人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

65542 Anti-RPS6/FITC  熒光素標(biāo)記S6核糖體蛋白抗體IgG  0.2ml
65543 Anti-S-100A1/FITC  熒光素標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A1抗體IgG  0.2ml
65544 Anti-S100-A8/MRP8/CFAG/FITC  熒光素標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A8抗體IgG  0.2ml
65545 Anti-S100-A9/MRP14/CFAG/FITC  熒光素標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A9抗體IgG  0.2ml
65546 Anti-S100A13/FITC  熒光素標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A13抗體IgG  0.2ml
65547 Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化S6核糖體蛋白抗體IgG  0.2ml
65548 Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化S6核糖體蛋白抗體IgG  0.2ml
65549 Anti-S100B/FITC  熒光素標(biāo)記S100B蛋白抗體IgG  0.2ml
65550 Anti-S6PDH/FITC  熒光素標(biāo)記抗6-磷酸*脫氫酶抗體IgG  0.2ml
65551 Anti-SAMDC/AMD1/FITC  熒光素標(biāo)記S-腺苷蛋氨酸脫羧酶抗體IgG  0.2ml
65552 Anti-SARS S-protein/FITC  熒光素標(biāo)記非典病毒表面蛋白S抗體IgG  0.2ml
65553 Anti-SARS putative orflab polyprotein/FITC  熒光素標(biāo)記SARS抗體IgG  0.2ml
65554 Anti-SATB1/FITC  熒光素標(biāo)記核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體IgG  0.2ml
65555 Anti-Phospho-SATB1 (Ser47)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體IgG  0.2ml
65556 Anti-SCF/FITC  熒光素標(biāo)記干細(xì)胞生長因子抗體IgG  0.2ml
65557 Anti-SCG3/SgIII /FITC  熒光素標(biāo)記分泌粒蛋白Ⅲ抗體IgG  0.2ml
65558 Anti-SCN1A/FITC  熒光素標(biāo)記電壓閥門鈉通道蛋白a1/癲癇相關(guān)蛋白抗體IgG  0.2ml
65559 Anti-SCN2A/FITC  熒光素標(biāo)記電壓閥門鈉通道蛋白a2/癲癇相關(guān)蛋白抗體IgG  0.2ml
65560 Anti-SCN9A/NAV1.7/FITC  熒光素標(biāo)記電壓開啟的鈉離子通道SCN9AIgG  0.2ml
65561 Anti-SCP2/NLTP/FITC  熒光素標(biāo)記固醇攜帶蛋白2抗體IgG  0.2ml
65562 Anti-SCP3/FITC  熒光素標(biāo)記聯(lián)會復(fù)合體蛋白3抗體IgG  0.2ml
65563 Anti-Secretin/FITC  熒光素標(biāo)記分泌素抗體IgG  0.2ml
65564 Anti-Secretin receptor/FITC  熒光素標(biāo)記分泌素受體抗體IgG  0.2ml
65565 Anti-SEL1L/FITC  熒光素標(biāo)記SEL1L抗體IgG  0.2ml
65566 Anti-Selenoprotein W/FITC  熒光素標(biāo)記硒蛋白W抗體IgG  0.2ml
65567 Anti-Sema3A/FITC  熒光素標(biāo)記臂板蛋白3A抗體IgG  0.2ml
65568 Anti-Sema3F/FITC  熒光素標(biāo)記臂板蛋白3F抗體IgG  0.2ml
65569 Anti-Sema4C/FITC  熒光素標(biāo)記臂板蛋白4C抗體IgG  0.2ml
65570 Anti-Sema6A/FITC  熒光素標(biāo)記抗Sema6A抗體IgG  0.2ml
65571 Anti-Sema7A/CD108/FITC  熒光素標(biāo)記軸突生長因子CD108抗體IgG  0.2ml
65572 Anti-sFRP/FITC  熒光素標(biāo)記抗子宮內(nèi)膜抗體IgG  0.2ml
65573 Anti-SFRP1/FITC  熒光素標(biāo)記分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體IgG  0.2ml
65574 Anti-SGC/FITC  熒光素標(biāo)記可溶性糖蛋白C抗體IgG  0.2ml
65575 Anti-SGLT1 /FITC  熒光素標(biāo)記鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1抗體IgG  0.2ml
65576 Anti-SGK1/FITC  熒光素標(biāo)記糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體IgG  0.2ml
65577 Anti-Phospho-SGK1 (Ser78)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體IgG  0.2ml
65578 Anti-Phospho-SGK1 (Ser422) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體IgG  0.2ml
65579 Anti-Phospho-SGK1 (Thr256)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體IgG  0.2ml
65580 Anti-Shadow/SPRN/FITC  熒光素標(biāo)記新朊蛋白/朊蛋白相關(guān)蛋白/沙杜（Shadoo）蛋白抗體IgG  0.2ml
65581 Anti-Shank1/FITC  熒光素標(biāo)記shank-1抗體IgG  0.2ml
65582 Anti-SHBG /FITC  熒光素標(biāo)記性激素結(jié)合球蛋白抗體IgG  0.2ml
65583 Anti-Shh/FITC  熒光素標(biāo)記Shh信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路膜蛋白受體抗體IgG  0.2ml
65584 Shiga-like toxin IIe variant subunit A/FITC  熒光素標(biāo)記抗豬水腫病大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體（O139菌株）抗體IgG  0.2ml
65585 Anti-SHC/FITC  熒光素標(biāo)記SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgG  0.2ml
65586 Anti-phospho-SHC (Tyr239/240)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgG  0.2ml
65587 Anti-phospho-SHC (Ser36) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgG  0.2ml
65588 Anti-phospho-SHC (Tyr349) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgG  0.2ml
65589 Anti-phospho-SHC (Tyr427) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgG  0.2ml
65590 Anti-phospho-SHC (Tyr317)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgG  0.2ml
65591 Anti-PILR Beta/FDFACT/FITC  熒光素標(biāo)記Ⅱ型成對免疫球蛋白樣受體β蛋白抗體IgG  0.2ml
65592 Anti-RECK/FITC  熒光素標(biāo)記金屬蛋白酶抑制因子RECK抗體IgG  0.2ml
65593 Anti-SHP-1/FITC 人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒 熒光素標(biāo)記造血細(xì)胞磷酸酶抗體IgG  0.2ml
65594 Anti-RIP2/FITC  熒光素標(biāo)記受體結(jié)合**激酶2抗體IgG  0.2ml
65595 Anti-SHIP1/FITC  熒光素標(biāo)記SH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌醇SHIP1抗體IgG  0.2ml
65596 Anti-Phospho-SHIP1 (Tyr1020) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌醇SHIP1抗體IgG  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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