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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-17 22:18:33瀏覽次數(shù):171次
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人重酒石酸*(NE-B)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人重酒石酸*(NE-B)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人重酒石酸*(NE-B)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
62846 Anti-LAMP-1/CD107a 溶酶體相關(guān)膜蛋白1抗體 0.2ml
62847 Anti-VCP 含纈酪肽蛋白抗體 0.1ml
62848 Anti-VDAC 等電壓依賴性陰離子通道抗體 0.2ml
62849 Anti-VDCC-L alpha L-型電壓依賴型鈣通道α抗體 0.1ml
62850 Anti-VDCC-L Beta L-型電壓依賴型鈣通道β抗體 0.1ml
62851 Anti-VEGF 血管內(nèi)皮生長因子抗體 0.1ml
62852 Anti-VEGF 血管內(nèi)皮生長因子抗體 0.1ml
62853 Anti-VEGF-A 血管內(nèi)皮生長因子A抗體 0.2ml
62854 Anti-PROK1/PRK1/EG-VEGF 內(nèi)分泌腺衍生血管內(nèi)皮生長因子抗體 0.2ml
62855 Anti-Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr816) 磷酸化內(nèi)分泌腺衍生血管內(nèi)皮生長因子抗體 0.1ml
62856 Anti-VEGF-C 血管內(nèi)皮生長因子C型抗體 0.2ml
62857 Anti-VEGFB 血管內(nèi)皮生長因子B抗體 0.2ml
62858 Anti-VEGF-D 血管內(nèi)皮生長因子D型抗體 0.2ml
62859 Anti-VEGFR1 血管內(nèi)皮生長因子受體1抗體 0.1ml
62860 Anti-VEGF Receptor 2/VEGFR2 血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 0.1ml
62861 Anti-phospho-VEGF receptor 2 (Tyr951) 磷酸化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 0.1ml
62862 Anti-phospho-VEGF receptor 2 (Tyr1059) 磷酸化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 0.1ml
62863 Anti-phospho-VEGF receptor 2 (Tyr1175) 磷酸化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 0.1ml
62864 Anti-phospho-VEGF receptor 2 (Tyr1212) 磷酸化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 0.1ml
62865 Anti-phospho-VEGF receptor 2 (Tyr996) 磷酸化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 0.1ml
62866 Anti-sVEGFR2 可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 0.1ml
62867 Anti-VEGFR3 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3 0.1ml
62868 Anti-VEGFR-3 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3抗體 0.2ml
62869 Anti-Versican 蛋白聚糖Versican抗體 0.1ml
62870 Anti-Vimentin 波形蛋白抗體 0.1ml
62871 Anti-Phospho-Vimentin (Ser56) 磷酸化波形蛋白抗體 0.1ml
62872 Anti-Phospho-Vimentin (Ser82) 磷酸化波形蛋白抗體 0.1ml
62873 Anti-VIP 血管活性腸肽抗體 0.1ml
62874 Anti-PBEF1(NT) 內(nèi)脂素 0.2ml
62875 Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT) 內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(N端抗體) 0.1ml
62876 Anti-Visfatin-1(NT) 內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素抗體(N端) 0.1ml
62877 Anti-Visfatin-2(CT) 內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(C端抗體) 0.1ml
62878 Anti-TRPV1/VR1 辣椒素受體抗體 0.1ml
62879 Anti-VSIG4 T淋巴細(xì)胞負(fù)調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.2ml
62880 Anti-VTN 玻璃粘連蛋白抗體 0.2ml
62881 Anti-VTG 魚、青鳉魚卵黃蛋白原抗體 0.2ml
62882 Anti-VWF 血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體 0.1ml
62883 Anti-V.cholera Ogawa 01群稻葉型霍亂弧菌抗體 0.2ml
62884 Anti-V.cholera Ogawa 01群小川型霍亂弧菌抗體 0.2ml
62885 Anti-WEE1 protein WEE1蛋白抗體 0.2ml
62886 Anti-Phospho-Wee1 (Ser642) 磷酸化WEE1蛋白抗體 0.1ml
62887 Anti-WNK1 賴氨酸缺陷型蛋白激酶1抗體 0.2ml
62888 Anti-Phospho-WNK1 (Thr60) 賴氨酸缺陷型蛋白激酶1抗體 0.1ml
62889 Anti-WNK4 WNK4抗體 0.1ml
62890 Anti-WNK3 protein */*激酶家族成員的基因WNK3抗體 0.1ml
62891 Anti-Wnt1 信號(hào)通路Wnt1抗體 0.1ml
62892 Anti-WDR26 心肌缺血預(yù)處理正調(diào)節(jié)蛋白2抗體 0.2ml
62893 Anti-Wnt3a 信號(hào)通路Wnt3a抗體 0.2ml
62894 Anti-WIP1 原癌基因WIP1抗體 0.2ml
62895 Anti-WNT9A 信號(hào)通路Wnt9a抗體 0.2ml
62896 Anti-WNT2B 信號(hào)通路Wnt2B抗體 0.2ml
62897 Anti-WNT5A 人重酒石酸*(NE-B)ELISA試劑盒信號(hào)通路Wnt5a抗體 0.1ml
62898 Anti-WNT10A 信號(hào)通路WNT10A抗體 0.2ml
62899 Anti-WNT12/WNT-10B 信號(hào)通路WNT10B抗體 0.2ml
62900 Anti-WRCH-1 WRCH1抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人重酒石酸*(NE-B)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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