人單純皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人單純皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

65488 Anti-PTN/FITC  熒光素標(biāo)記多效生長(zhǎng)因子抗體IgG  0.2ml
65489 Anti-PTP-1B/FITC  熒光素標(biāo)記PTP-1B蛋白抗體IgG  0.2ml
65490 Anti-PTPRJ/CD148/DEP1/FITC  熒光素標(biāo)記CD148抗體IgG  0.2ml
65491 Anti-CD150/SLAM/FITC  熒光素標(biāo)記CD150抗體IgG  0.2ml
65492 Rabbit Anti-human sIgA/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人分泌型IgA抗體  0.2ml
65493 Anti-Rabbit Anti--mouse IgA/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記兔抗小鼠IgA抗體  0.2ml
65494 Anti-PTTG/FITC  熒光素標(biāo)記垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因抗體IgG  0.2ml
65495 Anti-Raptor /FITC  熒光素標(biāo)記mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgG  0.2ml
65496 Anti-Rad17/FITC  熒光素標(biāo)記細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體IgG  0.2ml
65497 Anti-Phospho-Rad17 (Ser645) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體IgG  0.2ml
65498 Anti-Rad51/FITC  熒光素標(biāo)記Rad51抗體IgG  0.2ml
65499 Anti-Rad52/FITC  熒光素標(biāo)記Rad52抗體IgG  0.2ml
65500 Anti-RAD51C/FITC  熒光素標(biāo)記乳腺癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體IgG  0.2ml
65501 Anti-RAM-11/FITC  熒光素標(biāo)記抗RAM-11抗體IgG  0.2ml
65502 Anti-RAMP-1/FITC  熒光素標(biāo)記受體活性調(diào)制蛋白1抗體IgG  0.2ml
65503 anti-RAP1A/FITC  熒光素標(biāo)記抗Rap1抗體IgG  0.2ml
65504 Anti-RAR- Alpha /FITC  熒光素標(biāo)記維甲酸受體-α 抗體IgG  0.2ml
65505 Anti-RAR- Beta /FITC  熒光素標(biāo)記維甲酸受體-β抗體IgG  0.2ml
65506 Anti-Phospho-Raptor (Ser792) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgG  0.2ml
65507 Anti-RASSF1A/FITC  熒光素標(biāo)記Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體IgG  0.2ml
65508 Anti-RASGRF1/FITC  熒光素標(biāo)記Ras特異性*核苷酸釋放因子1抗體IgG  0.2ml
65509 Anti-Phospho-RasGRF1 (Ser916)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化Ras特異性*核苷酸釋放因子1抗體IgG  0.2ml
65510 Anti-Rb/P105 RB/FITC   熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤抑癌蛋白抗體IgG  0.2ml
65511 Anti-RCC1/FITC  熒光素標(biāo)記染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體IgG  0.2ml
65512 Anti-Rbms3 protein/FITC  熒光素標(biāo)記Rbms3 protein抗體IgG  0.2ml
65513 Anti-Phospho-RCC1 (Ser11) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體IgG  0.2ml
65514 Anti-Reprimo/Rprm/FITC  熒光素標(biāo)記細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的糖基化蛋白抗體IgG  0.2ml
65515 Anti-Resistin/FITC  熒光素標(biāo)記抵抗素抗體IgG  0.2ml
65516 Anti-RelB /FITC  熒光素標(biāo)記核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體IgG  0.2ml
65517 Anti-Regucalcin/SMP30/Rgn/FITC  熒光素標(biāo)記衰老標(biāo)記蛋白30抗體IgG  0.2ml
65518 Anti-RICTOR/FITC  熒光素標(biāo)記雷帕霉素靶蛋白復(fù)合體2抗體IgG  0.2ml
65519 Anti-Phospho-Rictor (Thr1135)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化雷帕霉素靶蛋白復(fù)合體2抗體IgG  0.2ml
65520 Anti-Phospho-RelB (Ser552)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體IgG  0.2ml
65521 Anti-RELMa/FITC  熒光素標(biāo)記抵抗素樣分子α抗體IgG  0.2ml
65522 Anti-RELN(Reelin)/FITC  熒光素標(biāo)記絡(luò)絲蛋白抗體IgG  0.2ml
65523 Anti-TGF- Beta1/RBITC  紅色熒光素羅丹明標(biāo)記TGF-β1蛋白抗體IgG  0.2ml
65524 Anti-RGS2/FITC  熒光素標(biāo)記G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體IgG  0.2ml
65525 Anti-RGS5 /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子5抗體IgG  0.2ml
65526 Anti-RRM1/FITC  熒光素標(biāo)記抗核糖核苷酸還原酶1抗體IgG  0.2ml
65527 Anti-RhoA /FITC  熒光素標(biāo)記RhoA抗體IgG  0.2ml
65528 Anti-RhoC /FITC  熒光素標(biāo)記RhoC抗體IgG  0.2ml
65529 Anti-RKIP/FITC  熒光素標(biāo)記Raf激酶抑制蛋白抗體IgG  0.2ml
65530 Anti-RNF126/FITC  熒光素標(biāo)記環(huán)指蛋白126抗體IgG  0.2ml
65531 Anti-RNF148/FITC  熒光素標(biāo)記環(huán)指蛋白148抗體IgG  0.2ml
65532 Anti-ROCK1 /FITC  熒光素標(biāo)記Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體IgG  0.2ml
65533 Anti-ROCK2/FITC  熒光素標(biāo)記Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體IgG  0.2ml
65534 Anti-ROS/FITC  熒光素標(biāo)記活性氧簇ROS抗體IgG  0.2ml
65535 Anti-RPLP0/FITC  熒光素標(biāo)記酸性核糖體磷蛋白大亞基P0抗體IgG  0.2ml
65536 Anti-RRAD/FITC  熒光素標(biāo)記RRAD抗體IgG  0.2ml
65537 Anti-Runx3/FITC  熒光素標(biāo)記新型抑癌基因/一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因抗體IgG  0.2ml
65538 Anti-RUNX1/AML1/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠急性髓細(xì)胞白血病1蛋白抗體IgG  0.2ml
65539 Anti-RUNX1/AML1(phospho Ser249) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化急性髓細(xì)胞白血病1蛋白抗體IgG 人單純皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA試劑盒 0.2ml
65540 Anti-RUNX1/AML1(phospho SerS303) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化急性髓細(xì)胞白血病1蛋白抗體IgG  0.2ml
65541 Anti-RXR Alpha/FITC  熒光素標(biāo)記核受體RXRα抗體IgG  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人單純皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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