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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
68583 PEDF(Human pigment epithelium-derived factor) ELISA Kit 人色素上皮衍生因子 48T
68584 CC16(Human Clara cell protein) ELISA Kit 人克拉拉細(xì)胞蛋白 48T
68585 HIF-1 Alpha (Human hypoxia-inducible factor 1 Alpha) ELISA Kit 人低氧誘導(dǎo)因子1α 48T
68586 MC Ab(Human melanocyte antibody) ELISA Kit 人黑色素細(xì)胞抗體 48T
68587 TFR/CD71(Human transferrin receptor) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 48T
68588 P53(Human p53/tumor protein) ELISA kit 人P53 48T
68589 Human Cyclin-D3 ELISA Kit 人細(xì)胞周期素D3 48T
68590 Human Cyclin-D2 ELISA Kit 人細(xì)胞周期素D2 48T
68591 Human Cyclin-D1 ELISA Kit 人細(xì)胞周期素D1 48T
68592 ES(Human Endostatin) ELISA Kit 人內(nèi)皮抑素 48T
68593 FE(Human ferritin) ELISA Kit 人鐵蛋白 48T
68594 MTF(Human microtransferrinuria) ELISA Kit 人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白 48T
68595 TIMP-1(Human tissue inhibitor of metal protease 1) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1 48T
68596 MBP(Human myelin basic protein autoantibody) ELISA Kit 人髓鞘堿性蛋白抗體 48T
68597 TPA(Human Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit 人組織多肽抗原 48T
68598 Human lung cancer Marker ELISA Kit 人肺癌標(biāo)志物 48T
68599 human gastric carcinoma Marker ELISA Kit 人胃癌標(biāo)志物 48T
68600 HSCCAg-2(uman Squamous Cell Carcinoma Antigen 2) ELISA Kit 人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2 48T
68601 Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 ELISA Kit 人胰腺癌標(biāo)志物CA242 48T
68602 Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit 人胃腸癌標(biāo)志物CA199 48T
68603 Human mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit 人乳腺癌標(biāo)志物-CA153 48T
68604 Human ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit 人卵巢癌標(biāo)志物CA125 48T
68605 AFP(Human Alpha-fetoprotein) ELISA Kit 人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白 48T
68606 CEA/CD66(Human carcinoembryonic antign) ELISA Kit 人癌胚抗原 48T
68607 TIMP-4(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 4) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4 48T
68608 TIMP-3(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3 48T
68609 TIMP-2(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2 48T
68610 OSM(Human Oncostatin-M) ELISA KIT 人抑瘤素M 48T
68611 SP-D(Human Pulmonary surfatcant-associated protein D) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D 48T
68612 SP-C(Human Pulmonary surfatcant-associated protein C) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C 48T
68613 SP-B(Human Pulmonary surfatcant-associated protein B) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B 48T
68614 SP-A(Human Surfactant Protein A) ELISA Kit 人表面活性蛋白A 48T
68615 MP-Ab(Human Mycoplasma pneumoniae antibody) ELISA Kit 人肺炎支原體抗體 48T
68616 Cpn-Ab(Human Chlamydia pneumoniae antibody) ELISA Kit 人肺炎衣原體抗體 48T
68617 LRP(Human Lung resistance-related protein) ELISA Kit 人肺耐藥蛋白 48T
68618 AACT(Human Alpha1 Antichymotrypsin) ELISA Kit 人α1抗胰* 48T
68619 SP-A(Human Pulmonary surfatcant-associated protein A) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A 48T
68620 HP-CagA-IgG(Human Helicobacter pylori cytotoxin-associated gene A protein IgG) ELISA Kit 人幽門螺桿菌細(xì)胞毒素相關(guān)基因蛋白A-IgG 48T
68621 MUC7(Human Mucin-7) ELISA Kit 人粘蛋白/粘液素7 48T
68622 TGM2(human transglutaminase 2C polypeptide) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)*酶2C多肽 48T
68623 P I NP(Human procollagen I N-terminal peptide) ELISA Kit 人Ⅰ型前膠原N端前肽 48T
68624 I CTP(Human Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type I collagen) ELISA Kit 人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽 48T
68625 CTX- I (Human C-opeptide of type I collagen) ELISA Kit 人Ⅰ型膠原C端肽 48T
68626 MUC5AC(Human Mucin-5 subtype AC) ELISA Kit 人粘蛋白/粘液素5AC 48T
68627 ALT/GPT(Human Alanine Aminotransferase) ELISA Kit 人*轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶 48T
68628 GOT/GPT(Human Aspartate aminotransferase) ELISA Kit 人天*轉(zhuǎn)氨酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶 48T
68629 HL(Human hepatic lipase) ELISA Kit 人肝脂酶 48T
68630 HPA(Human Heparanase) ELISA kit 人乙酰肝素酶 48T
68631 HELIX- II (Human type II collagen helical peptide) ELISA Kit 人Ⅱ型膠原螺旋肽 48T
68632 FRA(Human fibronection related antigen) ELISA Kit 人纖維連接素相關(guān)抗原 48T
68633 GCA(Human gastrin cell antibody) ELISA Kit 人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒人胃泌素細(xì)胞抗體 48T
68634 GDH/GLDH(Human Glutamate dehydrogenase) ELISA Kit 人*脫氫酶 48T
68635 HHC II (uman heparin cofactor II ) ELISA Kit 人肝素輔因子Ⅱ 48T
68636 CA(Human Cholic acid) ELISA Kit 人膽酸 48T
68637 Hp-IgG(Human Helicobacter pylori IgG ) ELISA Kit 人幽門螺旋菌IgG 48T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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