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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-26 09:19:41瀏覽次數(shù):204次
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人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
68475 EM-2(Human endomorphin-2) ELISA Kit 人內(nèi)*肽-2 48T
68476 Alpha-EP(Human Alpha-Endomorphin) ELISA Kit 人α-內(nèi)*肽 48T
68477 INH(Human Inhibin) ELISA Kit 人抑制素 48T
68478 NAIP(Human neuronal apoptosis inhibitory protein) ELISA Kit 人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白 48T
68479 OX-B(Human Orexin B) ELISA Kit 人食欲素/阿立新B 48T
68480 DSIP(Human delta sleep-inducing peptide) ELISA Kit 人促睡眠肽 48T
68481 6-OHDA(Human 6-hydroxydopamine) ELISA Kit 人6-羥多巴胺 48T
68482 ANF(Human atrial natriuretic factor) ELISA Kit 人心納素 48T
68483 p2(Human myelin protein 2) ELISA Kit 人神經(jīng)髓鞘蛋白 48T
68484 AVP(Human arginine vasopressin) ELISA Kit 人*加壓素 48T
68485 PACAP(Human pituitary adenylate cyclase activating polypeptide) ELISA Kit 人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽 48T
68486 MAP-2(Human microtubule-associated protein 2) ELISA Kit 人微管相關(guān)蛋白2 48T
68487 NF(Human neurofilament protein) ELISA Kit 人神經(jīng)絲蛋白 48T
68488 KP(Human kaliuretic peptide) ELISA Kit 人利鉀尿肽 48T
68489 NT(Human Neurotensin) ELISA Kit 人神經(jīng)降壓素 48T
68490 NKB(Human Neurokinins B) ELISA Kit 人神經(jīng)激肽B 48T
68491 Dyn(Human dynorphin) ELISA Kit 人強(qiáng)啡肽 48T
68492 ENK(Human enkephalin) ELISA Kit 人腦啡肽 48T
68493 P Gamma(Human Peptide Gamma) ELISA Kit 人γ肽 48T
68494 CNP(Human C -type natriuretic peptide) ELISA Kit 人C型鈉尿肽 48T
68495 Orexin A(Human Orexin A) ELISA Kit 人阿立新A 48T
68496 NP-Y(Human neuropeptide Y) ELISA Kit 人神經(jīng)肽Y 48T
68497 BGP/Gehrelin(Human brain-gut peptides) Elisa kit 人腦腸肽 48T
68498 ACH(Human acetylcholine) ELISA Kit 人乙酰* 48T
68499 BNP(Human brain natriuretic peptide) ELISA Kit 人腦鈉素/腦鈉尿肽 48T
68500 CK20(Human cytokeratin 20) ELISA Kit 人細(xì)胞角蛋白20 48T
68501 Beta-EP(human Beta-Endorphin) ELISA Kit 人β內(nèi)啡肽 48T
68502 NT-proBNP(Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide) ELISA KIT 人N端前腦鈉素 48T
68503 Pro-ANP(Human Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 人前心鈉肽 48T
68504 CK-13(Human cytokeratin 13) ELISA Kit 人細(xì)胞角蛋白13 48T
68505 CK17(Human cytokeratin 17) ELISA Kit 人細(xì)胞角蛋白17 48T
68506 OSMR(human oncostatin M receptor) ELISA Kit 人制瘤素M受體 48T
68507 Bcl3(human B-cell leukemia/lymphoma 3) ELISA Kit 人B細(xì)胞淋巴瘤因子3 48T
68508 OIT3(human oncoprotein induced transcript 3) ELISA Kit 人癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3 48T
68509 Human P27 protein ELISA Kit 人P27蛋白 48T
68510 P-gp(Human permeability glycoprotein) ELISA Kit 人P糖蛋白/滲透性糖蛋白 48T
68511 CCSA-3(Human colon cancer-specific antigen-3) ELISA kit 人大腸癌專一抗原3 48T
68512 CCSA-2(Human colon cancer-specific antigen-2) ELISA kit 人大腸癌專一抗原2 48T
68513 CCSA-4(Human colon cancer-specific antigen-4) ELISA kit 人大腸癌專一抗原4 48T
68514 MUC5B(Human mucin-5 subtype B) ELISA kit 人粘蛋白/粘液素5B 48T
68515 ITF(Human Intestinal trefoil factor) ELISA Kit 人腸三葉因子 48T
68516 DKK1(Human Dickkopf 1) ELISA Kit 人Dickkopf 1 48T
68517 KLK 11(Human Kallikrein 11) ELISA Kit 人*11 48T
68518 CED-3(Human caenorhabditis elegans death gene) ELISA Kit 人美麗線蟲凋亡基因 48T
68519 TLa(Human thymus-leukemia antigen) ELISA Kit 人胸腺白血病抗原 48T
68520 TSTA(Human tumor specific transplantation antigen) ELISA Kit 人腫瘤特異性移植抗原 48T
68521 PCX(Human Podocalyxin) ELISA Kit 人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白 48T
68522 BRCA-1(Human breast cancer susceptibility protein 1) ELISA Kit 人乳腺癌易感蛋白1 48T
68523 TALLA-1/CD231(Human T-cell acute lymphoblastic leukemia antigen) ELISA Kit 人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原 48T
68524 Ag-NORs(Human Argyrophilic nucleolar organizer region proteins) ELISA Kit 人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白 人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒 48T
68525 Trx(Human Thioredoxin) ELISA Kit 人硫氧化還原蛋白 48T
68526 Cav-1(Human Caveolin-1) ELISA KIT 人窖蛋白 48T
68527 CALLA(Human common acute lymphocytic leukaemia antigen) ELISA Kit 人普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原 48T
68528 MSH(Human melanocyte stimulating hormone) ELISA Kit 人黑色素細(xì)胞刺激素 48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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