人羥賴(lài)氨酸(Hyl)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人羥賴(lài)氨酸(Hyl)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

66385 Goat Anti-human IgM Whole serum  羊抗人IgM抗血清  1ml
66386 Goat Anti-human IgA Whole serum  羊抗人IgA抗血清  1ml
66387 Goat Anti-Chicken Whole serum  羊抗雞IgG抗血清  1ml
66388 Mouse Anti-human IgG Whole serum  小鼠抗人IgG抗血清  1ml
66389 Mouse Anti-human IgM Whole serum  小鼠抗人IgM抗血清  1ml
66390 Mouse Anti-Goat IgG Whole serum  小鼠抗羊IgG抗血清  1ml
66391 Mouse Anti-goat IgM Whole serum  小鼠抗羊IgM抗血清  1ml
66392 Mouse Anti-rabbit ascites  小鼠抗兔IgG抗血清  1ml
66393 Mouse Anti-rat IgG Whole serum  小鼠抗大鼠IgG抗血清  1ml
66394 Mouse Anti-Bovine IgG Whole serum  小鼠抗牛IgG抗血清  1ml
66395 Rabbit Anti-Avidin Whole serum  兔抗親和素抗血清  1ml
66396 Rabbit Anti-Biotin Whole serum  兔抗*抗血清  1ml
66397 Rabbit Anti-Bovine IgG Whole serum  兔抗牛IgG抗血清  1ml
66398 Rabbit Anti-Bovine IgM Whole serum  兔抗牛IgM抗血清  1ml
66399 Rabbit Anti-chicken IgG Whole serum  兔抗雞IgG抗血清  1ml
66400 Rabbit Anti-chicken IgM Whole serum  兔抗雞IgM抗血清  1ml
66401 Rabbit Anti-dog IgG Whole serum  兔抗狗IgG抗血清  1ml
66402 Rabbit Anti-FITC Whole serum  兔抗熒光素抗血清  1ml
66403 Rabbit Anti-Goat IgG Whole serum  兔抗羊IgG抗血清  1ml
66404 Rabbit Anti-Goat IgM Whole serum  兔抗羊IgM抗血清  1ml
66405 Rabbit Anti-Guinea IgG Whole serum  兔抗豚鼠IgG抗血清  1ml
66406 Rabbit Anti-Guinea IgM Whole serum  兔抗豚鼠IgM抗血清  1ml
66407 Rabbit Anti-horse IgG Whole serum  兔抗馬IgG抗血清  1ml
66408 Rabbit Anti-HRP Whole serum  兔抗HRP抗血清  1ml
66409 Rabbit Anti-human IgG Whole serum  兔抗人IgG抗血清  1ml
66410 Rabbit Anti-human IgM Whole serum  兔抗人IgM抗血清  1ml
66411 Rabbit Anti-human IgA Whole serum  兔抗人IgA抗血清  1ml
66412 Rabbit Anti-human IgGF(ab')2 Whole serum  兔抗人IgGF(ab')2抗血清  1ml
66413 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc Whole serum  兔抗小鼠IgG-Fc抗血清  1ml
66414 Rabbit Anti-human k-chain Whole serum  兔抗人k-鏈抗血清  1ml
66415 Rabbit Anti-human Gamma-chain Whole serum  兔抗人γ-鏈抗血清  0.5ml
66416 Rabbit Anti-MK IgG Whole serum  兔抗猴IgG抗血清  1ml
66417 Rabbit Anti-MK IgM Whole serum  兔抗猴IgM抗血清  1ml
66418 Rabbit Anti-mouse IgG Whole serum  兔抗小鼠IgG抗血清  1ml
66419 Rabbit Anti-mouse IgM Whole serum  兔抗小鼠IgM抗血清  1ml
66420 Rabbit Anti-mouse IgG1 kappa-chain Whole serum  兔抗小鼠k-鏈抗血清  1ml
66421 Rabbit Anti-mouse IgG-Fc Whole serum  兔抗小鼠IgG-Fc抗血清  1ml
66422 Anti-Mouse IgA Whole serum  兔抗小鼠IgA抗血清  1ml
66423 Rabbit Anti-rat IgG Whole serum  兔抗大鼠IgG抗血清  1ml
66424 Rabbit Anti-rat IgM Whole serum  兔抗大鼠IgM抗血清  1ml
66425 Rabbit Anti-pig IgG Whole serum  兔抗豬IgG抗血清  1ml
66426 Anti-BSA  兔抗牛血清白蛋白抗血清  1ml
66427 Rabbit Anti-Meiiones Unguiculataus Milme-Edwauds Whole serum  兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG抗血清  1ml
66428 Donkey Anti-human IgG Whole serum  驢抗人IgG抗血清  1ml
66429 Donkey Anti-rabbit IgG Whole serum  驢抗兔IgG抗血清  1ml
66430 Donkey Anti-Goat IgG Whole serum  驢抗羊IgG抗血清  1ml
66431 Donkey Anti-Guinea IgG Whole serum  驢抗豚鼠IgG抗血清  1ml
66432 AGEs (advanced glycosylation end products)  晚期糖基化終末產(chǎn)物蛋白  50mg
66433 AGEs control article(advanced glycosylation end products control article)  晚期糖基化終末產(chǎn)物蛋白對(duì)照品  50mg
66434 Protein and Peptide  蛋白質(zhì)與多肽  
66435 BSA (bovine serum albumin)  牛血清白蛋白  5g
66436 KLH (keyhole limpet hemocyanin)  血藍(lán)蛋白  10mg
66437 OVA (ovalbumin) 人羥賴(lài)氨酸(Hyl)ELISA試劑盒 雞卵白蛋白  10mg
66438 THY (thyroglobulin,TG)  甲狀腺球蛋白  10mg
66439 HSA/human Serum albumin  人血清白蛋白  10mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人羥賴(lài)氨酸(Hyl)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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