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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-12 12:05:02瀏覽次數(shù):188次
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人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。
人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
68639 GM(Human Gastric Mucin) ELISA Kit 人胃粘液素 48T
68640 HABP(Human Hya]uronate binding protein) ELISA Kit 人透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白 48T
68641 NTX(Human cross linked N-opeptide of type I collagen) ELISA Kit 人Ⅰ型膠原N末端肽 48T
68642 Hp-IgM(Human Helicobacter pylori IgM) ELISA Kit 人幽門螺旋桿菌IgM 48T
68643 CagA(Human Cytotoxin-associated protein) ELISA Kit 人細胞毒素相關蛋白A 48T
68644 GIP(Human gastric inhibitory polypeptide) ELISA Kit 人胃抑素 48T
68645 GRP(Human gastrin-reliasing peptide) ELISA Kit 人胃泌素釋放多肽 48T
68646 ProGRP(Human pro-gastrin-releasing peptide) ELISA Kit 人胃泌素釋放肽前體 48T
68647 HCB II (Human Collagen-like Bioprotein II ) ELISA Kit 人膠原蛋白Ⅱ 48T
68648 Human Secretin ELISA Kit 人促胰液素/胰泌素 48T
68649 Human Peptide YY ELISA Kit 人多肽YY 48T
68650 GsaR(Human gastrin receptor) ELISA Kit 人促胃液素受體 48T
68651 CCK-8(Human cholecystokinin octapeptide) ELISA Kit 人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽 96T
68652 TAP(Human trypsinogen activation peptide) ELISA Kit 人*原激活肽 48T
68653 Alpha1-AGP(Human Alpha1-Acid glycoprotein) ELISA Kit 人α1酸性糖蛋白 48T
68654 eNOS-3(Human Alpha1-Acid glycoprotein) ELISA Kit 人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 48T
68655 MDA(Human malondialchehyche) ELISA Kit 人丙二醛 48T
68656 Human Amylin ELISA Kit 人胰淀素 48T
68657 MTL(Human Motilin) ELISA Kit 人血管活性腸肽 48T
68658 CCK(Human cholecystokinin) ELISA Kit 人膽囊收縮素/腸促*肽 48T
68659 P III NP(Human N-terminal procollagen III propeptide) ELISA Kit 人Ⅲ型前膠原肽 48T
68660 Col II (Human Collagen Type II ) ELISA Kit 人Ⅱ型膠原 48T
68661 Col I (Human Collagen Type I ) ELISA Kit 人Ⅰ型膠原 48T
68662 P I CP(Human procollagen III N-terminal peptide) ELISA Kit 人Ⅰ型前膠原羧基端肽 48T
68663 HA(Human Hyaluronic acid) ELISA Kit 人透明質(zhì)酸 96T
68664 Col IV (Human Collagen Type IV ) ELISA KIT 人Ⅳ型膠原 48T
68665 Col III (Human Collagen Type III ) ELISA KIT 人Ⅲ型膠原 48T
68666 LN(Human Laminin) ELISA KIT 人層連蛋白/板層素 48T
68667 FN(Human Fibronectin) ELISA Kit 人纖連蛋白 48T
68668 Nogo-A Ab(Human anti-Nogo-A antibody) ELISA Kit 人NOGO-A抗體 48T
68669 tTG-IgA(Human Anti-tissue transglutaminase IgA) ELISA kit 人抗組織轉(zhuǎn)*酶抗體IgA 48T
68670 Surv(Human anti-Survivin antibody) ELISA Kit 人抗存活素抗體/生存蛋白 48T
68671 GM-CSF Ab(Human anti-Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor antibody) ELISA Kit 人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子抗體 48T
68672 TTN(Human Anti-titin Antibody) ELISA Kit 人抗肌聯(lián)蛋白抗體 48T
68673 PsmAb(Human anti-presynaptic membrane antibody) ELISA Kit 人抗突觸前膜抗體 48T
68674 AT2R-Ab(Human Angiotensin II Receptor 2 antibody) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅱ受體2抗體 48T
68675 AT II R1(Human angiotension II receptor 1 Antibody) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅱ受體1抗體 48T
68676 ANG- I R(Human angiotension I receptor Antibody) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅰ受體抗體 48T
68677 OVA sIgG(Human ovalbumin specific IgG) ELISA Kit 人卵清蛋白特異性IgG 48T
68678 CAM-ab(Human anti-calmodulin specific antibody) ELISA Kit 人抗鈣調(diào)素特異抗體 48T
68679 THAA(Human thyroid hormone autoantibodies) ELISA Kit 人甲狀腺非肽激素抗體 48T
68680 SCA(Human steroid producing cell autoantibody) ELISA Kit 人抗類固醇生成細胞抗體 48T
68681 GS-ANA(Human granulocyte specific antinuclear antibody) ELISA Kit 人粒細胞特異性抗核抗體 48T
68682 SRP(Human signal recognization particle antibody) ELISA Kit 人抗信號識別顆??贵w 48T
68683 BA(Human Blocking antibody) ELISA Kit 人封閉抗體 48T
68684 cmDNA(Human anti-cell membrane DNA antibody) ELISA Kit 人抗細胞膜DNA抗體 48T
68685 ACAST-D IV (Human autoantibodies against the C-terminal domain IV ) ELISA Kit 人抗鈣蛋白酶抑素抗體 48T
68686 OVA sIgE(Human ovalbumin specific IgE) ELISA Kit 人卵清蛋白特異性IgE 48T
68687 AFA/snoRNP/U3RNP(Human anti-fibrillarin antibody) ELISA Kit 人抗核仁纖維蛋白抗體 48T
68688 SLE(Human systemic lupus erythematosus) ELISA Kit 人系統(tǒng)性紅斑狼瘡 48T
68689 GM1(Human anti-ganglioside antibody) ELISA Kit 人抗*抗體 48T
68690 MAG Ab(Human anti-myelin associated glycoprotein antibody) ELISA Kit 人抗髓鞘相關糖蛋白抗體人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 48T
68691 ANGA(Human anti-neutrophil granules antibody) ELISA Kit 人抗中性粒細胞顆??贵w 48T
68692 ANA(Human anti-neutrophil antibody) ELISA Kit 人抗中性粒細胞抗體 48T
68693 Apo A1(Human anti-apolipoprotein A1 antibody) ELISA Kit 人抗載脂蛋白抗體A1 48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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