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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-26 19:58:51瀏覽次數(shù):157次
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人苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
64814 Anti-MAPK4/FITC 熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶4抗體IgG 0.2ml
64815 Anti-Phospho-MARCKS (Ser152/156) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化*蛋白激酶C底物Marcks抗體IgG 0.2ml
64816 Anti-Phospho-MARCKS (Ser162) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化*蛋白激酶C底物Marcks抗體IgG 0.2ml
64817 Anti-MAPKK1 /FITC 熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體IgG 0.2ml
64818 Anti-MAPKK2 /FITC 熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體IgG 0.2ml
64819 Anti-SEK1/MKK4/FITC 熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體IgG 0.2ml
64820 Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser80)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體IgG 0.2ml
64821 Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體IgG 0.2ml
64822 Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257/Thr261)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體IgG 0.2ml
64823 Anti-p44/42 MAPK (phospho Thr202/Tyr204) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體IgG 0.2ml
64824 Anti-MKK7/FITC 熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶激酶7抗體IgG 0.2ml
64825 Anti-MKK7/FITC 熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶MKK7IgG 0.2ml
64826 Anti-MARCO/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞清道夫受體抗體IgG 0.2ml
64827 Anti-MASP/FITC 熒光素標(biāo)記抗MBL相關(guān)*蛋白酶抗體IgG 0.2ml
64828 Anti-MASP2/FITC 熒光素標(biāo)記甘露聚糖結(jié)合凝集素*肽酶2抗體IgG 0.2ml
64829 Anti-Matriptase/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗蛋白裂解酶抗體IgG 0.2ml
64830 Anti-MATH1/FITC 熒光素標(biāo)記腸道分化干細(xì)胞MATH-1蛋白抗體IgG 0.2ml
64831 Anti-Matrilin 1/CMP/FITC 熒光素標(biāo)記軟骨基質(zhì)蛋白抗體IgG 0.2ml
64832 Anti-MBP/FITC 熒光素標(biāo)記髓鞘堿性蛋白抗體IgG 0.2ml
64833 Anti-MBP/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記髓鞘堿性蛋白抗體IgG 0.2ml
64834 Anti-Mcl-1/FITC 熒光素標(biāo)記髓樣細(xì)胞白血病-1抗體IgG 0.2ml
64835 Anti-Phospho-Mcl1 (Ser159/Thr163)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化髓樣細(xì)胞白血病-1抗體IgG 0.2ml
64836 Anti-MCM2/FITC 熒光素標(biāo)記微小染色體維持缺陷蛋白2抗體IgG 0.2ml
64837 Anti-MCM3/FITC 熒光素標(biāo)記微小染色體維持缺陷蛋白3抗體IgG 0.2ml
64838 Anti-MCM5/CDC46/FITC 熒光素標(biāo)記微小染色體維持缺陷蛋白5抗體IgG 0.2ml
64839 Anti-MCM7/FITC 熒光素標(biāo)記微小染色體維持缺陷蛋白7抗體IgG 0.2ml
64840 Anti-MCP-1/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞趨化蛋白-1抗體IgG 0.2ml
64841 Anti-MCP-1/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞趨化蛋白-1抗體(人)IgG 0.2ml
64842 Anti-MCP-2/CCL8/FITC 熒光素標(biāo)記單核細(xì)胞趨化蛋白2抗體(人)IgG 0.2ml
64843 Anti-MCP-2/CCL8/FITC 熒光素標(biāo)記單核細(xì)胞趨化蛋白2抗體(大、小鼠)IgG 0.2ml
64844 Anti-MCP-3/CCL7/FITC 熒光素標(biāo)記單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體(人)IgG 0.2ml
64845 Anti-MCP-3/CCL7/FITC 熒光素標(biāo)記單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體(大、小鼠)IgG 0.2ml
64846 Anti-MC-1R/FITC 熒光素標(biāo)記黑素皮質(zhì)素受體抗體IgG 0.2ml
64847 Anti-M-CSF/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體IgG 0.2ml
64848 Anti-M-CSF Receptor/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體IgG 0.2ml
64849 Anti-Mcpt7/Tryptase Beta1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠肥大細(xì)胞蛋白酶7抗體IgG 0.2ml
64850 Anti-TPSB2/Tryptase Beta2/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠肥大細(xì)胞類*β2IgG 0.2ml
64851 Anti-MCT1/FITC 熒光素標(biāo)記單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體IgG 0.2ml
64852 Anti-MDM2/FITC 熒光素標(biāo)記雙微體2癌基因抗體IgG 0.2ml
64853 Anti-Phospho-MDM2 (Ser166) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化雙微體2癌基因抗體IgG 0.2ml
64854 Anti-Mdr-1/FITC 熒光素標(biāo)記多藥耐藥蛋白抗體IgG 0.2ml
64855 Anti-Measles virus of fusion protein/FITC 熒光素標(biāo)記抗麻疹病毒抗體IgG 0.2ml
64856 Anti-MEF2A/FITC 熒光素標(biāo)記肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體IgG 0.2ml
64857 Anti-Phospho-MEF2A (Thr312) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體IgG 0.2ml
64858 Anti-Phospho-MEF2A (Ser408) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體IgG 0.2ml
64859 Anti-Megsin/SER—PINB7 /FITC 熒光素標(biāo)記*(或半*)蛋白酶抑制劑B7抗體IgG 0.2ml
64860 Anti-MEK1/ MAPKK 1/FITC 熒光素標(biāo)記MEK1/ MAPKK 1抗體IgG 0.2ml
64861 Anti-phospho-MEK1 (Thr286) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體IgG 0.2ml
64862 Anti-Phospho-MEK1/2 (Ser217/221)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗體IgG 0.2ml
64863 Anti-Phospho-MEK1/2 (Ser221)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗體IgG 0.2ml
64864 Anti-Melamine/FITC 熒光素標(biāo)記抗三聚氰胺抗體IgG 0.2ml
64865 Anti-Melamine/FITC 熒光素標(biāo)記抗三聚氰胺抗體IgG 0.2ml
64866 Anti-Phospho-Met (Tyr1003) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化肝細(xì)胞生長因子受體(原癌基因)抗體IgG 0.2ml
64867 Anti-Phospho-Met (Tyr1234/1235) /FITC人苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒 熒光素標(biāo)記磷酸化肝細(xì)胞生長因子受體(原癌基因)抗體IgG 0.2ml
64868 Anti-Phospho-Met (Tyr1349) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化肝細(xì)胞生長因子受體(原癌基因)抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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