人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

66837 Tranthyretin  甲狀腺素運(yùn)載蛋白（抗原）  0.5mg
66838 TrK A (h-NGFR) (p140- TrK A)  神經(jīng)生長因子的一種（抗原）  0.5mg
66839 TrK A.B.C   神經(jīng)生長因子的一種（抗原）  0.5mg
66840 active Caspase 3(caspase-3 p12 subunit)  活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗原  0.5mg
66841 CASP4(Caspase-4)  半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗原  0.5mg
66842 Trk B  神經(jīng)生長因子受體的一種（抗原）  0.5mg
66843 Trk B  神經(jīng)生長因子受體的一種（抗原）  0.5mg
66844 Trk C  神經(jīng)生長因子受體的一種（抗原）  0.5mg
66845 TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(NT)  促甲狀腺素受體（抗原）  0.5mg
66846 Caspase-8 (pro Mch5)  半*蛋白酶8抗原  0.5mg
66847 TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(CT)  促甲狀腺素受體（抗原）  0.5mg
66848 TY3H ( Tyrosine Hydroxylase )  *羥化酶（抗原）  0.5mg
66849 Tubulin-Alpha  微管蛋白（抗原）  0.5mg
66850 Cav-1/ETM1 peptide  細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗原  0.5mg
66851 Beta-catenin/ Beta-cats   β-連環(huán)蛋白抗原（β-β鏈接素）  0.5mg
66852 p- Beta catenin(p-beta Catenin(phosphor-Y142))  磷酸化β-連環(huán)蛋白抗原  0.5mg
66853 Tubulin- Beta  微管蛋白（抗原）  0.5mg
66854 NAIF1 protein( CB12-327)  核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1(多肽)  0.5mg
66855 cath-B/CB(Cathepsin B)  組織蛋白酶B抗原  0.5mg
66856 cath-L/CL peptide  組織蛋白酶L抗原  0.5mg
66857 CBFA1/RUNX2 (Runt-related Transcription Factor 2)  成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子（多肽）  0.5mg
66858 CBP(CREB-binding protein)  CREB結(jié)合蛋白抗原  0.5mg
66859 CBX3/HP1 gamma homolog(Chromobox homolog 3)  染色盒同源物3抗原  0.5mg
66860 CBX5(Chromobox Homolog 5)  CBX5（多肽）  0.5mg
66861 CCR-2/5(CC chemokine receptor 2/5)  CC趨化因子受體2/5抗原  0.5mg
66862 CCL1/TCA3/I-309  嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL1抗原  0.5mg
66863 CCL5/RANTES(regulated on activation normal T cell expressed and secreted)  活化T細(xì)胞表達(dá)和分泌的調(diào)節(jié)因子抗原  0.5mg
66864 CCL4/MIP-1 Beta(Macrophage Inflammatory Protein 1 beta)  巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β抗原  0.5mg
66865 MIP3 Alpha/CCL20(Macrophage inflammatory ptotein 3 alpha)  巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α抗原  0.5mg
66866 CCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12)  單核細(xì)胞趨化蛋白5抗原  0.5mg
66867 CCL14/HCC-1(C-C motif chemokine 14)  嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白14抗原  0.5mg
66868 ABCD-1/CCL22  嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原  0.2mg
66869 MIP-3 beta/ELC/CCL19(Macrophage Inflammatory Protein 3 Beta)  巨噬細(xì)胞炎性蛋白19抗原  0.5mg
66870 CCL26(Eotaxin 3)  嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白3抗原  0.5mg
66871 CCR-1(CC chemokine receptor 1)  細(xì)胞表面趨化因子受體1抗原  0.5mg
66872 CCR-3(CC chemokine receptor 3)  CC趨化因子受體3抗原  0.5mg
66873 CCR-2A(C-C Chemokine receptor 2A)  細(xì)胞表面趨化因子受體2A抗原  0.5mg
66874 CCR-4(C-C chemokine receptor 4)  細(xì)胞表面趨化因子受體4抗原  0.5mg
66875 CCR-6/CD196 peptide  細(xì)胞表面趨化因子受體6抗原  0.5mg
66876 CXCR6(CXC-chemokine receptor 6) peptide  細(xì)胞表面趨化因子受體6抗原  0.5mg
66877 CCR-7(CC chemokine receptor 7)  CC趨化因子受體7（多肽）  0.5mg
66878 CXCL10/IP-10  CXCL10趨化因子10/干擾素誘導(dǎo)蛋白10抗原  0.5mg
66879 VEGF(Vascular endothelial growth factor)  血管內(nèi)皮生長因子（多肽抗原）  0.5mg
66880 CD10/CALLA (Neutral Endopeptidase)  CD10抗原  0.5mg
66881 ZCWCC1(Zinc finger CW-type coiled-coil domain protein 1)  ZCWCC1抗原  0.5mg
66882 CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor  CD105/轉(zhuǎn)化生長因子β受體抗原  0.5mg
66883 CD138/Syndecan-1  多配體蛋白聚糖1抗原  0.5mg
66884 CD146/MCAM  黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗原  0.5mg
66885 ANPEN/CD13(Aminopeptidase N)  氨肽酶N抗原  0.5mg
66886 CD14(cluster of differentiation antigen 14)  CD14/內(nèi)毒素受體抗原  0.5mg
66887 CD28  CD28抗原  0.5mg
66888 CD166/ALCAM(activated leukocyte celladhesion molecule)  活化白細(xì)胞粘附分子抗原  0.5mg
66889 CD177/NB1 peptide  嗜中性粒細(xì)胞抗原CD177抗原  0.5mg
66890 CD24  CD24抗原 人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試劑盒 0.5mg
66891 CD24  CD24抗原  0.5mg
66892 CD2AP (CD2-associated protein)  白細(xì)胞分化抗原CD2AP  0.5mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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