人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

67682 MRP1(Multidrug Resistanec-Associated Protein 1)  多藥耐藥相關(guān)蛋白1(抗原)  0.5mg
67683 LRP/MVP (Lung resistance related protein)  肺耐藥相關(guān)蛋白(抗原)  0.5mg
67684 MSLN(mesothelin)  間皮素(多肽抗原)  0.5mg
67685 MSH2 (mutS homolog 2)  MSH2抗原  0.5mg
67686 NKR(Neuromedin B Receptor)  神經(jīng)激肽B受體（抗原）  0.5mg
67687 NF-L(Neurofilament triplet L)  低分子量神經(jīng)絲蛋白（抗原）  0.5mg
67688 NF-M (Neurofilament triplet M)  中分子量神經(jīng)絲蛋白（抗原）  0.5mg
67689 NF-H(Neurofilament triplet H)  高分子量神經(jīng)絲蛋白(抗原)  0.5mg
67690 NIS(Na+/I-symporter;NIS)  鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白（多肽抗原）  0.5mg
67691 NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB)  細(xì)胞核因子或稱k基因結(jié)合核因子(多肽抗原)  0.5mg
67692 NR2A (Glutamate receptor2A)  *受體（N端抗原）  0.5mg
67693 NRP-1(neuropilin-1)  神經(jīng)纖毛蛋白-1(抗原)  0.5mg
67694 NRP-2(neuropilin-2)  神經(jīng)纖毛蛋白-2（抗原）  0.5mg
67695 NSBP1(Nucleosome-binding protein 1)  核小體結(jié)合蛋白1(抗原)  0.5mg
67696 NTP，Neurual thread protein  神經(jīng)絲蛋白（抗原）  0.5mg
67697 OAT-1 (Organic anion transporter 1)human  陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(人源）  0.5mg
67698 OAT-1 (Organic anion transporter 1)mouse、rat  陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1（大、小鼠同源：人源見bs-0606P）  0.5mg
67699 OAT-3(Organic anion transporter 3)  陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-3(抗原)  0.5mg
67700 galectin 9   半乳糖凝集素9（抗原）  0.5mg
67701 Oct-4  胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白(多肽)  0.5mg
67702 OPN(osteopontin)  骨橋蛋白（抗原）  0.5mg
67703 P16/CDKN2A (Cyclin-dependent kinase inhibitor-2A)  抑癌基因p16（抗原）  0.5mg
67704 p21/WAF1/CIP1   p21 核分裂抑制因子之一（抗原）  0.5mg
67705 p27 (cyclin-dependent kinase inhibitor 1B)  p27(抗原)  0.5mg
67706 P63 protein  P63 腫瘤抑制基因（抗原）  0.5mg
67707 OPG(Osteoprotegerin)  護(hù)骨素(多肽抗原)  0.5mg
67708 OPGL (Osteoprotegerin ligand)  骨保護(hù)蛋白配體(抗原)  0.5mg
67709 P311 protein  增生性瘢痕相關(guān)蛋白（抗原）  0.5mg
67710 PARP(poly ADP-ribose polymerase)  多腺苷二磷酸多聚酶抗原  0.5mg
67711 Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human  內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素（人：N端多肽）、內(nèi)臟脂肪素、 又稱：前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子、內(nèi)肥素、腹脂素  0.5mg
67712 Visfatin-1 (PBEF1)(NT) hu、 mo、 rat、MK  內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素（人、大、小鼠、猴同源：N端多肽）、內(nèi)臟脂肪素、前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子、內(nèi)肥素、腹脂素  0.5mg
67713 Visfatin-2(CT)hu、mo、rat、MK  內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素（抗人、大、小鼠、猴：N端多肽）前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子、內(nèi)肥素、腹脂素  0.5mg
67714 PEDF (pigment epithelium-derived factor)  色素上皮源性因子(多肽抗原）  0.5mg
67715 PAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c)  磷脂酸磷酸酶2C（抗原）  0.5mg
67716 PEPT1 (Peptide-transporters 1)  腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)多肽  0.5mg
67717 PTEN/MMAC1  一種腫瘤抑制基因抗原  0.5mg
67718 PIBF(progesterone induced blocking factor)  孕激素誘導(dǎo)阻斷因子(抗原)  0.5mg
67719 PIWIL1(piwi-like 1)  piwi 樣1蛋白(抗原)  0.5mg
67720 PPAR Gamma (peroxisome proliferator-activated receptor-gamma)  過(guò)氧化酶活化增生受體γ（抗原）  0.5mg
67721 PP2Ac  蛋白磷酸酶4(抗原)  0.5mg
67722 Runx3  一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因(抗原)  0.5mg
67723 RRAD (Ras-related associated with diabetes )  RRAD(多肽抗原)  0.5mg
67724 SDF-1/CXCL12 (stromal cell derived factor-1)  基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(抗原)  0.5mg
67725 shank1(SH3 and multiple anleyrin repead domins protein 1)  shank1多肽抗原  0.5mg
67726 slc22A17 (solute carrier famili 22)  溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族22成員17(多肽抗原)  0.5mg
67727 SLC24A5 (solute carrier family 24, member 5)  可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC24A5（抗原）  0.5mg
67728 solute carrier family 1  溶質(zhì)攜帶物家族-1(抗原)  0.5mg
67729 SLC6A4 (solute carrier family 6)  鉀依賴鈉鈣交換蛋白6(抗原)  0.5mg
67730 Survivin  細(xì)胞凋亡抑制因子的一種（抗原）  0.5mg
67731 BIRC5/Survivin variant  細(xì)胞凋亡抑制因子4（抗原）  0.5mg
67732 SSA/RO (ribonucleoprotein complex,RNP)  核糖核蛋白抗原RO/SSA(抗原)  0.5ml
67733 SSB/La(Sjogren syndrome type B Anti-gen)  抗干燥癥SSB/La蛋白抗原  0.5mg
67734 Smad2(Mothers against decapentaplegic homolog 2)  Smad 2/3(抗原)  0.5mg
67735 SPAG5/map126   人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA試劑盒精子相關(guān)抗原5(多肽抗原)  0.5mg
67736 SP-A (pulmonary surfactant-associated glycoprotein A)  肺表面活性蛋白A(抗原)  0.5mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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