人早老素2(PS-2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人早老素2(PS-2)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

63296 Anti-B Raf(phospho S365) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化B-Raf抗體IgG  0.2ml
63297 Anti-phospho-B-Raf (Ser445)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化B-Raf抗體IgG  0.2ml
63298 Anti-phospho-B-Raf (Ser601) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化B-Raf抗體IgG  0.2ml
63299 Anti-BRCA1(human)/FITC  熒光素標(biāo)記乳腺癌易感基因1抗體(人)IgG  0.2ml
63300 Anti-BRCA1(mouse rat)/FITC  熒光素標(biāo)記乳腺癌易感基因1抗體（小鼠 大鼠）IgG  0.2ml
63301 Anti-BRCA1(Phospho Ser1524) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化乳腺癌易感基因1抗體IgG  0.2ml
63302 Anti-BRCA2/FITC  熒光素標(biāo)記乳腺癌易感基因2抗體IgG  0.2ml
63303 Anti-BrdU/FITC(Bromodeoxyuridine)  熒光素標(biāo)記兔抗溴脫氧尿苷抗體IgG  0.2ml
63304 Anti-BrdU/FITC  熒光素標(biāo)記溴脫氧尿苷抗體IgG  0.2ml
63305 Anti-SMARCA4/SNF2 beta/FITC  熒光素標(biāo)記抑癌基因SNF2β抗體IgG  0.2ml
63306 Anti-BRMS-1/FITC  熒光素標(biāo)記乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體IgG  0.2ml
63307 Anti-BTG2/TIS21/FITC  熒光素標(biāo)記B細(xì)胞遷移基因2抗體IgG  0.2ml
63308 Anti-Brucella/FITC  熒光素標(biāo)記抗布魯氏菌抗體IgG  0.2ml
63309 Anti-Brucella/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記抗布魯氏菌抗體IgG  0.2ml
63310 Anti-Brucella/Biotin  *標(biāo)記抗布魯氏菌抗體IgG  0.2ml
63311 Anti-BSEP/FITC  熒光素標(biāo)記膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗體IgG  0.2ml
63312 Anti-BSP/FITC  熒光素標(biāo)記骨涎蛋白抗體IgG  0.2ml
63313 Goat Anti-human C3/FITC  熒光素標(biāo)記羊抗人補(bǔ)體C3 IgG  0.2ml
63314 Anti-C5a/FITC  熒光素標(biāo)記過敏毒素C5a（補(bǔ)體C5a）抗體IgG  0.2ml
63315 Anti-C5b-9/TCC/FITC  熒光素標(biāo)記末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9抗體IgG  0.2ml
63316 Anti-CA125/FITC  熒光素標(biāo)記卵巢癌抗原抗體IgG  0.2ml
63317 Anti-CA15-3/FITC  熒光素標(biāo)記乳腺癌相關(guān)抗原抗體IgG  0.2ml
63318 Anti-phospho-c-Abl/v-abl(Tyr245) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體IgG  0.2ml
63319 Anti-phospho-c Abl/v-abl(Tyr412) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大,小鼠磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體IgG  0.2ml
63320 Anti-phospho-c-Abl/v-abl(Tyr204) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體IgG  0.2ml
63321 Anti-phospho-c-Abl/v-abl(Thr735) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體IgG  0.2ml
63322 Anti-phospho-c-Abl(Tyr89) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、小鼠磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體IgG  0.2ml
63323 Anti-Phospho-HDAC3 (Ser424)/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化組蛋白去乙?；?抗體IgG  0.2ml
63324 Anti-CAD/CPAN/FITC  熒光素標(biāo)記Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抗體IgG  0.2ml
63325 Anti-CA I/FITC  熒光素標(biāo)記碳酸酐酶1抗體IgG  0.2ml
63326 Anti-CA II /FITC  熒光素標(biāo)記碳酸酐酶2抗體IgG  0.2ml
63327 Anti-Calcineurin Alpha /PP-2B alpha 1 /FITC  熒光素標(biāo)記蛋白磷酸酯酶-2B催化亞單位抗體IgG  0.2ml
63328 Anti-caldesmon/smooth muscle /FITC  熒光素標(biāo)記鈣調(diào)結(jié)合蛋白/鈣調(diào)素結(jié)合蛋白抗體IgG  0.2ml
63329 Anti-p-Caldesmon/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化鈣介質(zhì)素抗體IgG  0.2ml
63330 Anti-Smoothened/SMOH /FITC  熒光素標(biāo)記跨膜蛋白Smoothened抗體IgG  0.2ml
63331 Anti-Calpain 1/FITC  熒光素標(biāo)記鈣蛋白酶抗體IgG  0.2ml
63332 Anti-Calpain 2/FITC  熒光素標(biāo)記鈣蛋白酶2抗體IgG  0.2ml
63333 Anti-Calponin 1/FITC  熒光素標(biāo)記鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體IgG  0.2ml
63334 Anti-Camk1g/FITC  熒光素標(biāo)記鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗體 IgG  0.2ml
63335 Anti-CaMK2a/FITC  熒光素標(biāo)記鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體IgG  0.2ml
63336 Anti-CaMK2b/FITC  熒光素標(biāo)記鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2b抗體IgG  0.2ml
63337 Anti-CANX/FITC  熒光素標(biāo)記抗鈣連蛋白抗體IgG  0.2ml
63338 Anti-ISR- Alpha/RBITC  紅色熒光素羅丹明標(biāo)記(RBITC)胰島素受體-α抗體IgG(標(biāo)記抗體)  0.2ml
63339 Anti-CAP2/FITC  熒光素標(biāo)記環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗體IgG  0.2ml
63340 Anti-Cap43/NDRG1 /FITC  熒光素標(biāo)記分化相關(guān)基因Cap43抗體IgG  0.2ml
63341 Anti-CAS/FITC  熒光素標(biāo)記細(xì)胞凋亡敏感性基因抗體IgG  0.2ml
63342 Anti-Casein/FITC  熒光素標(biāo)記抗牛酪蛋白抗體IgG  0.2ml
63343 Anti-Caspase-1/FITC  熒光素標(biāo)記天冬氨酸-*特異性蛋白酶家族抗體IgG  0.2ml
63344 Anti-Caspase-3/RBITC  紅色熒光素羅丹明標(biāo)記(RBITC)Caspase-3 蛋白抗體(標(biāo)記抗體)  0.2ml
63345 Anti-Caspase-3 p17 subunit/FITC  熒光素標(biāo)記Caspase-3 p17 subunit蛋白抗體  0.2ml
63346 Anti-caspase-3 p12 subunit /FITC  熒光素標(biāo)記活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體IgG  0.2ml
63347 Anti-Cystatin 3/CST3/FITC人早老素2(PS-2)ELISA試劑盒  熒光素標(biāo)記胱抑素C/半*蛋白酶抑制劑C抗體IgG  0.2ml
63348 Anti-Caspase-6 (CT)/FITC  熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體（C端）IgG  0.2ml
63349 Anti-Caspase-6 (NT)/FITC  熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端)IgG  0.2ml
63350 Anti-Caspase-6 (NT)/FITC  熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端)IgG  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人早老素2(PS-2)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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