人羥*糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人羥*糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

67626 GFP (Green Fluorecent protein)  綠色熒光蛋白（多肽抗原）  0.5mg
67627 EGFP protein/rEGFP/Recombinant EGFP(Enhanced Green Fluorecent protein)  重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白  100ug
67628 00  00  0.5mg
67629 GHR (growth hormone receptor)  生長激素受體(抗原)  0.5mg
67630 GLUT1(Glucose transporter type 1)  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（抗原）  0.5mg
67631 hypothetical protein (LOC55652)  hypothetical protein 抗原  0.5mg
67632 HCCR-1(BRI3 binding protein)  人宮頸癌基因/bri3結(jié)合蛋白(抗原)  0.5mg
67633 pre S1/S2 protein [HBV]  乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2(抗原)  0.5mg
67634 HCV-HCBP1/ACY-3(Hepatitis C virus core-binding protein 1)  丙型肝炎病毒核心蛋白結(jié)合蛋白-1（抗原）  0.5mg
67635 HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P)  人類皰疹病毒8抗原  0.5mg
67636 HHV8/ORF K2/vIL-6(Human herpesvirus 8)  人類皰疹病毒8抗原  0.5mg
67637 HIF-1Alpha (Hypoxia-inducible factor -1Alpha)  缺氧誘導(dǎo)因子1α （抗原）  0.5mg
67638 HIV gp41  艾滋病病毒（抗原）  0.5ml
67639 histone H3-like protein  抗組蛋白H3樣抗原  0.5mg
67640 histone H3-like protein  抗組蛋白H3樣蛋白（C端抗原）  0.5mg
67641 histone H3-like protein  抗組蛋白H3樣蛋白（N端抗原）  0.5mg
67642 HIV-1(human immunodeficiency virus type 1)  艾滋病病毒-1/人類免疫缺陷病毒1型(抗原)  0.5mg
67643 HIV-1(human immunodeficiency virus type 1)  艾滋病病毒-1/人類免疫缺陷病毒1型(抗原)  0.5mg
67644 Measles virus protein(Plant2 derived measles virus hemagglutinin protein)  麻疹病毒紅血球凝集素蛋白多肽  0.5mg
67645 Measles virus protein(Plant2 derived measles virus hemagglutinin protein)  麻疹病毒紅血球凝集素蛋白多肽  0.5mg
67646 HMGB1 (High Mobility Group Box protein 1)  高遷移率族蛋白-1(抗原)  0.5mg
67647 HSL(hormone-sensitive lipase)  荷爾蒙敏感脂肪酸（抗原）  0.5mg
67648 HSP-27(Heat Shock Protein 27)  熱休克蛋白-27(抗原)  0.5mg
67649 HSP-90Alpha(Heat Shock Protein 90Alpha )  熱休克蛋白90α(抗原)  0.5mg
67650 HSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta)  熱休克蛋白-90β （抗原）  0.5mg
67651 IASPP(inhibitory member of the ASPP family)  腫瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個成員(抗原)  0.5mg
67652 CD54 ICAM-1 (Intercellular dhesion molecule 1; CD54 Anti-gen;)  細(xì)胞間粘附分子-1(多肽抗原)  0.5mg
67653 IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta)  白介素1β（白細(xì)胞介素-1β）(多肽抗原)  0.5mg
67654 IL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1)  白介素受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白（抗原）  0.5mg
67655 IL-6(Interleukin-6)  白介素6（白細(xì)胞介素-6）(多肽抗原)  0.5mg
67656 IL-10(Interleukin-10)  白介素10（白細(xì)胞介素-10）(抗原)  0.5mg
67657 IL-8  白介素8（白細(xì)胞介素-8）(抗原)  0.5mg
67658 Insulin Receptor(ISR)  胰島素受體（抗原）  0.5mg
67659 Integrin Alpha 4/ITGA4(Integrin alpha 4)  整合素-α（抗原）  0.5ml
67660 LDL-R(Low-density lipoprotein receptor precursor)  低密度脂蛋白受體(抗原)  0.5mg
67661 Ki-67 Anti-gen  Ki-67 Antigen(抗原)  0.5mg
67662 Kiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor)  腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因（抗原)  0.5mg
67663 重組K3蛋白  重組K3蛋白  0.5mg
67664 Snake poison Protein  蛇毒蛋白  0.5mg
67665 Snake poison Protein  蛇毒蛋白  1mg
67666 Batroxobin Protein  蛇毒巴曲酶全蛋白  1mg
67667 Leptin  瘦素（抗原)  0.5mg
67668 Lpin1 protein  Lpin1 protein(抗原)  0.5mg
67669 Lumbrokinase  蚯蚓纖溶酶(*抗原)  0.5mg
67670 Livin (Inhibitors of apoptosis proterins Livin)  一種新的凋亡抑制蛋白(抗原)  0.5mg
67671 p38 MAPK/MKK3/MAPKK14  絲裂原活化蛋白激酶p38(抗原)  0.5mg
67672 Metal ion transporter  擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(抗原)  0.5mg
67673 MADCAM-1  黏膜選址素（抗原）  0.5mg
67674 MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;)  髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b(抗原)  0.5mg
67675 MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a )  髓鞘相關(guān)糖蛋白(抗原)  0.5mg
67676 MAG-a (Myelin associated glycoprotein; L-MAG; )  髓鞘相關(guān)糖蛋白-a(抗原)  0.5mg
67677 MMP-1(Mous ematrix metalloproteinases-1)  基質(zhì)金屬蛋白酶-1（小鼠抗原）  0.5mg
67678 midnolin isoform Protein 1人羥*糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒  中腦核仁蛋白1（抗原）  0.5mg
67679 midnolin isoform Protein 2  中腦核仁蛋白2（抗原）  0.5mg
67680 MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A)  一種細(xì)胞應(yīng)激分子抗原  0.5mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人羥*糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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