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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
62452 Anti-Sema4C 臂板蛋白4C抗體 0.2ml
62453 Anti-Sema6A Sema6A抗體 0.2ml
62454 Anti-Sema7A/CD108 軸突生長(zhǎng)因子CD108抗體 0.2ml
62455 Anti-SFRP1 分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml
62456 Anti-SGC (soluble glycoprotein C) 可溶性糖蛋白C抗體 0.2ml
62457 Anti-SGLT1 鈉-糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1抗體 0.2ml
62458 Anti-SGK1 糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體 0.2ml
62459 Anti-Phospho-SGK1 (Ser78) 磷酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體 0.1ml
62460 Anti-Phospho-SGK1 (Ser422) 磷酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體 0.1ml
62461 Anti-Phospho-SGK1 (Thr256) 磷酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體 0.1ml
62462 Anti-Shank1 shank-1抗體 0.1ml
62463 Anti-Shadow 新朊蛋白抗體 0.2ml
62464 Anti-SHBG 性激素結(jié)合球蛋白抗體 0.2ml
62465 Anti-SHC SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 0.2ml
62466 Anti-phospho-SHC (Ser36) 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 0.1ml
62467 Anti-phospho-SHC (Tyr349) 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 0.1ml
62468 Anti-phospho-SHC (Tyr427) 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 0.1ml
62469 Anti-phospho-SHC (Tyr317) 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 0.1ml
62470 Anti-phospho-SHC (Tyr239/240) 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 0.1ml
62471 Anti-Shiga-like toxin IIe variant subunit A 大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌型)抗體 0.2ml
62472 Anti-Shh/Sonic hedgehog Shh信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路膜蛋白受體抗體 0.1ml
62473 Anti-OMPC 大腸桿菌外膜孔道蛋白C抗體 0.2ml
62474 Anti-SHIP1 SH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌醇SHIP1抗體 0.2ml
62475 Anti-Phospho-SHIP1 (Tyr1020) 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌醇SHIP1抗體 0.1ml
62476 Anti-SHP-1 造血細(xì)胞磷酸酶抗體 0.2ml
62477 Anti-PTPN4/MEG1 蛋白*磷酸酶非受體型4抗體 0.2ml
62478 Anti-SHP2/SHIP2/PTPN11 蛋白*磷酸酶非受體型11抗體 0.2ml
62479 Anti-Phospho-SHIP2 (Tyr1135) 磷酸化蛋白*磷酸酶2抗體 0.1ml
62480 Anti-Phospho-SHIP2 (Ser576) 磷酸化蛋白*磷酸酶2抗體 0.1ml
62481 Anti-Phospho-SHIP2 (Tyr542) 磷酸化蛋白*磷酸酶2抗體 0.1ml
62482 Anti-Phospho-SHIP2 (Tyr986/987) 磷酸化蛋白*磷酸酶2抗體 0.1ml
62483 Anti-Phospho-SHIP2 (Tyr580) 磷酸化蛋白*磷酸酶2抗體 0.1ml
62484 Anti-SIAH1 泛素連接酶Siah1抗體 0.2ml
62485 Anti-SIAH2 泛素連接酶Siah2 0.2ml
62486 Anti-SIP1 運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
62487 Anti-SIRT1 沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.1ml
62488 Anti-Phospho-SirT1 (Ser27) 磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.1ml
62489 Anti-Phospho-SirT1 (Ser47) 磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.1ml
62490 Anti-Skp2 細(xì)胞S相激酶相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
62491 Anti-SLC4A4 *協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4抗體 0.2ml
62492 Anti-Slc4a7/Nbcn1 *協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A7抗體 0.2ml
62493 Anti-NGALR/Slc22A17 可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白22A17抗體 0.1ml
62494 Anti-SLC24A5 可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC24A5抗體 0.2ml
62495 Anti-Slc26a5 Slc26a5抗體 0.2ml
62496 Anti-SLC6A19 鉀依賴鈉鈣交換蛋白6 0.2ml
62497 Anti-SLC16A3/MCT-4 MCT4抗體 0.2ml
62498 Anti-Smac/DIABLO 線粒體促凋亡蛋白抗體 0.1ml
62499 Anti-SLC33A1 乙酰*轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 0.2ml
62500 Anti-SLC34A2 磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 0.1ml
62501 Anti-SMN1 運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白1抗體 0.2ml
62502 Anti-Slit2/Slil3 神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體 0.1ml
62503 Anti-SLT/SLT-IIe/O139 豬水腫素(O139)菌體蛋白抗體 0.2ml
62504 Anti-SLC39A6 SLC39A6抗體人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA試劑盒 0.2ml
62505 Anti-Slug 鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體 0.2ml
62506 Anti-SLC40A1/FPN1 細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC40A1抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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