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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-29 00:06:40瀏覽次數:136次
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人蛋白脂質蛋白抗體(PLP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人蛋白脂質蛋白抗體(PLP)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人蛋白脂質蛋白抗體(PLP)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
67171 phospho-heterochromatin protein 1 (pTyr41)peptide 異染色質蛋白1(磷酸化多肽) 0.5mg
67172 HPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16) 人類乳頭狀瘤病毒16抗原 0.5mg
67173 HPV18 E6 人類乳頭狀瘤病毒18抗原 0.5mg
67174 HPV16-E7/E7 protein(Human papillomavirus type 16) 人類乳頭狀瘤病毒16抗原 0.5mg
67175 Hpt/HP(haptoglobin) 結合珠蛋白/觸珠蛋白抗原 0.5mg
67176 H-ras/Ras/Ras p21 peptide 原癌基因H-ras抗原 0.5mg
67177 HSTF2/HSF2 peptide 熱休克轉錄因子2抗原 0.5mg
67178 BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 乳腺癌耐藥相關蛋白(抗原) 0.5mg
67179 Hrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3) HRAS樣抑制因子3抗原 0.5mg
67180 HSP47(Heat shock protein-47) 熱休克蛋白-47抗原 0.5mg
67181 HSP-90 Alpha(Heat Shock Protein 90 Alpha ) 熱休克蛋白90α抗體 0.5mg
67182 HSP-105 (heat sock protein-105) 熱休克蛋白HSP105抗原 0.5mg
67183 HtrA2/Omi peptide *蛋白酶/線粒體*蛋白酶多肽抗原 0.5mg
67184 IAA/BSA 吲哚-3-乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白 5mg
67185 Iba-1(Ionized calcium bindingadaptor molecule-1) 離子鈣接頭蛋白抗原 0.5mg
67186 IFABP(Intestinal Fatty acid binding protein) 小腸型脂肪酸結合蛋白抗原 0.5mg
67187 IFITM1 (interferon induced transmembrane protein 1) 干擾素誘導跨膜蛋白1抗原 0.5mg
67188 human IFN- Alpha (Interferon Alpha ) 干擾素-α抗原(人) 0.5mg
67189 IFNGR1/CD119 peptide 干擾素-gamma受體1抗原 0.5mg
67190 IGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2) 胰島素樣生長因子結合蛋白-2(多肽) 0.5mg
67191 IGFBP-3 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3)C-term 胰島素樣生長因子結合蛋白-3抗原 0.5mg
67192 IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 胰島素樣生長因子2 mRNA 結合蛋白3抗原 0.5mg
67193 IKB Beta (Inhibitor of KB) KB抑制蛋白β(多肽) 0.5mg
67194 IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha) KB抑制蛋白α抗原 0.5mg
67195 IL-12(Interleukin-12) 白介素12抗原(白細胞介素-12) 0.5mg
67196 IL-12(Interleukin-12)human peptide 白介素12抗原(人) 0.5mg
67197 IL-12R Beta2/IL12RB2 peptide 白細胞介素-12受體β2抗原 0.5mg
67198 IL-13(Interleukin-13) 白介素13抗原 0.5mg
67199 IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原 0.5mg
67200 IL-15(Interleukin-15) 白細胞介素-15抗原 0.5mg
67201 IL-16(Interleukin-16) 白介素16抗原 0.5mg
67202 IL-16/LCF(interleukin-16)(Lymphocyte Chemotactic Factor) 白細胞介素-16抗原 0.5mg
67203 IL-17(Interleukin-17) 白介素-17抗原 0.5mg
67204 IL-17(Interleukin-17)human 白介素-17抗原(人) 0.5mg
67205 IL-18/IGIF(Interleukin-18) 白細胞介素-18/干擾素γ誘導因子 0.5mg
67206 Anti-IL-18R alpha/CD218a 白細胞介素-18受體α鏈抗體 0.2ml
67207 IL-23R(Interleukin-23 receptor) 白介素-23受體抗原 0.5mg
67208 IL-1 Alpha (Interleukin-1 Alpha ) 白介素1α抗原 0.5mg
67209 IL-2 (Interleukin-2)Mouse、Ret 白介素2抗原(大、小鼠) 0.5mg
67210 IL-2 (Interleukin-2)Human IL-2抗原(人) 0.5mg
67211 IL-23(Interleukin-23) 白介素-23抗原 0.5mg
67212 IL-4(Interleukin-4) 白介素4抗原 0.5mg
67213 IL-4(Interleukin-4)human peptide 白介素4抗原 0.5mg
67214 IL-5 peptide 白細胞介素5抗原 0.5mg
67215 IL-6 (Interleukin-6) Human 白介素6 0.5mg
67216 IL-7(Interleukin-7) 白介素7抗原 0.5mg
67217 IL-6R Alpha (IL6R-alpha) 白細胞介素6受體α抗原 0.5mg
67218 gp130/IL-6R 白介素-6受體抗原 0.5mg
67219 IL-7Ra/CD127 peptide 白細胞介素-7受體a抗原 0.5mg
67220 ING1/p33(inhibitor of growth gene 1) 生長抑制因子基因1抗原 0.5mg
67221 Inhibin Alpha 人蛋白脂質蛋白抗體(PLP)ELISA試劑盒抑制素α抗原 0.5mg
67222 Inhibin beta A peptide 抑制素beta A抗原 0.5mg
67223 Inhibin beta B 抑制素βB抗原 0.5mg
67224 Integrin Alpha3 整合素α3抗原 0.5mg
67225 Integrin Beta5 整合素β5抗原 0.5ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人蛋白脂質蛋白抗體(PLP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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