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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-17 20:02:05瀏覽次數(shù):225次
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人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
68809 Beta2-GP1 Ab IgM(Human Beta2-Glycoprotein 1 Antibody IgM) ELISA Kit 人β2糖蛋白1抗體IgM 48T
68810 Beta2-GP1 Ab IgG(Human Beta2-Glycoprotein 1 Antibody IgG) ELISA Kit 人β2糖蛋白1抗體IgG 48T
68811 ACA-IgM(Human anti-cardiolipin antibody IgM) ELISA Kit 人抗心磷脂抗體IgM 48T
68812 ACA-IgG(Human anti-cardiolipin antibody IgG) ELISA Kit 人抗心磷脂抗體IgG 48T
68813 AGAA(Human anti-golgi apparatus antibody) ELISA Kit 人抗高爾基體抗體 48T
68814 CT(Human Chlamydia trachomatis) ELISA Kit 人沙眼衣原體 48T
68815 S100A9(Human S100 calcium binding protein A9/calgranulin B) ELISA Kit 人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B 48T
68816 S100A8(human S100 calcium binding protein A8/calgranulin A) ELISA Kit 人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A 48T
68817 Pim1(Human proviral integration site 1) ELISA Kit 人前病毒整合位點1 48T
68818 PEA(Human Pseudomonas Exotoxin A) ELISA Kit 人綠膿桿菌外毒素A 48T
68819 FLU A(Human Influenza viruses A) ELISA Kit 人流感病毒A 48T
68820 HBsAg(Human hepatitis B virus surface antigen) ELISA Kit 人乙型肝炎表面抗原 48T
68821 HBcAb(Human anti-hepatitis B virus core antibody) ELISA Kit 人抗乙型肝炎病毒核心抗體 48T
68822 HBcAb-IgM(Human anti-hepatitis B virus core IgM) ELISA Kit 人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗體 48T
68823 HBsAb(Human anti-hepatitis B virus surface antibody) ELISA Kit 人抗乙型肝炎病毒表面抗體 48T
68824 HBeAb(Human anti-hepatitis B virus e antibody) ELISA Kit 人抗乙型肝炎病毒e抗體 48T
68825 EHF(Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgM antibody) ELISA Kit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgM 48T
68826 anti-RV(Human anti-rabies virus antibody) ELISA Kit 人抗狂犬病毒抗體 48T
68827 anti-HAV(Human anti-hepatitis A virus IgM antibody) ELISA Kit 人抗甲型肝炎病毒IgM抗體 48T
68828 anti-HAV(Human anti-hepatitis A virus IgG antibody) ELISA Kit 人抗甲型肝炎病毒IgG抗體 48T
68829 anti-PIV IgM(Human anti-parainfluenza virus IgM antibody) ELISA Kit 人抗副流感病毒IgM抗體 48T
68830 anti-HDV(Human anti-hepatitis D virus antibody) ELISA Kit 人抗丁型肝炎病毒抗體 48T
68831 Human anti-HCV ELISA Kit 人抗丙型肝炎病毒抗體 48T
68832 Human anti-typhus antibody ELISA Kit 人抗斑疹傷寒抗體 48T
68833 LLO(Human listeriolysin O) ELISA Kit 人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O 48T
68834 HBxAg(Human hepatitis B virus X Ag) ELISA Kit 人乙型肝炎病毒X抗原 48T
68835 AAV(Human adeno-associated virus) ELISA Kit 人腺相關(guān)病毒 48T
68836 HBXIP(Human hepatitis B virus X interacting protein) ELISA Kit 人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白 48T
68837 St-Ag(Human Salmonella typhi antigen) ELISA Kit 人傷寒抗原 48T
68838 HTLV- I (Human T-lymphotropicvirus I ) ELISA Kit 人類嗜T淋巴細(xì)胞Ⅰ型病毒 48T
68839 MV(Human morbillivirus) ELISA Kit 人麻疹病毒 48T
68840 EP(Human epidemic parotitis) ELISA Kit 人流行性腮腺炎 48T
68841 EHF(Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgG antibody) ELISA Kit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgG 48T
68842 Human Entamoeba histolytica Antigen ELISA Kit 人痢疾內(nèi)阿米巴抗原 48T
68843 Human Lyme IgG ELISA Kit 人萊姆IgG 48T
68844 Human Campylobacter Jejuni PEB1 ELISA Kit 人空腸彎曲菌黏附蛋白 48T
68845 CPAF(Human chlamydial protease-like activity factor) ELISA Kit 人衣原體蛋白酶樣活性因子 48T
68846 PV-IgG(Human Poliomyelitis Virus) ELISA Kit 人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG 48T
68847 T.gondii(Human Toxoplasma Gondii ELISA Kit 人剛地弓形蟲 48T
68848 anti-PIV IgG (Human Poliomyelitis Virus) ELISA Kit 人抗副流感病毒IgG抗體 48T
68849 BP(Human Bullous Pemphigoid) ELISA Kit 人大皰性類天皰瘡抗體 48T
68850 Human Enterovirus ELISA Kit 人腸病毒 48T
68851 Human echinococcus antibody IgG ELISA Kit 人包蟲抗體IgG 48T
68852 PT(Human Pertussiu Toxin) ELISA Kit 人百日咳毒素 48T
68853 C.albicans(Human Candida Albicans) ELISA Kit 人白色念珠菌 48T
68854 Human Coronaviruses IgG ELISA kit 人流行性乙型腦炎抗體IgG 48T
68855 Human Coronaviruses IgG ELISA kit 人冠狀病毒 48T
68856 LTB(Human heat-labile enterotoxin B subunit) ELISA Kit 人不耐熱腸毒素B亞單位 48T
68857 CT(Human Chlamydia trachomatis) ELISA Kit 人沙眼衣原體抗體 48T
68858 Human schistosoma ELISA Kit 人血吸蟲 48T
68859 RV Ag(Human Rotavirus antigen) ELISA Kit 人輪狀病毒抗原 48T
68860 LP Ag(Human Legionella pneumophila antigen) ELISA Kit 人軍團菌抗原 48T
68861 Human colicin ELISA Kit 人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 人大腸菌素 48T
68862 ADV-Ag(Human Adenovirus Antigen) ELISA Kit 人腺病毒抗原 48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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