人絨毛膜*β(β-CG)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人絨毛膜*β(β-CG)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

64700 Anti-Phospho-Lamin A/C (Ser22) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核纖層蛋白A/C抗體IgG  0.2ml
64701 Anti-LAIR-1/CD305/FITC  熒光素標(biāo)記白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體1抗體IgG  0.2ml
64702 Anti-LAIR-2/CD306/FITC  熒光素標(biāo)記白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體2抗體IgG  0.2ml
64703 Anti-Langerin/CD207/FITC  熒光素標(biāo)記白細(xì)胞分化抗原CD207抗體IgG  0.2ml
64704 Anti-LAMA3/Laminin 5 alpha 3/FITC  熒光素標(biāo)記層粘蛋白α3抗體IgG  0.2ml
64705 Anti-LAP18/stathmin/FITC  熒光素標(biāo)記白血病相關(guān)蛋白18/癌蛋白18抗體IgG  0.2ml
64706 Anti-Phospho-Stathmin (Ser16) /FITC   熒光素標(biāo)記磷酸化原癌基因蛋白18抗體IgG  0.2ml
64707 Anti-Phospho-Stathmin (Ser38)/FITC   熒光素標(biāo)記磷酸化原癌基因蛋白18抗體IgG  0.2ml
64708 Anti-LAT/FITC  熒光素標(biāo)記T細(xì)胞活化連接蛋白抗體IgG  0.2ml
64709 Anti-Phospho-LAT (Tyr171) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化T細(xì)胞活化連接蛋白抗體IgG  0.2ml
64710 Anti-Phospho-LAT (Tyr191) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化T細(xì)胞活化連接蛋白抗體IgG  0.2ml
64711 Anti-LATS1/FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤抑制基因LATS1抗體IgG  0.2ml
64712 Anti-Phospho-LATS1 (Thr1079) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化腫瘤抑制基因LATS1抗體IgG  0.2ml
64713 Anti-Phospho-LATS1 (Ser909) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化腫瘤抑制基因LATS1抗體IgG  0.2ml
64714 Anti-Layilin/FITC  熒光素標(biāo)記透明質(zhì)酸受體抗體IgG  0.2ml
64715 Anti-LCAT/FITC  熒光素標(biāo)記卵磷*?；D(zhuǎn)移酶抗體IgG  0.2ml
64716 Anti-L-Citrulline /FITC  熒光素標(biāo)記抗L-瓜氨酸抗體IgG  0.2ml
64717 Anti-Lck/p56-LCK/FITC  熒光素標(biāo)記淋巴細(xì)胞特異性蛋白*激酶抗體IgG  0.2ml
64718 Anti-p90RSK/FITC  熒光素標(biāo)記*/*激酶p90RSK蛋白抗體IgG  0.2ml
64719 Anti-Phospho-Lck (Tyr505) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化淋巴細(xì)胞特異性蛋白*激酶抗體IgG  0.2ml
64720 Anti-Rsk2/MAPKAP Kinase 1b/FITC  熒光素標(biāo)記核糖體S6激酶RSK2抗體IgG  0.2ml
64721 Anti-Phospho-RSK2 (Ser227) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體IgG  0.2ml
64722 Anti-Phospho-RSK2 (Tyr529) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體IgG  0.2ml
64723 Anti-Phospho-RSK3 (Thr353/356) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體IgG  0.2ml
64724 Anti-RSK3/Ribosomal S6 kinase 3/FITC  熒光素標(biāo)記核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體IgG  0.2ml
64725 Anti-Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體IgG  0.2ml
64726 Anti-Phospho-p90RSK (Ser380) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化*/*激酶p90RSK蛋白抗體IgG  0.2ml
64727 Anti-Phospho-p90RSK (Thr359/Ser363)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化*/*激酶p90RSK蛋白抗體IgG  0.2ml
64728 Anti-Phospho-p90RSK (Thr573)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化*/*激酶p90RSK蛋白抗體IgG  0.2ml
64729 Anti-LDH/FITC  熒光素標(biāo)記抗乳酸脫氫酶抗體IgG  0.2ml
64730 Anti-LDL/FITC  熒光素標(biāo)記低密度脂蛋白抗體IgG  0.2ml
64731 Anti-LDL-R/FITC  熒光素標(biāo)記低密度脂蛋白受體抗體IgG  0.2ml
64732 Anti-Leptin/FITC  熒光素標(biāo)記瘦素抗體IgG  0.2ml
64733 Anti-Leptin/FITC  熒光素FITC標(biāo)記瘦素抗體IgG  0.2ml
64734 Anti-Leptin receptor/FITC  熒光素標(biāo)記瘦素受體抗體IgG  0.2ml
64735 Anti-Leptin receptor(long) /FITC  熒光素標(biāo)記瘦素受體抗體（長）IgG  0.2ml
64736 Anti-Leptin receptor(long)/FITC  熒光素標(biāo)記瘦素受體抗體（長）IgG  0.2ml
64737 Anti-LFABP/FABP-1 /FITC  熒光素標(biāo)記肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體IgG  0.2ml
64738 Anti-LFABP/FABP-2 /FITC  熒光素標(biāo)記肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體IgG  0.2ml
64739 Anti-Lgr5/GPR49/FITC  熒光素標(biāo)記腸上皮干細(xì)胞蛋白抗體IgG  0.2ml
64740 Anti-LH/FITC  熒光素標(biāo)記抗人促黃體生成素抗體IgG  0.2ml
64741 Anti-LH/FITC  熒光素標(biāo)記抗人促黃體生成素抗體IgG  0.2ml
64742 Anti-LH/FITC  熒光素標(biāo)記小鼠抗人促黃體生成素單克隆抗體IgG  0.2ml
64743 anti-LH/CG Receptor/FITC  熒光素標(biāo)記人促黃體生成素受體抗體IgG  0.2ml
64744 Anti-LH/Biotin  *標(biāo)記抗人促黃體生成素抗體IgG  0.2ml
64745 Anti-L-HDC /FITC  熒光素標(biāo)記L-*脫羧酶抗體IgG  0.2ml
64746 Anti-LHRH/GNRH /FITC  熒光素標(biāo)記黃體激素釋放激素抗體/*釋放激素抗體IgG  0.2ml
64747 Anti-LI-cadherin/FITC  熒光素標(biāo)記肝腸鈣粘連蛋白抗體IgG  0.2ml
64748 Anti-LIF /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗白血病抑制因子抗體IgG  0.2ml
64749 Anti-LIFR/FITC  熒光素標(biāo)記抗白血病抑制因子受體抗體IgG  0.2ml
64750 Anti-LIMK1 /FITC   熒光素標(biāo)記單*蛋白激酶1抗體IgG  0.2ml
64751 Anti-Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化單*蛋白激酶1/2抗體IgG人絨毛膜*β(β-CG)ELISA試劑盒  0.2ml
64752 Anti-Lingo-1/FITC  熒光素標(biāo)記Nogo受體作用蛋白抗體IgG  0.2ml
64753 Anti-LIR-6/CD85i/LILRA1/FITC  熒光素標(biāo)記白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體6抗體IgG  0.2ml
64754 Anti-LILRB3/CD85a/PirB/FITC  熒光素標(biāo)記白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體-B抗體IgG  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人絨毛膜*β(β-CG)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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