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人骨涎蛋白（BSP）ELISA試劑盒

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人骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

67796 IL-1 Beta  人白介素-1β 48T
67797 IL-2  人白介素-2 48T
67798 sIL-2R  人可溶性白介素-2受體 48T
67799 IL-3  人白介素-3 48T
67800 IL-4  人白介素-4 48T
67801 IL-5  人白介素-5 48T
67802 IL-6  人白介素-6 48T
67803 sIL-6R/gp130  人可溶性白介素-6受體 48T
67804 IL-8  人白介素-8 48T
67805 IL-10  人白介素-10 48T
67806 IL-11  人白介素-11 48T
67807 IL-12  人白介素-12 48T
67808 IL-13  人白介素-13 48T
67809 IL-14(human)  人白介素-14 96T
67810 IL-15  人白介素-15 48T
67811 IL-16  人白介素-16 48T
67812 IL-17  人白介素-17 48T
67813 IL-18  人白介素-18 48T
67814 IL-19  人白介素-19 48T
67815 IL-20  人白介素-20 48T
67816 IL-21  人白介素-21 48T
67817 IL-22  人白介素-22 48T
67818 IL-23  人白介素-23 48T
67819 human PL-A2 (phospholipase A2)  人磷脂酶A2 48T
67820 Human visfatin  人內(nèi)臟脂肪素 48T
67821 Humen IFN－ Alpha  人α－干擾素 48T
67822 Humen IFN－ Beta  人β-干擾素 48T
67823 Humen IFN－ Gamma  人γ－干擾素 48T
67824 Collagen I  人I型膠原 48T
67825 PINP  人I型前膠原肽 48T
67826 Collagen III  人III型膠原 48T
67827 PIIICP  人III型前膠原肽（C端） 48T
67828 PIIINP  人III型前膠原肽（N端） 48T
67829 Collagen IV  人IV型膠原 48T
67830 Collagen VI  人VI型膠原 48T
67831 HA  人透明質(zhì)酸 48T
67832 LN  人層粘連蛋白 48T
67833 ChRM2(Human)  人毒蕈堿型乙酰*受體M2 48T
67834 CINC(human)  中性粒細(xì)胞趨化因子(人) 48T
67835 Anti- Alpha-IFN－b (humen)  抗人α干擾素受體 48T
67836 Activin A  人活化素 A 48T
67837 ALCAM  人白細(xì)胞活化粘附因子 48T
67838 cAMP  人環(huán)-磷酸腺苷 48T
67839 ANG  人血管緊張素 48T
67840 BCL-2(humen)  人細(xì)胞凋亡相關(guān)基因BCL-2 48T
67841 P-Cadherin  人P-鈣粘附蛋白 48T
67842 Calcitonin  人降鈣素 48T
67843 AMA(Anti-mitochon-drial Anti-body)  人抗線粒體抗體 48T
67844 adiponectin(humen)  人脂聯(lián)素 48T
67845 ET-1  人內(nèi)皮素 48T
67846 Humen I－PTH  人全段甲狀腺旁激素 96T
67847 Bax(humen) 人骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒 人細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Bax 48T
67848 BCL-2(humen)  人細(xì)胞凋亡相關(guān)基因BCL-2 48T
67849 NR1/NMDAR1 human  人N-甲基-D-天冬氨酸受體-1 48T
67850 Human PAF (plaetactivating factor)  人血小板活化因子 48T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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