人乳頭狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人乳頭狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

65432 Anti-Podoplanin Protein/FITC  熒光素標(biāo)記平足蛋白抗體IgG  0.2ml
65433 Anti-Pokemon/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗撲克蒙抗體IgG  0.2ml
65434 Anti-Polycystin 1/FITC  熒光素標(biāo)記多囊腎蛋白1抗體IgG  0.2ml
65435 Anti-Polycystin 2/FITC  熒光素標(biāo)記多囊腎蛋白2抗體IgG  0.2ml
65436 Anti-PP-1/FITC  熒光素標(biāo)記蛋白磷酸酯酶-1抗體IgG  0.2ml
65437 Anti-PP-2A/FITC  熒光素標(biāo)記蛋白質(zhì)磷酸酶-2A抗體IgG  0.2ml
65438 Anti-PP-2A/FITC  熒光素標(biāo)記蛋白質(zhì)磷酸酶-2A抗體IgG  0.2ml
65439 Anti-PP2Ac/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸酯酶-2Ac抗體IgG  0.2ml
65440 Anti-PRL1/PTP4A1/FITC  熒光素標(biāo)記肝再生磷酸酯酶1抗體IgG  0.2ml
65441 Anti-PRL3/PTP4A3/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸酯酶3蛋白抗體IgG  0.2ml
65442 Anti-PTPN4/MEG1/FITC  熒光素標(biāo)記蛋白*磷酸酶非受體型4抗體IgG  0.2ml
65443 Anti-PPAR-delta /FITC  熒光素標(biāo)記D型-過氧化酶活化增生受體抗體IgG  0.2ml
65444 Anti-PPAR alpha/FITC  熒光素標(biāo)記α型-過氧化酶活化增生受體抗體IgG  0.2ml
65445 Anti-PPAR Gamma /FITC  熒光素標(biāo)記過氧化酶活化增生受體γ抗體IgG  0.2ml
65446 Anti-PPIG/FITC  熒光素標(biāo)記親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體IgG  0.2ml
65447 Anti-PR/FITC  熒光素標(biāo)記孕激素受體抗體IgG  0.2ml
65448 anti-pRb/p105-Rb /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化成視網(wǎng)膜細胞瘤抑癌蛋白抗體IgG  0.1ml
65449 Anti-PRCP/FITC  熒光素標(biāo)記脯氨酰羧肽酶抗體IgG  0.2ml
65450 Anti-Rb/RB1 protein/FITC  熒光素標(biāo)記視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體IgG  0.2ml
65451 Anti-Phospho-Rb (Ser608) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體IgG  0.2ml
65452 Anti-Phospho-Rb (Ser780)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體IgG  0.2ml
65453 Anti-Phospho-Rb (Ser807/Ser811)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體IgG  0.2ml
65454 Anti-PRDX3/FITC  熒光素標(biāo)記過氧化還原酶3抗體IgG  0.2ml
65455 Anti-pre-X protein(NT)/FITC  熒光素標(biāo)記抗乙肝病毒pre-X蛋白抗體（N端）IgG  0.2ml
65456 Anti-pre-X protein(CT)/FITC  熒光素標(biāo)記抗乙肝病毒pre-X蛋白抗體（C端）IgG  0.2ml
65457 Anti-PRMT1/FITC  熒光素標(biāo)記蛋白質(zhì)*甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體IgG  0.2ml
65458 Anti-ProADM (Adrenomedullin)-N20 peptide /FITC  熒光素標(biāo)記腎上腺髓質(zhì)素前提N端20肽抗體IgG  0.2ml
65459 Anti-pro-caspase3/FITC  熒光素標(biāo)記半胱天冬酶-3酶原抗體IgG  0.2ml
65460 Anti-Profilin 1/FITC  熒光素標(biāo)記前纖維蛋白1抗體IgG  0.2ml
65461 Anti-Profilin 2/FITC  熒光素標(biāo)記前纖維蛋白2抗體IgG  0.2ml
65462 Anti-PROK1/EG-VEGF/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)分泌腺衍生血管內(nèi)皮生長因子抗體IgG  0.2ml
65463 Anti-Proteasome 20S LMP2 /FITC   熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠低分子質(zhì)量蛋白2抗體IgG  0.2ml
65464 Anti-Proteasome 20S LMP7 /FITC   熒光素標(biāo)記低分子質(zhì)量蛋白7抗體IgG  0.2ml
65465 Anti-Melamine/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記抗三聚氰胺抗體IgG  0.2ml
65466 Anti-PS-1/FITC  熒光素標(biāo)記早老素蛋白-1抗體IgG  0.2ml
65467 Anti-PS-1/FITC  熒光素標(biāo)記早老素蛋白-1抗體IgG  0.2ml
65468 Anti-PS-1(CT)/FITC  熒光素標(biāo)記早老素蛋白-1抗體IgG  0.2ml
65469 Anti-Melamine/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記三聚氰胺單克隆抗體IgG  0.2ml
65470 Anti-PSAP/PAP/FITC  熒光素標(biāo)記前列腺酸性磷酸酶抗體IgG  0.2ml
65471 Anti-prox-1 /FITC   熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠prox-1蛋白抗體IgG  0.2ml
65472 Anti-PSCA /FITC  熒光素標(biāo)記抗前列腺干細胞抗原抗體IgG  0.2ml
65473 Anti-PSD93/FITC  熒光素標(biāo)記突觸后密度蛋白93抗體IgG  0.2ml
65474 Anti-Phospho-PSD93 (Tyr340) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化突觸后密度蛋白93抗體IgG  0.2ml
65475 Anti-PSD-95/FITC  熒光素標(biāo)記突觸后密度蛋白95抗體IgG  0.2ml
65476 Anti-P-selectin/CD62p /FITC  熒光素標(biāo)記P選擇素抗體IgG  0.2ml
65477 Anti-Phospho-PSD95 (Tyr236/Tyr240) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化突觸后密度蛋白95抗體IgG  0.2ml
65478 Anti-PSMD9/Bridge-1 /FITC  熒光素標(biāo)記蛋白酶調(diào)解因子9抗體IgG  0.2ml
65479 Anti-PSP/FITC  熒光素標(biāo)記抗PSP抗體IgG  0.2ml
65480 Anti-Patched/PTCH /FITC  熒光素標(biāo)記Hh信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑膜蛋白受體抗體IgG  0.2ml
65481 Anti-PTEN/MMAC1(NT)/FITC  熒光素標(biāo)記一種腫瘤抑制基因（N端）IgG  0.2ml
65482 Anti-PTEN/MMAC1 /FITC  熒光素標(biāo)記一種腫瘤抑制基因抗體（C端）IgG  0.2ml
65483 Anti-Phospho-PTEN (Ser380) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體IgG  0.2ml
65484 Anti-Phospho-PTEN (Ser380/Thr382/Thr383)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體IgG人乳頭狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒  0.2ml
65485 Anti-PTGEs/FITC  熒光素標(biāo)記前列腺素E合成酶抗體IgG  0.2ml
65486 Anti-PTHrP/FITC  熒光素標(biāo)記甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白抗體IgG  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人乳頭狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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