人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

62960 Beta-Amyloid(31-35)/FITC  熒光素標(biāo)記β淀粉樣肽（31-35）抗體IgG  0.2ml
62961 Anti-14-3-3/FITC  熒光素標(biāo)記14-3-3蛋白抗體IgG  0.2ml
62962 Anti-14-3-3 ζ(phospho Ser58)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化14-3-3 ζ抗體IgG  0.2ml
62963 Anti-2,4-D/FITC  熒光素標(biāo)記2，4-二氯苯氧乙酸抗體IgG  0.2ml
62964 Anti-4E-BP1/EIF4EBP1/FITC  熒光素標(biāo)記4E結(jié)合蛋白1抗體IgG  0.2ml
62965 Anti-4EBP1(phospho Ser64) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體IgG  0.2ml
62966 Anti-4EBP1(phospho Thr37/46) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體IgG  0.2ml
62967 Anti-phospho-4EBP1 (Ser65/Thr70)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體IgG  0.2ml
62968 Anti-14-3-3/RBITC  紅色熒光素羅丹明標(biāo)記14-3-3抗體IgG  0.2ml
62969 Anti-5-HT/FITC  熒光素標(biāo)記5-羥色胺抗體IgG  0.2ml
62970 Anti-5-HT/RBITC  紅色羅丹明標(biāo)記5-羥色胺抗體IgG  0.2ml
62971 Anti-5-HTR1A/FITC  熒光素標(biāo)記5-羥色胺受體1A抗體IgG  0.2ml
62972 Anti-5-HTR1B /FITC  熒光素標(biāo)記5-羥色胺受體1B抗體IgG  0.2ml
62973 Anti-5-HTR2A/FITC  熒光素標(biāo)記5-羥色胺受體2A抗體IgG  0.2ml
62974 Anti-5-HTR2B/FITC  熒光素標(biāo)記5-羥色胺受體2B(5-HT/serotonin R2B)抗體IgG  0.2ml
62975 Anti-5-HTR3/FITC  熒光素標(biāo)記5-羥色胺受體3抗體IgG  0.2ml
62976 Anti-5-HTR4/FITC  熒光素標(biāo)記5-羥色胺受體4抗體IgG  0.2ml
62977 Anti-5-LOX/FITC  熒光素標(biāo)記5-脂氧合酶抗體IgG  0.2ml
62978 Anti-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser271) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化5-脂氧合酶抗體IgG  0.2ml
62979 Anti-Phospho-5-Lipoxygenase (Ser663) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化5-脂氧合酶抗體IgG  0.2ml
62980 Anti-5-HTT/SERT/FITC  熒光素標(biāo)記5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白抗體IgG  0.2ml
62981 Anti-8-OHdG/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗8-羥基脫氧鳥苷蛋白抗體IgG  0.2ml
62982 Anti-AACT-Alpha1 /RBITC  紅色熒光素羅丹明標(biāo)記α-1抗胰*IgG  0.2ml
62983 Anti-AACT-Alpha1/FITC  熒光素標(biāo)記α-1抗胰*  0.2ml
62984 Anti-AAK1/FITC  熒光素標(biāo)記AP2關(guān)聯(lián)激酶1抗體IgG  0.2ml
62985 Anti-AARS2/FITC  熒光素標(biāo)記丙氨酰tRNA合成酶2抗體IgG  0.2ml
62986 Anti-AARS2 /FITC  熒光素標(biāo)記丙氨酰tRNA合成酶2抗體IgG  0.2ml
62987 Anti-AAT/FITC  熒光素標(biāo)記α-1抗*抗體IgG  0.2ml
62988 Anti-AATF/FITC  熒光素標(biāo)記拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG  0.2ml
62989 Anti-AATK/FITC  熒光素標(biāo)記細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)*激酶抗體IgG  0.2ml
62990 Anti-BTK/ATK /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠蛋白*激酶ATK抗體IgG  0.2ml
62991 Anti-Phospho-Btk(Tyr223) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠蛋白*激酶ATK抗體IgG  0.2ml
62992 Anti-Phospho-Btk(Ser180) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠蛋白*激酶ATK抗體IgG  0.2ml
62993 Anti-ABCA1/FITC  熒光素標(biāo)記腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1抗體IgG  0.2ml
62994 Anti-Tap1/ABCB2 /FITC   熒光素標(biāo)記ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運因子1抗體IgG  0.2ml
62995 Anti-ABCB5/FITC  熒光素標(biāo)記ATP結(jié)合蛋白家族5抗體IgG  0.2ml
62996 Anti-ABCB6/FITC  熒光素標(biāo)記ABCB6抗體IgG  0.2ml
62997 Anti-TCTP/FITC  熒光素標(biāo)記翻譯控制腫瘤蛋白抗體IgG  0.2ml
62998 Anti-Phospho-TCTP (Ser46) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化翻譯控制腫瘤蛋白抗體IgG  0.2ml
62999 Anti-ABCF1/FITC  熒光素標(biāo)記ATP結(jié)合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體IgG  0.2ml
63000 Anti-ABCG1/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠ABCG1抗體IgG  0.2ml
63001 Anti-ABCG2/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠ABCG2抗體IgG  0.2ml
63002 Anti-ABCG4/FITC  熒光素標(biāo)記抗ABC膜轉(zhuǎn)運蛋白抗體IgG  0.2ml
63003 Anti-c-Abl /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠非受體*激酶c-Abl抗體IgG  0.2ml
63004 Anti-ABL2/FITC  熒光素標(biāo)記ABL2抗體IgG  0.2ml
63005 Anti-ACA11 /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗擬南芥ACA11抗體IgG  0.2ml
63006 Anti-AHA3 /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗植物蛋白AHA3抗體（擬南芥）IgG  0.2ml
63007 Anti-ABP/FITC  熒光素標(biāo)記雄激素結(jié)合蛋白抗體IgG  0.2ml
63008 Anti-Rat IgA/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗大鼠IgA抗體  0.2ml
63009 Anti-ABI1/SSH3BP1/FITC  熒光素標(biāo)記ABI1/SSH3BP1蛋白抗體IgG  0.2ml
63010 Anti-ACD/PTOP/FITC人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒  熒光素標(biāo)記腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體IgG  0.2ml
63011 Anti-ACE1/FITC  熒光素標(biāo)記血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抗體IgG  0.2ml
63012 Anti-ACE2/FITC  熒光素標(biāo)記血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗體IgG  0.2ml
63013 Anti-ACEI/FITC  熒光素標(biāo)記血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體IgG  0.2ml
63014 Anti-Acetyl CoA Carboxylase/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、猴、牛乙酰*羧化酶抗體IgG  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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