人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

64028 Anti-ET-1/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)皮素-1抗體IgG  0.2ml
64029 Anti-ET-1/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)皮素-1抗體IgG  0.2ml
64030 Anti-ET-1/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)皮素-1抗體IgG  0.2ml
64031 Anti-ET-1/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記內(nèi)皮素-1單克隆抗體IgG  0.2ml
64032 Anti-ETK/BMX/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠非受體性蛋白*激酶ETK抗體IgG  0.2ml
64033 Anti-Phospho-ETK (Tyr40) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化非受體性蛋白*激酶ETK抗體IgG  0.2ml
64034 Anti-E Tag/FITC  熒光素標(biāo)記抗E Tag抗體IgG  0.2ml
64035 Anti-ets1/E26 /FITC  熒光素標(biāo)記Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體IgG  0.2ml
64036 Anti-Eukaryotic aspartyl protease/FITC  熒光素標(biāo)記天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗體IgG  0.2ml
64037 Anti-EV71/FITC  熒光素標(biāo)記腸道病毒71型/手足口病病毒抗體IgG  0.2ml
64038 Anti-EV71(CT)/FITC  熒光素標(biāo)記腸道病毒71型/手足口病病毒抗體(C端)IgG  0.2ml
64039 Anti-EXPB-2/FITC  熒光素標(biāo)記植物延展素-βIgG  0.2ml
64040 Anti-Ezrin/Radixin/FITC  熒光素標(biāo)記埃茲蛋白抗體IgG  0.2ml
64041 Anti-Phospho-Ezrin (Tyr353) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化埃茲蛋白抗體IgG  0.2ml
64042 Anti-Phospho-Ezrin (Thr567) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化埃茲蛋白抗體IgG  0.2ml
64043 Anti-Fabp2 /FITC  熒光素標(biāo)記脂肪酸結(jié)合蛋白2抗體IgG  0.2ml
64044 Anti-FABP(brain)/FITC  熒光素標(biāo)記腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體IgG  0.2ml
64045 Anti-factor V/FITC  熒光素標(biāo)記*5抗體IgG  0.2ml
64046 Anti-factor VIII/FITC  熒光素標(biāo)記第八因子相關(guān)抗原抗體IgG  0.2ml
64047 Anti-factor VIII/FITC  熒光素標(biāo)記第八因子相關(guān)抗原抗體IgG  0.2ml
64048 Anti-factor X III /FITC  熒光素標(biāo)記*ⅩⅢ抗體IgG  0.2ml
64049 Anti-FADD/FITC  熒光素標(biāo)記Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體IgG  0.2ml
64050 Anti-FADD/FITC  熒光素標(biāo)記Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體IgG  0.2ml
64051 Anti-Phospho-FADD (Ser191) Mouse Specific /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗小鼠磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體IgG  0.2ml
64052 Anti-Phospho-FGF Receptor 1 (Tyr766) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體IgG  0.2ml
64053 Anti-P-FADD/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體IgG  0.2ml
64054 Anti-FAF1/FITC  熒光素標(biāo)記Fas相關(guān)1因子抗體IgG  0.2ml
64055 Anti-FAK/FITC  熒光素標(biāo)記粘著斑激酶抗體  0.2ml
64056 Anti-FAK2/Pyk2/FITC  熒光素標(biāo)記富含*的*激酶2抗體IgG  0.2ml
64057 Anti-phospho-Pyk2 (Tyr402)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化富含*的*激酶2抗體IgG  0.2ml
64058 Anti-phospho-Pyk2 (Tyr881) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化富含*的*激酶2抗體IgG  0.2ml
64059 Anti-FAM3A/FITC  熒光素標(biāo)記胰腺衍生因子抗體IgG  0.2ml
64060 Anti-FAM3B/PANDER /FITC  熒光素標(biāo)記胰腺衍生因子抗體IgG  0.2ml
64061 Anti-FANCD2/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠FANCD2抗體IgG  0.2ml
64062 Anti-FANCD2(phospho Ser222) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化FANCD2抗體IgG  0.2ml
64063 Anti-FANCF/FITC  熒光素標(biāo)記范可尼貧血相關(guān)蛋白F抗體IgG  0.2ml
64064 Anti-FAS/FITC  熒光素標(biāo)記FAS蛋白抗體IgG  0.2ml
64065 Anti-FASN/FITC  熒光素標(biāo)記抗脂肪酸合成酶抗體IgG  0.2ml
64066 Anti-FasL/FITC  熒光素標(biāo)記FasL蛋白抗體IgG  0.2ml
64067 Anti-FAST kinase/FITC  熒光素標(biāo)記抗Fas活化的絲/*激酶抗體IgG  0.2ml
64068 Anti-FBN1 /FITC  熒光素標(biāo)記原纖維蛋白1抗體IgG  0.2ml
64069 Anti-Fc GammaR II A/CD32a/FITC  熒光素標(biāo)記免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ抗體IgG  0.2ml
64070 Anti-FDC-SP/FITC  熒光素標(biāo)記抗B淋巴細(xì)胞表面結(jié)合蛋白抗體IgG  0.2ml
64071 Anti-Fe65 protein/FITC  熒光素標(biāo)記Fe65 蛋白抗體IgG  0.2ml
64072 Anti-FGF1/FITC  熒光素標(biāo)記酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子  0.2ml
64073 Anti-FGF3/Oncogene INT2 /FITC  熒光素標(biāo)記纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子3抗體IgG  0.2ml
64074 Anti-FGF4/HSTF1/HBGF-4/FITC  熒光素標(biāo)記纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子4抗體IgG  0.2ml
64075 Anti-FGF5/FITC  熒光素標(biāo)記纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子5抗體IgG  0.2ml
64076 Anti-KGF/FGF-7/FITC  熒光素標(biāo)記角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子-7抗體IgG  0.2ml
64077 Anti-FGF-8/HBGF-8/FITC  熒光素標(biāo)記成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-8/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子-8抗體IgG  0.2ml
64078 Anti-FGF-13/FITC  熒光素標(biāo)記抗纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子-13抗體IgG  0.2ml
64079 Anti-FGF-10/FITC  人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒熒光素標(biāo)記成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-10/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子-10抗體IgG  0.2ml
64080 Anti-bFGF-R/FGFR1/FITC  熒光素標(biāo)記纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體IgG  0.2ml
64081 Anti-PLCG 1/PLC gamma 1/FITC  熒光素標(biāo)記磷酯酶Cγ1抗體IgG  0.2ml
64082 Anti-PLCG 2/PLC gamma 2/FITC  熒光素標(biāo)記磷酯酶Cγ2抗體IgG  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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