(Human Cyclin-dependent kinase 2) ELISA Kit  人周期素依賴性激酶2  48T
69158 CDK-1(Human Cyclin-dependent kinase 1) ELISA Kit  人周期素依賴性激酶1  48T
69159 AMPK(Human Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase) ELISA kit  人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶  48T
69160 LDH(Human Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit  人乳酸脫氫酶  48T
69161 ADAM9(Human A Disintegrin And Metalloprotease 9) ELISA Kit  人解整合素樣金屬蛋白酶9  48T
69162 BACE2(Human beta-site APP-cleaving enzyme 2) ELISA Kit  人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2  48T
69163 UPP1(Human uridine phosphorylase 1) ELISA Kit  人*核苷磷酸化酶1  48T
69164 ADH(Human alcohol dehydrogenase) ELISA Kit  人乙醇脫氫酶  48T
69165 RND1(Human Rho family GTPase 1) ELISA Kit  人Rho家族GTP酶1  48T
69166 RIPK2(Human receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2) ELISA Kit  人受體TNFRSF結(jié)合**激酶2  48T
69167 PLSCR1(Human phospholipid scramblase 1) ELISA KIT  人磷脂爬行酶1  48T
69168 HMGCS1(Human 3-hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A synthase 1) ELISA Kit  人3-羥基-3-甲基戊二酰*合酶1  48T
69169 EAR12(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 12) ELISA KIT  人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員12  48T
69170 EAR3(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 3)ELISA Kit  人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員3  48T
69171 EAR2(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 2)ELISA Kit  人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員2  48T
69172 DPYSL3(Human dihydropyrimidinase-like 3) ELISA Kit  人二氫嘧啶酶樣3  48T
69173 WARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase) ELISA Kit  人色氨酰tRNA合成酶  48T
69174 WARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase) ELISA Kit  人色氨酰tRNA合成酶  48T
69175 HK3(Human hexokinase 3) ELISA Kit  人己糖激酶3  48T
69176 PFKP(Human phosphofructokinase-plaet) ELISA Kit  人血小板型磷酸果糖激酶  48T
69177 UGCG(Human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit  人尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶  48T
69178 Casp4(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit  人凋亡相關(guān)半*肽酶4  48T
69179 PDXK(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit  人吡哆醛/吡哆醇*6激酶  48T
69180 DPYSL2(human dihydropyrimidinase-like 2) ELISA Kit  人二氫嘧啶酶樣2  48T
69181 SGK2(Human serum/glucocorticoid regulated kinase 2) ELISA KIT  人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2  48T
69182 MKK6(Human mitogen activated protein kinase kinase 6) ELISA Kit  人絲裂原活化蛋白激酶激酶6  48T
69183 PDXP(Human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase) ELISA Kit  人吡哆醛/吡哆醇*6磷酸酶  48T
69184 Tgtp(Human T-cell specific GTPase) ELISA Kit  人T細(xì)胞特異性鳥(niǎo)苷三磷酸酶  48T
69185 FDFT1(Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1) ELISA Kit  人法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1  48T
69186 D-LDH(Human D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit  人D-乳酸脫氫酶  48T
69187 Alpha1-AT(Human Alpha1-Antitrypsin) ELISA Kit  人α1抗*  48T
69188 KLK 1(Human Kallikrein 1) ELISA Kit  人*1  48T
69189 KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit  人*6  96T
69190 PaCoA(Human Phosphorylated acetyl CoA) ELISA Kit  人磷酸化乙酰*  48T
69191 PGAM2(Human phosphoglycerate mutase 2) ELISA Kit  人磷酸甘油酸變位酶2  48T
69192 PTGDS(Human Prostaglandin D synthase) ELISA Kit  人前列腺素D合成酶  48T
69193 PPIL1(Human peptidylprolyl isomerase(cyclophilin)-like 1) ELISA Kit  人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1 人骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 48T
69194 MAPKAPK3(Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3) ELISA Kit  人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3  48T
69195 ACE I (Human Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit  人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶  48T
69196 AP(Human Aprotinin) ELISA Kit  人*  48T
69197 Casp-12(Human Caspase 12) ELISA Kit  人胱天蛋白酶12  48T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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