人*結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人*結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

65876 Anti-TSARG7/FITC  熒光素標(biāo)記精子發(fā)生相關(guān)的新基因抗體IgG  0.2ml
65877 Anti-TSFP1/SP1 /FITC  熒光素標(biāo)記SP1轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子抗體IgG  0.2ml
65878 Anti-tsg101/FITC  熒光素標(biāo)記tsg101抗體IgG  0.2ml
65879 Anti-TSH/FITC  熒光素標(biāo)記小鼠抗人促甲狀腺素單克隆抗體IgG  0.2ml
65880 Anti-TSHR/FITC  熒光素標(biāo)記促甲狀腺素受體抗體IgG  0.2ml
65881 Anti-TSHR(CT)/FITC  熒光素標(biāo)記促甲狀腺素受體抗體（C端）IgG  0.2ml
65882 Anti-TSHR /FITC  熒光素標(biāo)記促甲狀腺素受體抗體IgG  0.2ml
65883 Anti-TSHR(NT)/FITC  熒光素標(biāo)記促甲狀腺素受體抗體（N端）IgG  0.2ml
65884 Anti-TSH/FITC  熒光素標(biāo)記促甲狀腺素抗體IgG  0.2ml
65885 Anti-TSH/Biotin  *化促甲狀腺素抗體IgG  0.2ml
65886 Anti-TSLC1/FITC  熒光素標(biāo)記肺癌腫瘤阻抑基因1抗體IgG  0.2ml
65887 Anti-TSLP/FITC  熒光素標(biāo)記淋巴細(xì)胞生成素-1抗體IgG  0.2ml
65888 Anti-TSLPR/CRLF2/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素受體抗體IgG  0.2ml
65889 Anti-TSP-1/THBS1/FITC  熒光素標(biāo)記血小板反應(yīng)蛋白/*敏感蛋白1抗體IgG  0.2ml
65890 Anti-TTF-1/FITC  熒光素標(biāo)記甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1/甲狀腺特異增強(qiáng)子結(jié)合蛋白抗體IgG  0.2ml
65891 Anti-TTF-2/FITC  熒光素標(biāo)記甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體IgG  0.2ml
65892 Anti-Tubb3/FITC  熒光素標(biāo)記β微管蛋白-Ⅲ抗體IgG  0.2ml
65893 Anti-Tubulin- Alpha/FITC  熒光素標(biāo)記微管蛋白α抗體IgG  0.2ml
65894 Anti-Tubulin- Beta/FITC  熒光素標(biāo)記微管蛋白抗體IgG  0.2ml
65895 Anti-Tubulin- Beta/FITC  熒光素標(biāo)記微管蛋白抗體IgG  0.2ml
65896 Anti-Tubulin- Gamma/FITC  熒光素標(biāo)記微管蛋白-γ抗體IgG  0.2ml
65897 Anti- Beta-Actin/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記β-肌動(dòng)蛋白（抗體）  0.2ml
65898 Anti-Tuberin/TSC2/FITC  熒光素標(biāo)記馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgG  0.2ml
65899 Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr320) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgG  0.2ml
65900 Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1387)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgG  0.2ml
65901 Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgG  0.2ml
65902 Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr1571)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgG  0.2ml
65903 Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgG  0.2ml
65904 Anti-VTG/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記兔抗魚(yú)、青鳉魚(yú)卵黃蛋白原抗體IgG  0.2ml
65905 Anti-Tumstatin/Col4a3/FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤抑素抗體IgG  0.2ml
65906 Anti-TWIST protein/FITC  熒光素標(biāo)記TWIST轉(zhuǎn)錄因子蛋白抗體IgG  0.2ml
65907 Rabbit Anti-human Fibrinogen/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記可溶性纖維蛋白原抗體IgG  0.1ml
65908 Rabbit Anti-human Fibrinogen/FITC  熒光素標(biāo)記纖維蛋白原IgG  0.2ml
65909 Goat Anti-human Fibrinogen/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗*  0.1ml
65910 Anti-TY3H/FITC (Tyrosine Hydroxylase )  熒光素標(biāo)記*羥化酶抗體IgG  0.2ml
65911 Anti-TNK1/FITC  熒光素標(biāo)記非受體型*蛋白激酶Tnk1抗體IgG  0.2ml
65912 Anti-Phospho-TNK1 (Tyr277)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化非受體型*蛋白激酶Tnk1抗體IgG  0.2ml
65913 Anti-Phospho-Tyk2 (Tyr1054/1055)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化非受體*蛋白激酶2抗體IgG  0.2ml
65914 Anti-Tyk2/Non receptor tyrosine protein kinase 2/FITC   熒光素標(biāo)記非受體*蛋白激酶2抗體IgG  0.2ml
65915 Anti-Tyrosinase/FITC  熒光素標(biāo)記*酶抗體IgG  0.2ml
65916 Anti-T Beta10/FITC  熒光素標(biāo)記*β10抗體IgG  0.2ml
65917 Anti-Ubiquitin/FITC  熒光素標(biāo)記泛素蛋白抗體IgG  0.2ml
65918 Anti-UCN/FITC  熒光素標(biāo)記新型血管活性因子UCN抗體（人）IgG  0.2ml
65919 Anti-UCN/FITC  熒光素標(biāo)記新型血管活性因子UCN抗體(小鼠、大鼠)IgG  0.2ml
65920 Anti-Urocortin 3/FITC  熒光素標(biāo)記尿皮質(zhì)素UCN3抗體IgG  0.2ml
65921 Anti-UCP-1/FITC  熒光素標(biāo)記線粒體脫偶連蛋白1抗體IgG  0.2ml
65922 Anti-UCP-2/FITC  熒光素標(biāo)記線粒體脫偶連蛋白2抗體IgG  0.2ml
65923 Anti-UCP-3/FITC  熒光素標(biāo)記線粒體脫偶連蛋白3抗體IgG  0.2ml
65924 Anti-UG/FITC  熒光素標(biāo)記子宮珠蛋白抗體IgG  0.2ml
65925 Anti-UMOD/FITC 人*結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒 熒光素標(biāo)記UMOD抗體IgG  0.2ml
65926 Anti-ULBP1/N2DL1/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠UL16結(jié)合蛋白1蛋白抗體IgG  0.2ml
65927 Anti-ULBP2/N2DL2/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠UL16結(jié)合蛋白2抗體IgG  0.2ml
65928 Anti-ULBP3/N2DL3/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠UL16結(jié)合蛋白3抗體IgG  0.2ml
65929 Anti-UMOD/FITC  熒光素標(biāo)記UMOD蛋白抗體IgG  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人*結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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