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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-13 19:31:34瀏覽次數(shù):299次
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人*磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人*磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人*磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
65710 Anti-SYK/FITC 熒光素標記非受體型*蛋白激酶抗體IgG 0.2ml
65711 Anti-Phospho-Syk (Tyr323) /FITC 熒光素標記磷酸化非受體型*蛋白激酶抗體IgG 0.2ml
65712 Anti-Phospho-Syk (Tyr525/526) /FITC 熒光素標記磷酸化非受體型*蛋白激酶抗體IgG 0.2ml
65713 Anti-SYT3/FITC 熒光素標記突觸結合蛋白3抗體IgG 0.2ml
65714 Anti-SAP-1/FITC 熒光素標記抗突觸素抗體IgG 0.2ml
65715 Anti-Synapsin I /FITC 熒光素標記神經突觸素1抗體IgG 0.2ml
65716 Anti-Syntrophins/SNTA1/Syntrophin α1/FITC 熒光素標記神經肌肉接頭蛋白SNTA1抗體IgG 0.2ml
65717 Anti-alpha-Synuclein/FITC 熒光素標記核突觸蛋白-α抗體(C端)IgG 0.2ml
65718 Anti-Synaptopodin/FITC 熒光素標記突觸極蛋白synaptopodin抗體IgG 0.2ml
65719 Anti-Synapsin II /FITC 熒光素標記神經突觸素2抗體IgG 0.2ml
65720 Anti- Alpha-Synuclein/FITC 熒光素標記核突觸蛋白-α抗體IgG 0.2ml
65721 Anti-phospho-Synapsin I (Ser9) /FITC 熒光素標記磷酸化神經突觸素1抗體IgG 0.2ml
65722 Anti-phospho-Synapsin I (Ser553) /FITC 熒光素標記磷酸化神經突觸素1抗體IgG 0.2ml
65723 Anti- Gamma-Synuclein/SNCG /FITC 熒光素標記核突觸蛋白-γ抗體IgG 0.2ml
65724 Anti-Syntaxin 1/Syn1A /FITC 熒光素標記突觸融合蛋白1抗體IgG 0.2ml
65725 Anti-Alpha-Synuclein/FITC 熒光素標記核突觸蛋白/突觸素-1抗體IgG 0.2ml
65726 Anti-SYPH1/FITC 熒光素標記synphilin-1抗體IgG 0.2ml
65727 Anti-SYVN1/FITC 熒光素標記滑膜細胞凋亡抑制物1抗體IgG 0.2ml
65728 Anti-TNF- Alpha /Biotin *標記 腫瘤壞死因子抗體 0.2ml
65729 Anti-T3/FITC 熒光素標記三碘甲狀腺素T3抗體IgG 0.2ml
65730 Anti-TACR3/NK-3 receptor /FITC 熒光素標記速激肽受體3抗體IgG 0.2ml
65731 Anti-TAK1/FITC 熒光素標記轉化生長因子β活化激酶1抗體IgG 0.2ml
65732 Anti-Phospho-TAK1 (Ser412)/FITC 熒光素標記磷酸化轉化生長因子β活化激酶1抗體IgG 0.2ml
65733 Anti-Phospho-TAK1 (Thr184)/FITC 熒光素標記磷酸化轉化生長因子β活化激酶1抗體IgG 0.2ml
65734 Anti-Phospho-TAK1 (Thr187)/FITC 熒光素標記磷酸化轉化生長因子β活化激酶1抗體IgG 0.2ml
65735 Anti-Phospho-TAK1 (Thr184/187)/FITC 熒光素標記磷酸化轉化生長因子β活化激酶1抗體IgG 0.2ml
65736 Anti-Tanis/SELS /FITC 熒光素標記炎癥負調控因子蛋白抗體IgG 0.2ml
65737 Anti-TANK/FITC 熒光素標記TANK抗體IgG 0.2ml
65738 Anti-Talin/FITC 熒光素標記踝蛋白抗體IgG 0.2ml
65739 Anti-Phospho-Talin (Ser425)/FITC 熒光素標記磷酸化踝蛋白抗體IgG 0.2ml
65740 Anti-Tau protein/FITC 熒光素標記微管相關蛋白抗體IgG 0.2ml
65741 Anti-Tau protein/FITC 熒光素標記微管相關蛋白抗體IgG 0.2ml
65742 Anti-P-Tau protein (pThr489)/FITC 熒光素標記磷酸化微管相關蛋白抗體IgG 0.2ml
65743 Anti-phospho-Tau protein (Ser396)/FITC 熒光素標記磷酸化微管相關蛋白抗體IgG 0.2ml
65744 Anti-phospho-Tau protein (Ser422)/FITC 熒光素標記磷酸化微管相關蛋白抗體IgG 0.2ml
65745 Anti-Tat/FITC 熒光素標記細胞*轉氨酶抗體IgG 0.2ml
65746 Anti-TBX2/T-box2/FITC 熒光素標記新型抑癌基因抗體IgG 0.2ml
65747 Anti-TBX2/T-box2/FITC 熒光素標記新型抑癌基因抗體IgG 0.2ml
65748 Anti-TCF7L2/FITC 熒光素標記轉錄因子7類似物2抗體IgG 0.2ml
65749 Anti-TCRG/FITC 熒光素標記抗T細胞受體γ抗體IgG 0.2ml
65750 Anti-TDAG51/FITC 熒光素標記TDAG51抗體IgG 0.2ml
65751 Anti-TDP-43/TARDBP /FITC 熒光素標記Tar DNA 結合蛋白43抗體IgG 0.2ml
65752 Anti-TBX3/FITC 熒光素標記轉錄因子Tbx3抗體IgG 0.2ml
65753 Anti-omerase Binding Protein,P23/FITC 熒光素標記端粒酶結合蛋白P23抗體IgG 0.2ml
65754 Anti-Tbx21/T-bet/FITC 熒光素標記T細胞介導的轉錄調節(jié)因子Tbx21抗體IgG 0.2ml
65755 Anti-TEM 1/CD248/FITC 熒光素標記內涎蛋白/內皮唾液酸蛋白抗體IgG 0.2ml
65756 Anti-TEM8/FITC 熒光素標記腫瘤血管內皮標志物8抗體IgG 0.2ml
65757 Anti-Tenascin C/FITC 熒光素標記固生蛋白抗體IgG 0.2ml
65758 Anti-Tenascin/TN /FITC 熒光素標記細胞粘合素抗體IgG 0.2ml
65759 Anti-TERT/FITC 熒光素標記端粒酶逆轉錄酶抗體IgG 0.2ml
65760 Anti-Tetracycline/FITC人*磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒 熒光素標記四環(huán)素抗體IgG 0.2ml
65761 Anti-Tetraspan5/FITC 熒光素標記四分子交聯(lián)體5抗體IgG 0.2ml
65762 Anti-Phospho-TBK1/NAK (Ser172) /FITC 熒光素標記NF-κB活化激酶抗體IgG 0.2ml
65763 Anti-T7 tag/FITC 熒光素標記T7 tag標簽抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人*磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現(xiàn)在國內已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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