人甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

64084 Anti-PLC beta 3/Phospholipase C beta 3/FITC  熒光素標(biāo)記磷酯酶Cβ3抗體IgG  0.2ml
64085 Anti-Phospho-PLC gamma 2 (Tyr1217) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化磷酯酶Cγ2抗體IgG  0.2ml
64086 Anti-Phospho-PLC gamma 2 (Tyr759) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化磷酯酶Cγ2抗體IgG  0.2ml
64087 Anti-Phospho-PLC beta3 (Ser537)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化磷酯酶Cβ3抗體IgG  0.2ml
64088 Anti-Phospho-PLC gamma 1 （Ser1248）/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化磷酯酶Cγ1抗體IgG  0.2ml
64089 Anti-Phospho-PLC gamma 1 （Tyr783）/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化磷酯酶Cγ1抗體IgG  0.2ml
64090 Anti-KGFR/FGFR2/FITC  熒光素標(biāo)記角質(zhì)形成細(xì)胞生長因子受體/成纖維細(xì)胞生長因子受體2抗體IgG  0.2ml
64091 Anti-FGFR3/FITC  熒光素標(biāo)記成纖維細(xì)胞生長因子受體3抗體IgG  0.2ml
64092 Anti-FGFR4/FITC  熒光素標(biāo)記成纖維細(xì)胞生長因子受體4抗體IgG  0.2ml
64093 Anti-FGF-BP/FITC  熒光素標(biāo)記抗纖維細(xì)胞生長因子結(jié)合蛋白抗體IgG  0.2ml
64094 Anti-fgl2/FITC  熒光素標(biāo)記*原酶抗體IgG  0.2ml
64095 ANti-FHIT/FITC  熒光素標(biāo)記抗脆性*三聯(lián)體抗體IgG  0.2ml
64096 Anti-Fibulin 1/FITC  熒光素標(biāo)記抗“衰老關(guān)鍵蛋白"抗體IgG  0.2ml
64097 Anti-Phospho-FHIT (Tyr114) /FITC  熒光素標(biāo)記抗磷酸化脆性*三聯(lián)體抗體IgG  0.2ml
64098 Anti-Fibulin-5/FITC  熒光素標(biāo)記抗“衰老關(guān)鍵蛋白"抗體IgG  0.2ml
64099 Anti-FLG/FITC  熒光素標(biāo)記絲聚蛋白/中間絲蛋白抗體IgG  0.2ml
64100 Anti-FLIP S/L /FITC  熒光素標(biāo)記凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體IgG  0.2ml
64101 Anti-FLIPS/FITC  熒光素標(biāo)記凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體（短型）IgG  0.2ml
64102 Anti-FN /FITC  熒光素標(biāo)記纖維連結(jié)蛋白抗體IgG  0.2ml
64103 Anti-FN/RBITC  紅色熒光素標(biāo)記纖維連接蛋白抗體IgG  0.2ml
64104 Anti-FOS B/FITC  熒光素標(biāo)記FosB抗體IgG  0.2ml
64105 Anti-FOSL1/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗FOSL1抗體IgG  0.2ml
64106 Anti-FOSL2/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗FOSL2抗體IgG  0.2ml
64107 Anti-FOXJ1/HFH-4/FITC  熒光素標(biāo)記抗插頭蛋白J1抗體IgG  0.2ml
64108 Anti-FOXO1/FOXO1A/FITC  熒光素標(biāo)記叉頭轉(zhuǎn)錄因子O1抗體IgG  0.2ml
64109 Anti-Phospho-FoxO1 (Thr24)/FoxO3a (Thr32) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白家族抗體IgG  0.2ml
64110 Anti-Phospho-FoxO1 (Ser319) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白家族1抗體IgG  0.2ml
64111 Anti-Phospho-FoxO1 (Ser256) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白家族1抗體IgG  0.2ml
64112 Anti-FOXO3A/FITC  熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子FOXO3A抗體IgG  0.2ml
64113 Anti-Phospho-FoxO3a (Ser318/321) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白3A抗體IgG  0.2ml
64114 Anti-Phospho-FoxO3a (Ser294) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白3A抗體IgG  0.2ml
64115 Anti-Phospho-FoxO3a (Ser253) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白3A抗體IgG  0.2ml
64116 Anti-FOXO4/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白4抗體IgG  0.2ml
64117 Anti-Phospho-FoxO4 (Ser193) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白4抗體IgG  0.2ml
64118 Anti-phospho-FOXO4 (phospho S197) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白4抗體IgG  0.2ml
64119 Anti-phospho-FOXO4 (Ser262) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白4抗體IgG  0.2ml
64120 Anti-FOXF1/FITC  熒光素標(biāo)記叉頭蛋白F1抗體IgG  0.2ml
64121 Anti-FOXM1/HFH 11/FITC  熒光素標(biāo)記插頭蛋白M1抗體IgG  0.2ml
64122 Anti-FoxP1/FITC  熒光素標(biāo)記FoxP1（T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子）抗體IgG  0.2ml
64123 Anti-FoxP3/FITC  熒光素標(biāo)記叉頭蛋白3-T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG  0.2ml
64124 Anti-FPR1/FITC  熒光素標(biāo)記甲酸基肽受體1抗體IgG  0.2ml
64125 Anti-FPRL1 /FITC  熒光素標(biāo)記脂氧素受體1抗體IgG  0.2ml
64126 Anti-Fractalkine/CX3CL1 /FITC  熒光素標(biāo)記神經(jīng)趨化蛋白抗體IgG  0.2ml
64127 Anti-Phospho-FRA1 (Ser265) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化FRA-1蛋白抗體IgG  0.2ml
64128 Anti-FSCN1/FITC  熒光素標(biāo)記纖維束蛋白同源物1/肌動蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 抗體IgG  0.2ml
64129 Anti-FSH/FITC  熒光素標(biāo)記促卵泡刺激素抗體IgG  0.2ml
64130 Anti-FSH-R/FITC  熒光素標(biāo)記促卵泡刺激素受體抗體IgG  0.2ml
64131 Anti-FSP/Spastin/FITC  熒光素標(biāo)記抗纖維母細(xì)胞表面抗原抗體IgG  0.2ml
64132 Anti-FST/FITC  熒光素標(biāo)記抗卵泡抑素抗體IgG  0.2ml
64133 Anti-F1 operon positive regulatory protein(NT)/FITC  熒光素標(biāo)記鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（N端）IgG  0.2ml
64134 Anti-F1 operon positive regulatory protein(CT)/FITC  熒光素標(biāo)記鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（C端）IgG  0.2ml
64135 Anti-Gab1/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠接頭蛋白Gab 1抗體IgG  0.2ml
64136 Anti-Gab2/FITC  人甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒熒光素標(biāo)記接頭蛋白Gab 2抗體IgG  0.2ml
64137 Anti-Phospho-Gab1 (Tyr627) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化接頭蛋白Gab 1抗體IgG  0.2ml
64138 Anti-Phospho-Gab1 (Tyr659) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化接頭蛋白Gab 1抗體IgG  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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