人β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

64926 Anti-MMP-15/FITC  熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-15抗體IgG  0.2ml
64927 Anti-MMP-16/FITC  熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-16抗體IgG  0.2ml
64928 Anti-MMP-17/FITC  熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-17抗體IgG  0.2ml
64929 Anti-MMP-20/FITC  熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶20抗體IgG  0.2ml
64930 Anti-MMP-26/FITC  熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-26抗體IgG  0.2ml
64931 Anti-Moesin/FITC  熒光素標(biāo)記膜突蛋白抗體IgG  0.2ml
64932 Anti-MOG /FITC  熒光素標(biāo)記髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白抗體IgG  0.2ml
64933 Anti-HSA/FITC  熒光素標(biāo)記鼠抗人血清白蛋白抗體IgG  0.2ml
64934 Anti-HAS/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人血清白蛋白抗體IgG  0.2ml
64935 Anti-HSA/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記鼠抗人血清白蛋白單克隆抗體IgG  0.2ml
64936 Mouse Anti-YERSINIA PESTIS Monoclonal Anti-body /FITC  熒光素標(biāo)記鼠抗鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克隆抗體IgG  0.2ml
64937 Anti-Mouse IgA/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗小鼠IgA抗體  0.2ml
64938 Anti-MPO /FITC  熒光素標(biāo)記髓過(guò)氧化物酶抗體IgG  0.2ml
64939 Anti-HAVCR1/KIM1/TIM1/FITC  熒光素標(biāo)記甲型肝炎病毒細(xì)胞受體1IgG  0.2ml
64940 Anti-HSD11B2/HSD2 /FITC  熒光素標(biāo)記羥基類固醇脫氫酶11β2抗體IgG  0.2ml
64941 Anti-MR/FITC  熒光素標(biāo)記鹽皮質(zhì)激素受體抗體IgG  0.2ml
64942 Anti-MRAS/Mras/FITC  熒光素標(biāo)記原癌基因M-ras抗體IgG  0.2ml
64943 Anti-Mre11/HNGS1/FITC  熒光素標(biāo)記DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體IgG  0.2ml
64944 Anti-Phospho-Mre11 (Ser676)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體IgG  0.2ml
64945 Anti-MRP1/FITC  熒光素標(biāo)記多藥耐藥相關(guān)蛋白1抗體IgG  0.2ml
64946 Anti-CITED1/ABCC1/FITC  熒光素標(biāo)記結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體IgG  0.2ml
64947 Anti-MRP2/FITC  熒光素標(biāo)記多藥耐藥相關(guān)蛋白2抗體  0.2ml
64948 Anti-MRP3/FITC  熒光素標(biāo)記多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體IgG  0.2ml
64949 Anti-MRP4/ABCC4 /FITC  熒光素標(biāo)記多藥耐藥相關(guān)蛋白4抗體IgG  0.2ml
64950 Anti-MRP5/ABCC5/FITC  熒光素標(biāo)記多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗體IgG  0.2ml
64951 Anti-MrpL28 /FITC  熒光素標(biāo)記線粒體核糖體蛋白L28抗體IgG  0.2ml
64952 Anti- Alpha-MSH/POMC /FITC  熒光素標(biāo)記α黑素細(xì)胞刺激素/阿黑皮素原抗體IgG  0.2ml
64953 Anti-MSH-2/FITC  熒光素標(biāo)記錯(cuò)配修復(fù)蛋白2抗體IgG  0.2ml
64954 Anti-MSK1/FITC  熒光素標(biāo)記有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體IgG  0.2ml
64955 Anti-Phospho-MSK1 (Ser360)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體IgG  0.2ml
64956 Anti-Phospho-MSK1 (Ser212)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體IgG  0.2ml
64957 Anti-Phospho-MSK1 (Ser376) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體IgG  0.2ml
64958 Anti-Phospho-MSK1 (Thr581) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體IgG  0.2ml
64959 Anti-MSLN /FITC  熒光素標(biāo)記間皮素抗體IgG  0.2ml
64960 Anti-MST1/FITC  熒光素標(biāo)記蛋白激酶MST抗體IgG  0.2ml
64961 Anti-Phospho-Mst1 (Thr183)/Mst2 (Thr180) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白激酶MST抗體IgG  0.2ml
64962 Anti-MT/FITC  熒光素標(biāo)記金屬硫蛋白抗體IgG  0.2ml
64963 Anti-MTA1/FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體IgG  0.2ml
64964 Anti-MTHFR/FITC  熒光素標(biāo)記亞甲基四氫*還原酶抗體IgG  0.2ml
64965 Anti-MTL/FITC  熒光素標(biāo)記胃動(dòng)素抗體IgG  0.2ml
64966 Anti-MTLR/FITC  熒光素標(biāo)記抗胃動(dòng)素受體抗體IgG  0.2ml
64967 Anti-MTNR1A/MTR-1A /FITC  熒光素標(biāo)記褪黑素受體1A/松果體素受體1A抗體IgG  0.2ml
64968 Anti-MTNR1B/MTNR-1B/FITC  熒光素標(biāo)記褪黑素受體1B抗體IgG  0.2ml
64969 Anti-mTOR/FITC  熒光素標(biāo)記雷帕霉素靶蛋白抗體IgG  0.2ml
64970 Anti-mucin-1/Muc-1/CD227 /FITC  熒光素標(biāo)記粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體IgG  0.2ml
64971 Anti-Muc2/FITC  熒光素標(biāo)記粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體IgG  0.2ml
64972 Anti-mucin-3/Muc-3 /FITC  熒光素標(biāo)記粘蛋白-3抗體IgG  0.2ml
64973 Anti-mucin4/Muc4/FITC  熒光素標(biāo)記粘蛋白-4抗體IgG  0.2ml
64974 Anti-mucin 5B/Muc5B/FITC  熒光素標(biāo)記粘蛋白-5B抗體IgG  0.2ml
64975 Anti-MUC5AC/Mucin 5AC /FITC  熒光素標(biāo)記胃粘液素抗體IgG  0.2ml
64976 Anti-MuRF1/Trim63/FITC  熒光素標(biāo)記肌肉細(xì)胞特異性泛素蛋白連接酶1抗體IgG  0.2ml
64977 Anti-MTF-1/FITC 人β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒 熒光素標(biāo)記金屬反應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子-1抗體IgG  0.2ml
64978 Anti-MyD88 /FITC  熒光素標(biāo)記髓樣分化蛋白抗體IgG  0.2ml
64979 Anti-Myelin P0 protein/FITC  熒光素標(biāo)記外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗體IgG  0.2ml
64980 Anti-Myf6/FITC  熒光素標(biāo)記生肌調(diào)節(jié)因子6抗體IgG  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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