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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
68973 CORT(Human Corticosterone) ELISA Kit 人皮質(zhì)酮/腎上腺酮 48T
68974 PGE2(Human Prostaglandin E2) ELISA Kit 人前列腺素E2 48T
68975 DHT(Human Dihydrotestosterone) ELISA Kit 人雙氫睪酮 48T
68976 GHRH(Human growth hormone releasing hormone) ELISA Kit 人促生長激素釋放激素 48T
68977 PROG(Human Progesterone) ELISA kit 人孕激素/孕酮 48T
68978 uE3(Human ultra Estriol) ELISA KIT 人超敏游離雌三醇 48T
68979 NA(Human Noradrenaline) ELISA Kit 人* 48T
68980 PGF(Human Prostaglandin F) ELISA Kit 人前列腺素F 48T
68981 PGE1(Human Prostaglandin E1) ELISA Kit 人前列腺素E 48T
68982 ET-1(Human Endothelin 1) ELISA Kit 人內(nèi)皮素1 48T
68983 FSH(Human follicle-stimulating hormone) ELISA Kit 人促卵泡素 48T
68984 f- BetahCG(Human free chorionic gonadotropin) ELISA KIT 人游離β絨毛膜* 48T
68985 Big ET(Human Big Endothelin) ELISA Kit 人大內(nèi)皮素 48T
68986 i-PTH(Human intact Parathormone) ELISA Kit 人全段甲狀旁腺素 48T
68987 CT(Human Calcitonin) ELISA Kit 人降鈣素 48T
68988 TSH(Human Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit 人促甲狀腺素 48T
68989 Human Cortisol ELISA Kit 人* 48T
68990 Human Cortisol ELISA Kit 人唾液* 96T
68991 E2(Human Estradiol) ELISA Kit 人雌二醇 48T
68992 T(Human Testoterone) ELISA Kit 人睪酮 48T
68993 F-TESTO(Human Free Testoterone) ELISA Kit 人游離睪酮 48T
68994 ASD(Human Androstenedione) ELISA Kit 人雄烯二酮 48T
68995 E3(Human Estriol) ELISA Kit 人雌三醇 48T
68996 17-OHP(Human 17-Hydroxyprogesterone) ELISA Kit 人17羥孕酮 48T
68997 Human Tri-iodothyronine ELISA Kit 人三碘甲狀腺原氨酸 48T
68998 Human thyroxineT4 ELISA Kit 人甲狀腺素 48T
68999 FT4(Human Free Thyroxine) ELISA Kit 人游離甲狀腺素 48T
69000 Free-T3(Human Free Tri-iodothyronine Indes) ELISA Kit 人游離三碘甲狀腺原氨酸 48T
69001 NN-T4(Human Neonatal Thyroxine) ELISA Kit 人新生甲狀腺素 48T
69002 INS(Human Insulin) ELISA Kit 人胰島素 48T
69003 Human C-Peptide ELISA Kit 人C肽 48T
69004 HCG(Human Chorionic Gonadotrophin) ELISA Kit 人絨毛膜* 48T
69005 Beta-CG(Human Chorionic Gonadotrophin Beta) ELISA Kit 人絨毛膜*β 48T
69006 LH(Human luteotropic hormone) ELISA Kit * 48T
69007 PS(Human Prednisolone) ELISA Kit 人*龍 48T
69008 LEP(Human Leptin) ELISA kit 人瘦素 48T
69009 LR/Ob-R(Human Leptin receptor) ELISA KIT 人苗條素受體 48T
69010 HGH(Human growth hormone) ELISA KIT 人生長激素 48T
69011 EPO(Human Erythropoietin) ELISA Kit 人紅細(xì)胞生成素 48T
69012 EPOR(Human Erythropoietin receptor) ELISA Kit 人紅細(xì)胞生成素受體 48T
69013 TUBB(Human Beta-tubulin) ELISA kit 人β-微管蛋白 48T
69014 PGF2 Alpha(Human Prostaglandin F2 Alpha) ELISA Kit 人前列腺素F2α 48T
69015 tPSA(Human total prostate s pecific antigen) ELISA Kit 人總前列腺特異抗原 48T
69016 HIV(Human anti-immunodeficiency virus antibody) ELISA Kit 人抗人類免疫缺陷病毒抗體 48T
69017 UU-Ab(Human Ureaplasma urealyticum antibody) ELISA Kit 人解脲脲原體抗體 48T
69018 CPSA(Human complex edprostate specific antigen) ELISA Kit 人復(fù)合前列腺特異性抗原 48T
69019 HSV II -Ab(Human Herpes simplexvirus II antibody) ELISA Kit 人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體 48T
69020 Human Estrogen-induced protein pS2 ELISA Kit 人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2 48T
69021 BV(Human bacterial vaginosis) ELISA Kit 人細(xì)菌性陰道病 48T
69022 HSV I Ab(Human Herpes simplexvirus I antibody) ELISA Kit 人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體 48T
69023 Human Estrogen-induced protein pS2 ELISA Kit 人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2 48T
69024 HPV-IgM(Human papillomavirus IgM) ELISA Kit 人乳頭狀瘤病毒抗體IgM 48T
69025 HPV-IgG(Human papillomavirus IgG) 人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒ELISA Kit 人乳頭狀瘤病毒抗體IgG 48T
69026 HSV-Ag2(Human Herpes simplex virus 2) ELISA Kit 人單純皰疹病毒抗原2 48T
69027 fPSA(Human Free Prostate Specific Antigen) ELISA Kit 人游離前列腺特異性抗原 48T
69028 PSA(Human prostate specific antigen) ELISA Kit 人前列腺特異性抗原 48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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