人*龍(PS)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人*龍(PS)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

64756 Anti-LIS1/FITC  熒光素標(biāo)記無(wú)腦回的致病基因LIS1抗體IgG  0.2ml
64757 Anti-Livin /FITC  熒光素標(biāo)記一種新的凋亡抑制蛋白抗體IgG  0.2ml
64758 Anti-LIX1/FITC  熒光素標(biāo)記LIX1抗體IgG  0.2ml
64759 Anti-LKB1/FITC  熒光素標(biāo)記一種抑癌基因IgG  0.2ml
64760 Anti-phosphor-LKB1(Ser334)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化*/*蛋白激酶抗體IgG  0.2ml
64761 Anti-phosphor-LKB1(Ser428) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化*/*蛋白激酶抗體IgG  0.2ml
64762 Anti-Phospho-LKB1 (Thr189) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化*/*蛋白激酶抗體IgG  0.2ml
64763 Anti-LN /FITC  熒光素標(biāo)記層粘連蛋白抗體IgG  0.2ml
64764 Anti-Integrin alpha 4,beta 7(LPAM-1)/FITC  熒光素標(biāo)記整合素α4β7抗體IgG  0.2ml
64765 Anti-HRH3/GPCR97/FITC  熒光素標(biāo)記組織胺H3受體抗體IgG  0.2ml
64766 Anti-HRH4/GPCR105/FITC  熒光素標(biāo)記組織胺H4受體抗體IgG  0.2ml
64767 Anti-LOX-1/OLR1/FITC  熒光素標(biāo)記凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體抗體IgG  0.2ml
64768 Anti-Lpin1 protein/FITC  熒光素標(biāo)記Lpin1 抗體IgG  0.2ml
64769 Anti-Lpin1 protein/FITC  熒光素標(biāo)記Lpin1 抗體IgG  0.2ml
64770 Anti-LPL/FITC  熒光素標(biāo)記脂蛋白脂酶抗體IgG  0.2ml
64771 Anti-LPLUNC1/FITC  熒光素標(biāo)記人鼻咽癌癌基因抗體IgG  0.2ml
64772 Anti-Lp-PLA2/FITC  熒光素標(biāo)記抗脂蛋白磷脂酶A2抗體IgG  0.2ml
64773 Anti-LRIG1/FITC  熒光素標(biāo)記抗LRIG1抗體IgG  0.2ml
64774 Anti-LRIG2/FITC  熒光素標(biāo)記抗LRIG2抗體IgG  0.2ml
64775 Anti-LRIG3/FITC  熒光素標(biāo)記抗LRIG3抗體IgG  0.2ml
64776 Anti-LRP/MVP /FITC  熒光素標(biāo)記肺耐藥相關(guān)蛋白抗體IgG  0.2ml
64777 Anti-LRP1/CD91/FITC  熒光素標(biāo)記低密度脂蛋白相關(guān)受體1抗體IgG  0.2ml
64778 Anti-Phospho-LRP6 (Ser1490) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體IgG  0.2ml
64779 Anti-LRP6/FITC  熒光素標(biāo)記低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體IgG  0.2ml
64780 Anti-LRRC4/FITC  熒光素標(biāo)記腦瘤相關(guān)基因抗體IgG  0.2ml
64781 Anti-LRRK2 /FITC  熒光素標(biāo)記富*重復(fù)激酶2抗體IgG  0.2ml
64782 Anti-LTB4/Leukotriene B4/FITC  熒光素標(biāo)記白三烯B4抗體IgG  0.2ml
64783 Anti-LTB4-R1/LTB4R/FITC  熒光素標(biāo)記白三烯B4受體1抗體IgG  0.2ml
64784 Anti-LTB4-R2/FITC  熒光素標(biāo)記白三烯B4受體2抗體IgG  0.2ml
64785 Anti-Lxn(Latexin)/FITC  熒光素標(biāo)記羧肽酶抑制劑抗體IgG  0.2ml
64786 Anti-ATEXPA10 /FITC  熒光素標(biāo)記 植物延長(zhǎng)蛋白（擬南芥）IgG  0.2ml
64787 Anti-Ly-6G/FITC  熒光素標(biāo)記淋巴細(xì)胞抗原6G抗體IgG  0.2ml
64788 Anti-LY-86/MD-1/FITC  熒光素標(biāo)記MD-1蛋白抗體IgG  0.2ml
64789 Anti-LY-96/MD-2/ESOP-1/FITC  熒光素標(biāo)記MD-2蛋白抗體IgG  0.2ml
64790 Anti-Lysozyme/FITC  熒光素標(biāo)記*抗體IgG  0.2ml
64791 Anti-Phospho-Lyn (Tyr507) /FITC  熒光素標(biāo)記膜相關(guān)蛋白*激酶Lyn抗體IgG  0.2ml
64792 Anti-Phospho-Lyn (Tyr396) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化膜相關(guān)蛋白*激酶Lyn抗體IgG  0.2ml
64793 Anti-Phospho-Lyn (Tyr497) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化膜相關(guān)蛋白*激酶Lyn抗體IgG  0.2ml
64794 Anti-LYVE-1/FITC  熒光素標(biāo)記淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗體  0.2ml
64795 Anti-M2-PK /FITC  熒光素標(biāo)記丙酮酸激酶-M2抗體IgG  0.2ml
64796 Anti-M2-PK /FITC  熒光素標(biāo)記丙酮酸激酶-M2（小鼠來(lái)源抗體）IgG  0.2ml
64797 Anti-Phospho-PKM2 (Tyr105) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化丙酮酸激酶M2抗體IgG  0.2ml
64798 Anti-Mad1/FITC  熒光素標(biāo)記Mad1抗體IgG  0.2ml
64799 Anti-MAdCAM-1/FITC  熒光素標(biāo)記粘膜血管定居因子抗體IgG  0.2ml
64800 Anti-MAdCAM-1/Biotin  *標(biāo)記粘膜血管定居因子抗體IgG  0.2ml
64801 Anti-Mafa/FITC  熒光素標(biāo)記v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗體IgG  0.2ml
64802 Anti-MAFbx/Fbx32/Atrogin-1/FITC  熒光素標(biāo)記泛素蛋白連接酶抗體IgG  0.2ml
64803 Anti-MAG-a/L-MAG /FITC  熒光素標(biāo)記髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體IgG  0.2ml
64804 Anti-MAG-a/b /FITC  熒光素標(biāo)記髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體IgG  0.2ml
64805 Anti-MAGE-1/HLA-A1 protein /FITC  熒光素標(biāo)記黑素瘤抗原-1抗體IgG  0.2ml
64806 Anti-MAGE-A4/FITC  熒光素標(biāo)記黑色素瘤相關(guān)抗原4抗體IgG  0.2ml
64807 Anti-MARCKS /FITC 人*龍(PS)ELISA試劑盒 熒光素標(biāo)記*蛋白激酶C底物Marcks抗體IgG  0.2ml
64808 Anti-MAP1A/Mtap1a /FITC  熒光素標(biāo)記微管相關(guān)蛋白1A抗體IgG  0.2ml
64809 Anti-MAP1LC3A/FITC  熒光素標(biāo)記自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體IgG  0.2ml
64810 Anti-MAP-2/FITC  熒光素標(biāo)記微管相關(guān)蛋白2抗體IgG  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人*龍(PS)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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