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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-14 13:34:24瀏覽次數:128次
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人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
68079 EGF 大鼠表皮生長因子 48T
68080 EGFR 大鼠表皮生長因子受體 48T
68081 rat-VEGF/ELISA 大鼠血管內皮生長因子 48T
68082 human-VEGF-D 大鼠血管內皮生長因子D 48T
68083 VEGF-R1 大鼠血管內皮生長因子受體1 48T
68084 VEGF-R2 大鼠血管內皮生長因子受體2 48T
68085 UPAR 大鼠*樣纖溶酶原活化物受體 48T
68086 TH1/TH2 大鼠細胞內細胞因子 48T
68087 HLA-G 大鼠白細胞抗原G 48T
68088 CTGF 大鼠結締組織生長因子 48T
68089 MIP-1 Alpha 大鼠巨噬細胞炎性蛋白-1α 48T
68090 MIP-1 Gamma 大鼠巨噬細胞炎性蛋白-1γ 48T
68091 MIP-1 Beta 大鼠巨噬細胞炎性蛋白-1β 48T
68092 MIP-2 大鼠巨噬細胞炎性蛋白-2 48T
68093 MIP-3 Alpha 大鼠巨噬細胞炎性蛋白-3α 48T
68094 MIP-3 Beta 大鼠巨噬細胞炎性蛋白-3β 48T
68095 MIP-4 大鼠巨噬細胞炎性蛋白-4 48T
68096 MIP-5 大鼠巨噬細胞炎性蛋白-5 48T
68097 MCP-1 大鼠巨噬細胞趨化蛋白-1 48T
68098 Ret MMP-9 大鼠血清金屬基質蛋白酶-9 48T
68099 RANTES 大鼠趨化因子 48T
68100 E2(Ret) 大鼠雌二醇 96T
68101 G-CSF 大鼠粒細胞-集落刺激因子 48T
68102 GM-CSF 大鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子 48T
68103 M-CSF 大鼠巨噬細胞-集落刺激因子 48T
68104 LIF 大鼠白血病抑制因子 48T
68105 IGF-1 大鼠胰島素樣生長因子-1 48T
68106 IGF- II 大鼠胰島素樣生長因子-Ⅱ 48T
68107 ICAM- I 大鼠細胞間粘附因子-Ⅰ 48T
68108 VCAM-1 大鼠血管內皮細胞間粘附因子-1 48T
68109 L-selectin 大鼠可溶性L-選擇素 48T
68110 E-selectin 大鼠可溶性E-選擇素 48T
68111 P-selectin 大鼠可溶性P-選擇素 48T
68112 PDGF-AB 大鼠血小板衍生生長因子 48T
68113 PKB (Rat) 大鼠蛋白激酶B 48T
68114 PDGF-BB 大鼠血小板衍生生長因子-BB 48T
68115 PGE1 大鼠前列腺素1 48T
68116 PGE2 ELISA KIT 大鼠前列腺素2 48T
68117 P53 大鼠P53蛋白 48T
68118 Osteocalcin 大鼠骨鈣素 48T
68119 Oxytoxin 大鼠催產素 48T
68120 UPAR 大鼠*受體 48T
68121 progesterone 大鼠孕酮 48T
68122 prolactin 大鼠催乳素 48T
68123 Substance P 大鼠P物質 48T
68124 BDNF 大鼠腦衍化神經營養(yǎng)因子 48T
68125 Testosterone 大鼠睪酮 48T
68126 PCNA 大鼠增殖細胞核抗原 48T
68127 BMP-2 大鼠骨形成蛋白-2 48T
68128 BMP-4 大鼠骨形成蛋白-4 48T
68129 GDNF 大鼠神經膠質細胞系衍化神經營養(yǎng)因子 48T
68130 BFGF 人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA試劑盒大鼠堿性成纖維細胞因子 48T
68131 HGF 大鼠肝細胞生長因子 48T
68132 NE(Humen) 大鼠* 48T
68133 DA 大鼠多巴胺 48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F(xiàn)在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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