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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-06 07:23:01瀏覽次數(shù):154次
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人毒蕈堿型乙酰*受體亞型M3(M-AChR M3)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人毒蕈堿型乙酰*受體亞型M3(M-AChR M3)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人毒蕈堿型乙酰*受體亞型M3(M-AChR M3)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
62620 Anti-Alpha-Synuclein 核突觸蛋白-α抗體 0.1ml
62621 Anti-Alpha-Synuclein 核突觸蛋白抗體 0.1ml
62622 Anti-gamma Synuclein 核突觸蛋白-γ抗體 0.1ml
62623 Anti-Syntaxin 1 突觸融合蛋白1抗體 0.1ml
62624 Anti-SYT3 突觸結(jié)合蛋白3抗體 0.1ml
62625 Anti-T3 三碘甲狀腺素T3抗體 0.2ml
62626 Anti-Synapsin I 神經(jīng)突觸素1抗體 0.1ml
62627 Anti-phospho-Synapsin I (Ser553) 磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體 0.1ml
62628 Anti-phospho-Synapsin I (Ser9) 磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體 0.1ml
62629 Anti-Synapsin II 神經(jīng)突觸素2抗體 0.2ml
62630 Anti-T3 三碘甲狀腺素T3抗體 0.2ml
62631 Anti-TACR3 速激肽受體3抗體 0.2ml
62632 Anti-TAK1 轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶1 0.2ml
62633 Anti-Phospho-TAK1 (Ser412) 磷酸化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶1 0.1ml
62634 Anti-Phospho-TAK1 (Thr184) 磷酸化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶1 0.1ml
62635 Anti-Phospho-TAK1 (Thr187) 磷酸化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶1 0.1ml
62636 Anti-Phospho-TAK1 (Thr184/187) 磷酸化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶1 0.1ml
62637 Anti-Tap1/ABCB2 ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)因子1抗體 0.2ml
62638 Anti-Tanis/SELS(Selenoprotein S) 炎癥負(fù)調(diào)控因子蛋白抗體 0.2ml
62639 Anti-TANK TANK抗體 0.1ml
62640 Anti-Phospho-TBK1/NAK (Ser172) NF-κB活化激酶抗體 0.1ml
62641 Anti-Tat 細(xì)胞*轉(zhuǎn)氨酶抗體 0.2ml
62642 Anti-Tau protein 微管相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
62643 Anti-TRH 促甲狀腺素釋放激素抗體 0.2ml
62644 Anti-Tau protein 微管相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
62645 Anti-phospho-Tau protein (Thr489) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
62646 Anti-phospho-Tau protein (Ser396) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
62647 Anti-phospho-Tau protein (Ser422) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
62648 Anti-MAP2 微管相關(guān)蛋白2抗體 0.1ml
62649 Anti-Phospho-MAP2 (Ser136) 磷酸化微管相關(guān)蛋白2抗體 0.1ml
62650 Anti-Phospho-MAP2 (Thr1620/1623) 磷酸化微管相關(guān)蛋白2抗體 0.1ml
62651 Anti-MAP1A 微管相關(guān)蛋白1A抗體 0.1ml
62652 Anti-Talin 踝蛋白抗體 0.1ml
62653 Anti-Phospho-Talin (Ser425) 磷酸化踝蛋白抗體 0.1ml
62654 Anti-TBX2/T-box2 新型抑癌基因抗體 0.1ml
62655 Anti-TBX3 轉(zhuǎn)錄因子Tbx3抗體 0.2ml
62656 Anti-Tbx21/T-bet T細(xì)胞介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Tbx21抗體 0.1ml
62657 Anti-TBX18 轉(zhuǎn)錄因子Tbx18抗體 0.2ml
62658 Anti-TCF7L2 轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗體 0.1ml
62659 Anti-TCTP 翻譯控制腫瘤蛋白抗體 0.2ml
62660 Anti-Phospho-TCTP (Ser46) 磷酸化翻譯控制腫瘤蛋白抗體 0.1ml
62661 Anti-TDP-43 Tar DNA 結(jié)合蛋白43抗體 0.1ml
62662 Anti-PHLDA1/TDAG51 T淋巴細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體 0.2ml
62663 Anti-TEM 1/CD248 內(nèi)涎蛋白/內(nèi)皮唾液酸蛋白抗體 0.2ml
62664 Anti-TEM8 腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體 0.2ml
62665 Anti-TERT 端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶抗體 0.1ml
62666 Anti-TETRODOTOXIN ( TTX ) 河豚毒素抗體 0.1ml
62667 Anti-TP-1/TEP1 端粒酶相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
62668 Anti-Tetraspan5 四分子交聯(lián)體5抗體 0.1ml
62669 Anti-TFF2 三葉肽因子2抗體 0.1ml
62670 Anti-TFF3 三葉肽因子3抗體人毒蕈堿型乙酰*受體亞型M3(M-AChR M3)ELISA試劑盒 0.1ml
62671 Anti-TIF1 Alpha/TRIM24 轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1α抗體 0.2ml
62672 Anti-TIF1 beta/KAP1 轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體 0.2ml
62673 Anti-Phospho-TIF1beta (Ser824) 磷酸化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體 0.1ml
62674 Anti-TIF1 gamma/Trim33 轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1γ抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人毒蕈堿型乙酰*受體亞型M3(M-AChR M3)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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