人血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

65987 Anti-VIP/FITC  熒光素標(biāo)記血管活性腸肽抗體蛋白抗體IgG  0.2ml
65988 Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT)/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素/腹脂素/內(nèi)肥素 抗體IgG  0.2ml
65989 Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT) hu、 mo、 rat、MK /FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(N端抗體)IgG  0.2ml
65990 Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT) Human /FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素（N端抗體）IgG  0.2ml
65991 Anti-Visfatin-2(CT)/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素（C端抗體）IgG  0.2ml
65992 Anti-VPS18/FITC  熒光素標(biāo)記空泡分選蛋白18抗體IgG  0.2ml
65993 Anti-VR1/FITC  熒光素標(biāo)記辣椒素受體抗體IgG  0.2ml
65994 Anti-VSIG4 /FITC  熒光素標(biāo)記T淋巴細(xì)胞負(fù)調(diào)節(jié)蛋白之一抗體IgG  0.2ml
65995 Anti-VSV-G tag/FITC  熒光素標(biāo)記VSV-G tag標(biāo)簽抗體IgG  0.2ml
65996 Anti-VSV-G tag/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記VSV-G tag標(biāo)簽抗體IgG  0.2ml
65997 Anti-VTG/FITC  熒光素標(biāo)記卵黃蛋白原抗體IgG  0.2ml
65998 Anti-VTN/FITC  熒光素標(biāo)記玻璃粘連蛋白抗體IgG  0.2ml
65999 Anti-VWCE/URG11/FITC  熒光素標(biāo)記乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體IgG  0.2ml
66000 Anti-VWF/FITC  熒光素標(biāo)記血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體IgG  0.2ml
66001 Anti-VWF/RBITC  紅色羅丹明標(biāo)記血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體IgG  0.2ml
66002 Anti-Brucella /HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記兔抗羊、牛、豬、人布氏桿菌抗體IgG  0.2ml
66003 Anti-WDR26 /Gold   膠體金離子標(biāo)記Gβ類似蛋白WDR26抗體IgG  0.2ml
66004 Anti-WDR26/FITC  熒光素標(biāo)記Gβ類似蛋白WDR26抗體IgG  0.2ml
66005 Anti-WEE1 protein/FITC  熒光素標(biāo)記WEE1蛋白抗體IgG  0.2ml
66006 Anti-Wnt1/FITC  熒光素標(biāo)記信號(hào)通路Wnt1抗體IgG  0.2ml
66007 Anti-Wnt2B/FITC  熒光素標(biāo)記信號(hào)通路Wnt2B抗體IgG  0.2ml
66008 Anti-Wnt3a/FITC  熒光素標(biāo)記信號(hào)通路Wnt3a抗體IgG  0.2ml
66009 Anti-WNT5A/FITC  熒光素標(biāo)記信號(hào)通路Wnt5a抗體IgG  0.2ml
66010 Anti-WNT9A/WNT14/FITC  熒光素標(biāo)記信號(hào)通路Wnt9a抗體IgG  0.2ml
66011 Anti-WNT10A/FITC  熒光素標(biāo)記信號(hào)通路WNT10A抗體IgG  0.2ml
66012 Anti-WRCH-1/FITC  熒光素標(biāo)記WRCH1抗體IgG  0.2ml
66013 Anti-WWOX /FITC  熒光素標(biāo)記包含氧化還原酶的WW域抗體IgG  0.2ml
66014 Anti-WIG-1/FITC  熒光素標(biāo)記野生型p53誘導(dǎo)基因1抗體IgG  0.2ml
66015 Anti-WIP1/FITC  熒光素標(biāo)記原癌基因WIP1抗體IgG  0.2ml
66016 Anti-WNK1/FITC  熒光素標(biāo)記賴氨酸缺陷型蛋白激酶1抗體IgG  0.2ml
66017 Anti-WNK3 protein/FITC  熒光素標(biāo)記*/*激酶家族成員的基因WNK3抗體IgG  0.2ml
66018 Anti-WNK4/FITC  熒光素標(biāo)記一種新的*/*激酶家族成員的基因WNK4抗體IgG  0.2ml
66019 Anti-Il-7R a(CD127)/RBITC  羅丹明標(biāo)記白細(xì)胞介素-7受體a抗體IgG  0.2ml
66020 Anti-IL-17/RBITC(Interleukin-17)  羅丹明標(biāo)記白細(xì)胞介素17抗體IgG  0.2ml
66021 Anti-HAS/RBITC  紅色羅丹明標(biāo)記人血清白蛋白抗體IgG  0.2ml
66022 Anti-CD14/RBITC  紅色羅丹明標(biāo)記CD14蛋白抗體IgG  0.2ml
66023 Anti-NHE1/RBITC  紅色羅丹明標(biāo)記鈉氫通道蛋白抗體IgG  0.2ml
66024 Anti-RAMP-1/RBITC  紅色羅丹明標(biāo)記受體活性調(diào)制蛋白1抗體IgG  0.2ml
66025 Anti-CD86/B7-2/RBITC  紅色羅丹明標(biāo)記CD86蛋白抗體抗體IgG  0.2ml
66026 Anti-AT1R/RBITC  紅色羅丹明標(biāo)記血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體IgG  0.2mg
66027 Anti-AT1R/AGTR1/FITC  熒光素標(biāo)記血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體IgG  0.2ml
66028 Anti-CD93/C1qrp/FITC  熒光素標(biāo)記CD93抗體IgG  0.2ml
66029 Anti-CD94/KLRD1/FITC  熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞表面抑制性受體CD94抗體IgG  0.2ml
66030 Anti-CD97/FITC  熒光素標(biāo)記CD97抗體IgG  0.2ml
66031 Anti-CD99/E2 antigen/FITC  熒光素標(biāo)記CD99抗體IgG  0.2ml
66032 Anti-XAF1/FITC  熒光素標(biāo)記XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗體IgG  0.2ml
66033 Anti-XBP-1/FITC  熒光素標(biāo)記細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白抗體IgG  0.2ml
66034 Anti-MMP-2/RBITC  紅色羅丹明標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-2抗體IgG  0.2ml
66035 Anti-XIAP/FITC  熒光素標(biāo)記X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗體IgG  0.2ml
66036 Anti-XRCC1/FITC  熒光素標(biāo)記X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白/細(xì)胞堿基切除修復(fù)基因抗體IgG  0.2ml
66037 Anti-YBX-1/FITC人血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)ELISA試劑盒  熒光素標(biāo)記高保留轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG  0.2ml
66038 Anti-YY1/FITC  熒光素標(biāo)記核轉(zhuǎn)錄因子YY1抗體IgG  0.2ml
66039 Anti-ZAP-70/FITC  熒光素標(biāo)記zeta相關(guān)蛋白70抗體IgG  0.2ml
66040 Anti-ZCWCC1/FITC  熒光素標(biāo)記ZCWCC1抗體IgG  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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