人垂草扁桃酸(VMA) ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人垂草扁桃酸(VMA) ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

67227 Integrin Alpha4 Beta7/LPAM-1 (Lymphocyte Peyer’s patch Adhesion Molecule 1/Integrin alpha4,beta7)  整合素α4β7抗原  0.5mg
67228 Integrin AlphaE2/CD103  整合素αE2抗原  0.2ml
67229 ENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3)  ENPP3抗原  0.5mg
67230 IQGAP1  支架蛋白抗原  0.5mg
67231 IRF-1(Interferon regulatory factor-1)  干擾素調(diào)節(jié)因子抗原  0.5mg
67232 IRAK 2(IL-1 Receptor-associated Kinase 2)  白介素-1受體相關(guān)激酶2抗原  0.5mg
67233 IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist)peptide  白介素-1受體拮抗劑抗原  0.5mg
67234 Integrin a7(integrin alpha 7)  整合素α7抗原  0.5mg
67235 integrin Beta1(ITG- Beta1/CD29)  粘附分子整合素β1抗原  0.5mg
67236 Integrin Alpha5(ITG- AlphaV/CD49e)  粘附分子整合素α5抗原  0.5mg
67237 Integrin alpha V/CD51 peptide  整合素αV抗原  0.5mg
67238 JAK1(Tyrosine-protein kinase JAK1; Janus kinase 1)  蛋白質(zhì)*激酶JAK-1抗原  0.5mg
67239 JAK2(Tyrosine-protein kinase JAK2; Janus kinase 2; JAK-2)  蛋白質(zhì)*激酶JAK-2抗原  0.5ml
67240 phospho JAK2(phospho-Tyr1007+Tyr1008)  磷酸化蛋白*激酶JAK-2抗原  0.5mg
67241 JNK1/3 (c-Jun amino-terminal kinase 1/3)  c-Jun氨基末端激酶1/3多肽抗原  0.5mg
67242 phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide  磷酸化氨基末端激酶1/2/3（pJNK1/2/3）抗原  0.2ml
67243 Ki-67(Antigen identified by monoclonal antibody Ki 67)  Ki-67 Antigen  0.5mg
67244 Klf4 (Kruppel likefactor 4)  腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子抗原  0.5mg
67245 phospho-KLF5/Krueppel-like factor 5 (pSer272)  磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗原  0.5mg
67246 phospho-Klf5/CKLF/Kruppel like factor 5, Human, mo, rat, horse, bovine, rabbit, pig, dog  磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗原  0.5mg
67247 LDH(Lactate Dehydrogenase)  乳酸脫氫酶抗原  0.5mg
67248 Leptin receptor(a、b、c、d)  瘦素受體抗原(長、中、短型)  0.5mg
67249 PAFAH2/Lp-PLA2/PLA2G7(plaet-activating factor acetylhydrolase 2)  脂蛋白磷脂酶A2抗原  0.2mg
67250 Lgr5/GPR49  腸上皮干細(xì)胞蛋白（多肽）  0.5mg
67251 LH(Luteinizing Hormone)  促黃體生成素抗原  0.5mg
67252 LH(Luteinizing Hormone)  人促黃體生成素(多肽)  0.5mg
67253 LH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor)  人促黃體生成素受體抗原  0.5mg
67254 L-HDC (L-Histidine decarboxylase)  L-*脫羧酶抗原  0.5mg
67255 LIF peptide  白血病抑制因子抗原  0.5mg
67256 LIFR/CD118 peptide  白血病抑制因子受體抗原  0.5mg
67257 Lingo-1  Nogo受體作用蛋白抗原  0.5mg
67258 LIS1(Lissencephaly-1 protein)  無腦回的致病基因LIS1抗原  0.5mg
67259 LFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein)  肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原  0.5mg
67260 LFABP/FABP-2(Liver Fatty acid binding protein)  肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原  0.5mg
67261 LN (laminin)  層粘連蛋白(多肽抗原)  0.5mg
67262 Laminin Beta1 peptide  層粘連蛋白β1抗原  0.5mg
67263 lamin A  核纖層蛋白A抗原  0.5mg
67264 LOX-1/OLR1(Lectin-type oxidized LDL receptor 1)  凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體抗原  0.5mg
67265 LPLUNC1  人鼻咽癌癌基因多肽抗原  0.5mg
67266 LYVE-1(lymphalic vessel endotheilial hyaluronan receptor 1)  淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗原  0.5mg
67267 ACE( ACE, testis-specific isoform precursor)  血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(抗原)  0.5mg
67268 Integrin alpha E2 peptide  整合素alpha E2抗原  0.5mg
67269 Mac-1 (Mac-1/CR3/CD11b+CD18)  巨噬細(xì)胞表面分子抗原  0.5mg
67270 Mafa(avian)(V-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A)  v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗原  0.5mg
67271 MAGE-1 Anti-gen (Melanoma Anti-gen Recognized by T-cells 1)  黑色素瘤相關(guān)抗原  0.5mg
67272 MAPKK1 (MAP kinase kinase 1)  絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗原  0.5mg
67273 ASK1/MAPKKK5  細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1/絲裂原活化蛋白激酶激酶激酶5抗原  0.5mg
67274 Maspin (mammary serine protease inhibitor)  抑癌基因抗原  0.5mg
67275 Matriptase  蛋白裂解酶（一種新的癌基因）抗原  0.5mg
67276 HCMV UL49(Human Cytomegalovirus UL49 Gene)  人巨細(xì)胞病毒UL49抗原  0.5mg
67277 MC-1R (melanocortin-1-receptor)  黑皮質(zhì)素-1受體抗原  0.5ml
67278 Mcl-1(myeloid cell leukemia 1) 人垂草扁桃酸(VMA) ELISA試劑盒peptide  髓樣細(xì)胞白血病-1抗原  0.5mg
67279 MDM2 (urine double minute 2)  雙微體2癌基因抗原  0.5mg
67280 MDR1(multidrug resistance 1)  多藥耐藥蛋白抗原  0.5mg
67281 MEF2(myocyte enhancer-binding factor 2)  肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗原  0.5mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人垂草扁桃酸(VMA) ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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