人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀(guān)察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

64196 Anti-GFP/FITC (Green Fluorecent protein)  熒光素標(biāo)記兔抗綠色熒光蛋白抗體IgG  0.2ml
64197 Anti-human Fibrinogen/Biotin  *化兔抗*  0.2ml
64198 Anti-GFR Alpha-1/GDNF /FITC  熒光素標(biāo)記GDNF家族受體α-1抗體IgG  0.2ml
64199 Anti-GFRA4/FITC  熒光素標(biāo)記GDNF家族受體α-4抗體IgG  0.2ml
64200 Anti-Melamine/Biotin  *標(biāo)記兔抗三聚氰胺抗體IgG  0.2ml
64201 Anti-GHR /FITC  熒光素標(biāo)記生長(zhǎng)激素受體抗體IgG  0.2ml
64202 Anti-Ghrelin/FITC  熒光素標(biāo)記腦腸肽抗體（一種新的生長(zhǎng)激素釋放肽）IgG  0.2ml
64203 Anti-GHRF/GHRH /FITC  熒光素標(biāo)記生長(zhǎng)激素釋放激素因抗體IgG  0.2ml
64204 Anti-GIP/FITC  熒光素標(biāo)記胃泌素抑制肽抗體IgG  0.2ml
64205 Anti-TNFRSF18/FITC  熒光素標(biāo)記糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體抗體IgG  0.2ml
64206 Anti-GIG8/ID2/FITC  熒光素標(biāo)記DNA結(jié)合抑制因子2抗體IgG  0.2ml
64207 Anti-Glasses Snake poison Protein/FITC  熒光素標(biāo)記抗眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體（眼鏡蛇）IgG  0.2ml
64208 Anti-GLI1/FITC  熒光素標(biāo)記下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗體IgG  0.2ml
64209 Anti-GLP-1(7-36)/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗胰高血糖素樣肽-1抗體IgG  0.2ml
64210 Anti-GLP-1/KG-31 /FITC  熒光素標(biāo)記胰高血糖素樣肽-1抗體IgG  0.2ml
64211 Anti-GLP-2/FITC  熒光素標(biāo)記胰高血糖素樣肽-2抗體IgG  0.2ml
64212 Anti-GLP-2/FITC  熒光素標(biāo)記胰高血糖素樣肽-2抗體IgG  0.2ml
64213 Anti-Glu-Glu Tag/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗Glu-Glu Tag標(biāo)簽抗體IgG  0.2ml
64214 Anti-GLUR2/FITC  熒光素標(biāo)記*受體2抗體IgG  0.2ml
64215 Anti-GLUR3/FITC  熒光素標(biāo)記*受體3抗體IgG  0.2ml
64216 Anti-GLUR4/FITC  熒光素標(biāo)記*受體4抗體IgG  0.2ml
64217 Anti-GLP-1R/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗胰高血糖素樣肽-1受體抗體IgG  0.2ml
64218 Anti-GLUT1/FITC  熒光素標(biāo)記葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體IgG  0.2ml
64219 Anti-GLUT2/FITC  熒光素標(biāo)記葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體IgG  0.2ml
64220 Anti-GLUT3/FITC  熒光素標(biāo)記葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗體IgG  0.2ml
64221 Anti-GLUT4/FITC  熒光素標(biāo)記葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體IgG  0.2ml
64222 Anti-GLUT12/slc2a12/FITC  熒光素標(biāo)記葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白12抗體IgG  0.2ml
64223 Anti-Glycoprotein /FITC  熒光素標(biāo)記風(fēng)疹病毒糖蛋白抗體IgG  0.2ml
64224 Anti-glypican 1/FITC  熒光素標(biāo)記磷脂?；嫉鞍拙厶?1抗體IgG  0.2ml
64225 Anti-Glypican 4/FITC  熒光素標(biāo)記磷脂?；嫉鞍拙厶?4抗體IgG  0.2ml
64226 Anti-GlyR Alpha1/FITC  熒光素標(biāo)記*受體alpha1型抗體IgG  0.2ml
64227 Anti-MMP24(MT5-MMP)/FITC  熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-24抗體IgG  0.2ml
64228 Anti-GM-CSF/FITC  熒光素標(biāo)記粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體IgG  0.2ml
64229 Anti-GM-CSFR Alpha/FITC  熒光素標(biāo)記粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體α抗體IgG  0.2ml
64230 Anti-GNLY/NKG5/FITC  熒光素標(biāo)記顆粒溶素抗體IgG  0.2ml
64231 Anti-GNRHR/FITC  熒光素標(biāo)記*釋放激素受體抗體IgG  0.2ml
64232 Anti-GP65/SDFR1/FITC  熒光素標(biāo)記間質(zhì)細(xì)胞衍化因子受體1抗體IgG  0.2ml
64233 Anti-GPA/GYPA/CD235a/FITC  熒光素標(biāo)記血型糖蛋白A（涎糖蛋白）抗體IgG  0.2ml
64234 Anti-GPA33/FITC  熒光素標(biāo)記糖蛋白A33(跨膜)抗體IgG  0.2ml
64235 Anti-GPC3/FITC  熒光素標(biāo)記磷脂?；嫉鞍拙厶?3抗體IgG  0.2ml
64236 Anti-GPR14/FITC  熒光素標(biāo)記G蛋白偶聯(lián)受體14抗體IgG  0.2ml
64237 Anti-GPR30/FITC  熒光素標(biāo)記G蛋白偶聯(lián)受體30抗體IgG  0.2ml
64238 Anti-G Protein/FITC  熒光素標(biāo)記G蛋白/鳥(niǎo)苷酸結(jié)合蛋白抗體IgG  0.2ml
64239 Anti-GRP78/FITC  熒光素標(biāo)記G蛋白偶聯(lián)受體78抗體IgG  0.2ml
64240 Anti-GR /FITC  熒光素標(biāo)記糖皮質(zhì)激素受體抗體IgG  0.2ml
64241 Anti-GPNMB/Osteoactivin/FITC  熒光素標(biāo)記GPNMB抗體IgG  0.2ml
64242 Anti-Phospho-Glucocorticoid Receptor (Ser211) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化糖皮質(zhì)激素受體抗體IgG  0.2ml
64243 Anti-GRB2/ASH /FITC  熒光素標(biāo)記生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2抗體IgG  0.2ml
64244 Anti-GPR109A/HM74A/FITC  熒光素標(biāo)記G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體IgG  0.2ml
64245 Anti-GRB10/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10抗體IgG  0.2ml
64246 Anti-Phospho-GRB10 (Tyr67) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10抗體IgG  0.2ml
64247 Anti-GrB(Granzyme B)(AA 18-29)/FITC  熒光素標(biāo)記顆粒酶B抗體IgG  0.2ml
64248 Anti-gremlin/FITC  熒光素標(biāo)記骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白抗體IgG  0.2ml
64249 Anti-GRGDS/FITC 人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒 熒光素標(biāo)記抗粘附多肽抗體IgG  0.2ml
64250 Anti-GRO Alpha/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α抗體IgG  0.2ml
64251 Anti-GRK1/FITC  熒光素標(biāo)記G蛋白偶合受體激酶1抗體IgG  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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