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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-30 02:15:21瀏覽次數(shù):162次
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人異丙腎上腺素(iso-Hyd)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人異丙腎上腺素(iso-Hyd)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人異丙腎上腺素(iso-Hyd)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
63352 Anti-Caspase-8 /FITC 熒光素標(biāo)記半*蛋白酶8抗體IgG 0.2ml
63353 Anti-FLASH/CASP8AP2/FITC 熒光素標(biāo)記半*蛋白酶8相關(guān)蛋白2抗體IgG 0.2ml
63354 Anti-Caspase-9/FITC 熒光素標(biāo)記白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG 0.2ml
63355 Anti-Caspase-9/FITC 熒光素標(biāo)記白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG 0.2ml
63356 Anti-Phospho-Caspase-9 (Pry153) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG 0.2ml
63357 Anti-Caspase-10/FITC 熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶-10抗體IgG 0.2ml
63358 Anti-Caspase-12(hunman)/FITC 熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體(人)IgG 0.2ml
63359 Anti-Caspase-12/FITC 熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體IgG 0.2ml
63360 Anti-Caspase-13/FITC 熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體IgG 0.2ml
63361 Anti-Phospho-Caspase-9 (Thr125) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG 0.2ml
63362 Anti- Alpha-Catenin/ Alpha-cats /FITC 熒光素標(biāo)記α-連環(huán)蛋白抗體(α-α鏈接素)IgG 0.2ml
63363 Anti- Beta-catenin/ Beta-cats /FITC 熒光素標(biāo)記 β-連環(huán)蛋白抗體IgG 0.2ml
63364 Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser33/37) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體IgG 0.2ml
63365 anti-p- Beta catenin/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化β-連環(huán)蛋白抗體IgG 0.2ml
63366 Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser45)/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體IgG 0.2ml
63367 Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser552) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體IgG 0.2ml
63368 Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser675) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體IgG 0.2ml
63369 Anti-Phospho- Beta-Catenin (Thr41/Ser45) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體IgG 0.2ml
63370 Anti- Gamma-Catenin/ Gamma-cats /FITC 熒光素標(biāo)記γ-連環(huán)蛋白抗體(γ-γ鏈接素)IgG 0.2ml
63371 anti-cath-B/CB/FITC 熒光素標(biāo)記組織蛋白酶B抗體IgG 0.2ml
63372 Anti-cath-D/CD /FITC 熒光素標(biāo)記組織蛋白酶D抗體IgG 0.2ml
63373 Anti-cath-G/CG /FITC 熒光素標(biāo)記組織蛋白酶G抗體IgG 0.2ml
63374 Anti-cath-H/CH /FITC 熒光素標(biāo)記組織蛋白酶H抗體IgG 0.2ml
63375 Anti-cath-K/CK /FITC 熒光素標(biāo)記組織蛋白酶K抗體IgG 0.2ml
63376 anti-cath-L/CL /FITC 熒光素標(biāo)記組織蛋白酶L抗體IgG 0.2ml
63377 Anti-Cathepsin B/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗組織蛋白酶B抗體IgG 0.2ml
63378 Anti-Cav-1/FITC 熒光素標(biāo)記抗小凹蛋白抗體IgG 0.2ml
63379 Anti-Caveolin-3/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-3抗體IgG 0.2ml
63380 Anti-CACH2/CaV1.2/FITC 熒光素標(biāo)記L型鈣通道蛋白抗體IgG 0.2ml
63381 Anti-CACNA1G/Cav3.1 /FITC 熒光素標(biāo)記電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體IgG 0.2ml
63382 Anti-CBFA1/RUNX2/FITC 熒光素標(biāo)記成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG 0.2ml
63383 Anti-CBL2 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠原癌蛋白CBL2抗體IgG 0.2ml
63384 Anti-phospho-CBL2(Tyr731) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原癌蛋白CBL2抗體IgG 0.2ml
63385 Anti-phospho-CBL2(Tyr774) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化原癌蛋白CBL2抗體IgG 0.2ml
63386 Anti-CBP/FITC 熒光素標(biāo)記CREB結(jié)合蛋白抗體IgG 0.2ml
63387 Anti-CBX3/FITC 熒光素標(biāo)記染色盒同源物3抗體IgG 0.2ml
63388 Anti-CBX5/FITC 熒光素標(biāo)記CBX5抗體IgG 0.2ml
63389 Anti-Cbx8/FITC 熒光素標(biāo)記染色質(zhì)結(jié)合蛋白Cbx8抗體IgG 0.2ml
63390 Anti-CC16/FITC 熒光素標(biāo)記克拉拉細(xì)胞蛋白(Clara細(xì)胞分泌蛋白)抗體IgG 0.2ml
63391 Anti-CCK8/FITC 熒光素標(biāo)記膽囊收縮素/縮膽囊素抗體(八肽) 0.2ml
63392 Anti-CCL1/I-309/TCA3/FITC 熒光素標(biāo)記嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL1抗體IgG 0.2ml
63393 Anti-CCL3/MIP-1 Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α抗體IgG 0.2ml
63394 Anti-CCL4/MIP-1 Beta/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β抗體IgG 0.2ml
63395 Anti-CCL5/RANTES/FITC 熒光素標(biāo)記調(diào)節(jié)活化的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的因子IgG 0.2ml
63396 Anti-CCL6/C10/FITC 熒光素標(biāo)記嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL6抗體IgG 0.2ml
63397 Anti-CCL9/CCL10/MIP-1 Gamma/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1γ抗體IgG 0.2ml
63398 Anti-CCL11/FITC 熒光素標(biāo)記嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白抗體IgG 0.2ml
63399 Anti-CCL12/MCP-5/FITC 熒光素標(biāo)記單核細(xì)胞趨化蛋白5抗體IgG 0.2ml
63400 Anti-CCL13/MCP-4/FITC 熒光素標(biāo)記單核細(xì)胞趨化蛋白4抗體IgG 0.2ml
63401 Anti-CCL14/HCC-1/FITC 熒光素標(biāo)記嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白14抗體IgG 0.2ml
63402 Anti-CYLD/cylindromatosis 1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠微管結(jié)合蛋白CYLD抗體IgG 0.2ml
63403 Anti-phospho-CYLD(Ser418) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化微管結(jié)合蛋白CYLD抗體IgG 人異丙腎上腺素(iso-Hyd)ELISA試劑盒 0.2ml
63404 Anti-CCL15/MIP5/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞炎性蛋白15IgG 0.2ml
63405 Anti-CCL16/HCC-4/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞炎性蛋白16抗體IgG 0.2ml
63406 Anti-CCL17/TARC/FITC 熒光素標(biāo)記胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子抗體IgG 0.2ml
63407 Anti-ABCD1/MDC(small inducible cytokine A22 precursor)/FITC 熒光素標(biāo)記抗嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白2抗體IgG 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人異丙腎上腺素(iso-Hyd)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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