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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-16 10:57:57瀏覽次數(shù):213次
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人雄激素受體(AR)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人雄激素受體(AR)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人雄激素受體(AR)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
63466 Anti-CD31(PECAM-1)/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體IgG 0.2ml
63467 Anti-CD31/FITC 熒光素標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體IgG 0.2ml
63468 Anti-CD33/Siglec-3/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD33抗體IgG 0.2ml
63469 Anti-CD33/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD33抗體IgG 0.2ml
63470 Anti-CD33L/OBBP1/FITC 熒光素標(biāo)記兔CD33L抗體IgG 0.2ml
63471 Anti-CD34/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、兔、牛、豬、犬CD34抗體IgG 0.2ml
63472 Anti-CD34(C-term) /FITC 熒光素標(biāo)記CD34抗體(細(xì)胞表面的唾液粘蛋白)C端蛋白多肽IgG 0.2ml
63473 Anti-Anti-CD44v10 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠CD44V10抗體IgG 0.2ml
63474 Anti-CD34/PE 熒光素PE標(biāo)記CD34抗體(細(xì)胞表面的唾液粘蛋白)IgG 0.2ml
63475 Anti-CR1/CD35/FITC 熒光素標(biāo)記Ⅰ型補(bǔ)體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)IgG 0.2ml
63476 Anti-CD36/FITC 熒光素標(biāo)記CD36抗體IgG 0.2ml
63477 Anti-CD38(human)/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD38抗體(人)IgG 0.2ml
63478 Anti-CD38(mouse, rat)/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD38抗體(小鼠、大鼠)IgG 0.2ml
63479 Anti-CD40L /FITC 熒光素標(biāo)記抗CD40L抗體IgG 0.2ml
63480 Anti-CD34/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記CD34抗體IgG 0.2ml
63481 Anti-CD44/FITC 熒光素標(biāo)記CD44抗體IgG 0.2ml
63482 Anti-CD43/SPN/FITC 熒光素標(biāo)記CD43抗體IgG 0.2ml
63483 Anti-CD44/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記CD44抗體IgG 0.2ml
63484 Anti-CD44v4 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠CD44V4抗體IgG 0.2ml
63485 Anti-CD44v5 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠CD44V5抗體IgG 0.2ml
63486 Anti-CD44V6/CD44/HCAM/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD44抗體IgG 0.2ml
63487 Anti-CD44v7 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠CD44V7抗體IgG 0.2ml
63488 Anti-CD45(LCA)/FITC 熒光素標(biāo)記CD45(白細(xì)胞共同抗原)抗體 0.2ml
63489 Anti-CD45/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記CD45抗體 IgG 0.2ml
63490 Anti-CD45RO/FITC 熒光素標(biāo)記CD45RO抗體IgG 0.2ml
63491 Anti-CD46/MCP /FITC 熒光素標(biāo)記膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗體(人)IgG 0.2ml
63492 Anti-CD46/MCP /FITC 熒光素標(biāo)記膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗體IgG 0.2ml
63493 Anti-CA125/Biotin *標(biāo)記兔抗人CA125抗原抗體IgG 0.2ml
63494 Anti-CD48/SLAMF2/FITC 熒光素標(biāo)記CD48抗體IgG 0.2ml
63495 Anti-CD44/PE 熒光素PE標(biāo)記CD44抗體IgG 0.2ml
63496 Anti-CD45/PE 熒光素PE標(biāo)記兔抗人、小鼠CD45抗體IgG 0.2ml
63497 Anti-CD133/Biotin *化造血干細(xì)胞抗原CD133抗體 0.2ml
63498 Anti-CD55/DAF/FITC 熒光素標(biāo)記衰變加速因子CD55抗體IgG 0.2ml
63499 Anti-CD56/FITC 熒光素標(biāo)記CD56抗體IgG 0.2ml
63500 Anti-CD56/NCAM1/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1抗體IgG 0.2ml
63501 Anti-CD57/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD57抗體IgG 0.2ml
63502 Anti-CD58/LFA-3/FITC 熒光素標(biāo)記淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原-3抗體IgG 0.2ml
63503 Anti-CD59/FITC 熒光素標(biāo)記反應(yīng)性溶血膜抑制蛋白抗體IgG 0.2ml
63504 Anti-CD62L/FITC 熒光素標(biāo)記L選擇素抗體IgG 0.2ml
63505 Anti-CD63/MLA1 /FITC 熒光素標(biāo)記抗溶酶體膜糖蛋白抗體IgG 0.2ml
63506 Anti-CD63/MLA1 /RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記抗溶酶體膜糖蛋白抗體IgG 0.2ml
63507 Anti-CD66a/Cea-1/CEACAM1/FITC 熒光素標(biāo)記癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子1抗體IgG 0.2ml
63508 Anti-CD67/CEAcam8/FITC 熒光素標(biāo)記整合素樣癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8抗體IgG 0.2ml
63509 Anti-CD68/FITC 熒光素標(biāo)記CD68抗體IgG 0.2ml
63510 Anti-CEA/Biotin *化癌胚抗原抗體IgG 0.2ml
63511 Anti-CD68/FITC 熒光素標(biāo)記CD68抗體IgG 0.2ml
63512 Anti-CD69/CLEC2C/AIM/FITC 熒光素標(biāo)記活化誘導(dǎo)分子CD69抗體IgG 0.2ml
63513 Anti-CD73/FITC 熒光素標(biāo)記胞漿-5′-核苷酸酶-Ⅱ抗體IgG 0.2ml
63514 Anti-CD79A/IGBP-1 /FITC 熒光素標(biāo)記免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體IgG 0.2ml
63515 Anti-B7-1/CD80 /FITC 熒光素標(biāo)記抗刺激分子B7-1蛋白抗體IgG 0.2ml
63516 Anti-CD80/B7-1/FITC 人雄激素受體(AR)ELISA試劑盒 熒光素標(biāo)記刺激分子B7-1蛋白抗體IgG 0.2ml
63517 Anti-CD82/KAI1/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗體IgG 0.2ml
63518 Anti-CD83/Cell surface protein HB15/FITC 熒光素標(biāo)記CD83抗體IgG 0.2ml
63519 Anti-CD84/SLAMF5/FITC 熒光素標(biāo)記CD84抗體IgG 0.2ml
63520 Anti-SLAMF6/LY108/FITC 熒光素標(biāo)記SLAMF6抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人雄激素受體(AR)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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