人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

63970 Anti-Endo G /FITC  熒光素標(biāo)記核酸內(nèi)切酶G抗體IgG  0.2ml
63971 Anti-Phospho-ELk1 (Ser383) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體IgG  0.2ml
63972 Anti-Emp1/FITC  熒光素標(biāo)記表皮膜蛋白1抗體IgG  0.2ml
63973 Anti-Endostatin/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體IgG  0.2ml
63974 Anti-envelope glycoprotein Yellow fever virus/FITC  熒光素標(biāo)記抗黃熱病毒包膜糖蛋白抗體IgG  0.2ml
63975 Anti- Beta-endorphin/FITC  熒光素標(biāo)記人、大、小鼠、羊、牛beta內(nèi)啡肽抗體IgG  0.2ml
63976 Anti-ENPP1/PC-1/FITC  熒光素標(biāo)記抗核苷酸內(nèi)焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體IgG  0.2ml
63977 Anti-EGFL7/FITC  熒光素標(biāo)記抗脈管發(fā)育(組裝)蛋白抗體IgG  0.2ml
63978 Anti-Phospho-EGFR(Tyr1045) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化表皮生長因子受體抗體IgG  0.2ml
63979 Anti-Phospho-EGFR(Tyr1086) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化表皮生長因子受體抗體IgG  0.2ml
63980 Anti-Phospho-EGFR(Tyr1148) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化表皮生長因子受體抗體IgG  0.2ml
63981 Anti-Phospho-EGFR(Tyr1173) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化表皮生長因子受體抗體IgG  0.2ml
63982 Anti-Phospho-EGFR(Tyr845) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化表皮生長因子受體抗體IgG  0.2ml
63983 Anti-Phospho-EGFR(Tyr998) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化表皮生長因子受體抗體IgG  0.2ml
63984 Anti-EGF(mouse)/FITC  熒光素標(biāo)記表皮生長因子抗體(小鼠)IgG  0.2ml
63985 Anti-HB-EGF/DTSF/FITC  熒光素標(biāo)記肝素結(jié)合性表皮生長因子抗體IgG  0.2ml
63986 Anti-EGF/FITC  熒光素標(biāo)記表皮生長因子抗體(大鼠)IgG  0.2ml
63987 Anti-EP3/FITC  熒光素標(biāo)記前列腺素E受體3抗體IgG  0.2ml
63988 Anti-E.coli O6 (Escherichia coli O6)/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記抗大腸埃希桿菌O6抗體IgG  0.1ml
63989 Anti-E.coli DH-5 Alpha/FITC  熒光素標(biāo)記抗DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體IgG  0.2ml
63990 Anti-E.coli DH-5 Alpha /HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記抗DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體IgG  0.2ml
63991 Anti-E.coli O139/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體IgG  0.2ml
63992 Anti-E.coli O157/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記抗大腸埃希氏菌O157抗體IgG  0.2ml
63993 Anti-EPEC/E.coli /HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記抗腸致病性大腸桿菌抗體IgG  0.2ml
63994 Anti-EPEC/E.coli/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記抗普通大腸埃希菌菌體蛋白抗體IgG  0.2ml
63995 Anti-E.coli/EPEC/FITC  熒光素標(biāo)記抗普通大腸埃希菌菌體蛋白抗體IgG  0.2ml
63996 Anti-E.coli O6 (Escherichia coli O6)/FITC  熒光素標(biāo)記大腸埃希桿菌O6抗體IgG  0.2ml
63997 Anti-E.coli O139/FITC  熒光素標(biāo)記抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體IgG  0.2ml
63998 Anti-E.coli O157/FITC  熒光素標(biāo)記抗大腸埃希氏菌O157抗體IgG  0.2ml
63999 Anti-EPEC/E.coli /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗腸致病性大腸桿菌抗體IgG  0.2ml
64000 Anti-EphA1 R/FITC  熒光素標(biāo)記抗EphA1-R受體抗體IgG  0.2ml
64001 Anti-EphA2 R/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠*蛋白激酶受體A2抗體IgG  0.2ml
64002 Anti-Phospho-EphA2 (Tyr594) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化*蛋白激酶A2受體抗體IgG  0.2ml
64003 Anti-EphA4 R/FITC  熒光素標(biāo)記*蛋白激酶受體A4抗體IgG  0.2ml
64004 Anti-EphA4/FITC  熒光素標(biāo)記抗*蛋白激酶A4抗體IgG  0.2ml
64005 Anti-EphB2 R/FITC  熒光素標(biāo)記*蛋白激酶受體B2抗體IgG  0.2ml
64006 Anti-EphB6R/Eph receptor B6/FITC  熒光素標(biāo)記*蛋白激酶受體B6抗體IgG  0.2ml
64007 Anti-EPOR/FITC  熒光素標(biāo)記紅細(xì)胞生成素受體抗體IgG  0.2ml
64008 Anti-ER/FITC  熒光素標(biāo)記雌激素受體抗體IgG  0.2ml
64009 Anti-ERAB/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體IgG  0.2ml
64010 Anti-ERCC1/FITC  熒光素標(biāo)記抗切除修復(fù)交叉互補基因1抗體IgG  0.2ml
64011 Anti-ERK1/ERK /FITC  熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶1抗體IgG  0.2ml
64012 Anti-p-ERK1/p-MAPK-1/2 /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體IgG  0.2ml
64013 Anti-ERK1/2/FITC  熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體IgG  0.2ml
64014 Anti-Eph receptor B2/FITC  熒光素標(biāo)記Eph receptor B2抗體IgG  0.2ml
64015 Anti-ER- Alpha/FITC  熒光素標(biāo)記雌激素受體α抗體IgG  0.2ml
64016 Anti-ER-alpha/FITC  熒光素標(biāo)記雌激素受體抗體IgG  0.2ml
64017 Anti-ER- Alpha/FITC  熒光素標(biāo)記雌激素受體α抗體IgG  0.2ml
64018 Anti-ER- Alpha(phospho-S167)/FITC  熒光素標(biāo)記抗人磷酸化雌激素受體α抗體IgG  0.2ml
64019 Anti-ER- Alpha/ Beta /FITC  熒光素標(biāo)記雌激素受體α/β抗體IgG  0.2ml
64020 Anti-NR1D1/REV-ERB alpha/FITC  熒光素標(biāo)記細(xì)胞核受體Rev-Erbα抗體IgG  0.2ml
64021 Anti-Phospho-REV-ERB alpha (Ser55/59)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞核受體Rev-Erbα抗體IgG 人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒 0.2ml
64022 Anti-ER- Beta/FITC  熒光素標(biāo)記雌激素受體β抗體IgG  0.2ml
64023 Anti-ER- Beta/FITC  熒光素標(biāo)記雌激素受體β 抗體IgG  0.2ml
64024 Anti-Phospho-Estrogen Receptor α (Ser118) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化雌激素受體α抗體IgG  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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