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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-22 11:56:16瀏覽次數(shù):199次
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人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
66329 Rabbit Anti-MK IgM 兔抗猴IgM (親和層析純化) 1mg
66330 Rabbit Anti-mouse IgG 兔抗小鼠IgG (親和層析純化) 1mg
66331 Rabbit Anti-mouse IgM 兔抗小鼠IgM (親和層析純化) 1mg
66332 Rabbit anti-mouse IgG1, kappa chain 兔抗小鼠IgG1k鏈 (親和層析純化) 1mg
66333 Rabbit Anti-rat IgG 兔抗大鼠IgG (親和層析純化) 1mg
66334 Rabbit Anti-rat IgM 兔抗大鼠IgM (親和層析純化) 1mg
66335 Rabbit Anti-pig IgG 兔抗豬IgG (親和層析純化) 1mg
66336 Rabbit Anti-Meiiones Unguiculataus Milme-Edwauds 兔抗長爪沙鼠IgG (親和層析純化) 1mg
66337 Rabbit Anti-Mink IgG 兔抗水貂IgG (親和層析純化) 0.1ml
66338 Donkey Anti-human IgG 驢抗人IgG (親和層析純化) 1mg
66339 Donkey Anti-rabbit IgG 驢抗兔IgG (親和層析純化) 1mg
66340 Donkey Anti-Goat IgG 驢抗羊IgG (親和層析純化) 1mg
66341 Donkey Anti-Guinea IgG 驢抗豚鼠IgG 1mg
66342 Mouse Anti-Human Mu chain Monoclonal 鼠抗人IgM μ鏈單克隆抗體(親和層析純化) 1mg
66343 Anti-Human IgG(monoclonal antibody) 鼠抗人IgG單克隆抗體 (親和層析純化) 1mg
66344 Bovine IgG (親和純化) 牛IgG 10mg
66345 Bovine IgM (親和純化) 牛IgM 1mg
66346 Chicken IgG (HPLC純化) 雞IgG 10mg
66347 Chicken IgM (親和純化) 雞IgM 1mg
66348 dog IgG (親和純化) 狗IgG 10mg
66349 dog IgM (親和純化) 狗IgM 1mg
66350 Goat IgG 羊IgG (HPLC純化) 10mg
66351 Goat IgM (親和純化) 羊IgM 1mg
66352 Guinea IgG (親和純化) 豚鼠IgG 10mg
66353 Guinea IgM (親和純化) 豚鼠IgM 1mg
66354 Horse IgG (親和純化) 馬IgG 10mg
66355 Horse IgM (親和純化) 馬IgM 1mg
66356 human IgG (親和純化) 人IgG 10mg
66357 Human Fibrinogen (親和純化)* 10mg
66358 human IgM (免疫親和純化)人IgM 1mg
66359 human sIgA (親和純化) 人分泌型IgA 1mg
66360 Monkey IgG (親和純化) 猴IgG 10mg
66361 Monkey IgM (親和純化) 猴IgM 1mg
66362 Mouse IgG (免疫親和純化) 小鼠IgG 1mg
66363 Mouse IgM 小鼠IgM (免疫親和純化) 1mg
66364 pig IgG (親和純化) 豬IgG 10mg
66365 pig IgM (親和純化) 豬IgM 1mg
66366 Mink IgG 水貂IgG (親和純化) 1mg
66367 Rabbit IgG 兔IgG(親和層析純化) 10mg
66368 Rabbit IgM (親和純化) 兔IgM 1mg
66369 Rat IgG (親和純化) 大鼠IgG 1mg
66370 Rat IgM (親和純化) 大鼠IgM 1mg
66371 特級胎牛血清 100ml
66372 優(yōu)級胎牛血清 200ml
66373 標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清 200ml
66374 新生牛血清 200ml
66375 特級馬血清 200ml
66376 Anthrax 炭疽沉淀素血清(馬來源) 1ml
66377 Anthrax Paper antigen 健康皮張?zhí)烤铱乖? 1ml
66378 Goat Anti-Bovine IgG Whole serum 羊抗牛IgG抗血清 1ml
66379 Goat Anti-Mouse IgG Whole serum 羊抗小鼠IgG抗血清 1ml
66380 Goat Anti-Mouse IgM Whole serum 羊抗小鼠IgM抗血清 1ml
66381 Goat Anti-rat IgG 人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)ELISA試劑盒Whole serum 羊抗大鼠IgG抗血清 1ml
66382 Goat Anti-Guinea IgG Whole serum 羊抗豚鼠IgG抗血清 1ml
66383 Goat Anti-rabbit IgG Whole serum 羊抗兔IgG抗血清 1ml
66384 Goat Anti-human IgG Whole serum 羊抗人IgG抗血清 1ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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