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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-12 03:01:00瀏覽次數(shù):168次
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人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBV preS2Ab)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBV preS2Ab)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBV preS2Ab)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
62396 Anti-RNF148 環(huán)指蛋白148抗體 0.2ml
62397 Anti-ROCK1 Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體 0.2ml
62398 Anti-ROCK2 Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體 0.2ml
62399 Anti-RPLP0 酸性核糖體磷蛋白大亞基P0抗體 0.2ml
62400 Anti-ROS/c ros 活性氧簇ROS抗體 0.2ml
62401 Anti-RPS6 S6核糖體蛋白抗體 0.2ml
62402 Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236) 磷酸化S6核糖體蛋白抗體 0.1ml
62403 Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) 磷酸化S6核糖體蛋白抗體 0.1ml
62404 anti-Rb/P105 RB 成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤抑癌蛋白抗體 0.1ml
62405 anti-phospho-Rb/p105-Rb(Ser780) 磷酸化成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤抑癌蛋白抗體 0.1ml
62406 Anti-RRAD RRAD抗體 0.2ml
62407 Anti-Rsk2/MAPKAP Kinase 1b 核糖體S6激酶RSK2抗體 0.2ml
62408 Anti-Phospho-RSK2 (Ser227) 磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體 0.1ml
62409 Anti-Phospho-RSK2 (Tyr529) 磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體 0.1ml
62410 Anti-RSK3/Ribosomal S6 kinase 3 核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體 0.2ml
62411 Anti-Phospho-RSK3 (Thr353/356) 磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體 0.1ml
62412 Anti-Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360) 磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體 0.1ml
62413 Anti-RSV 呼吸道合胞病毒單克隆抗體 0.1ml
62414 Anti-RXR Alpha/RXRA 核受體RXRα抗體 0.2ml
62415 Anti-RXR gamma 維甲酸受體G抗體 0.2ml
62416 Anti-RUNX1/AML1 急性髓細(xì)胞白血病1蛋白抗體 0.2ml
62417 Anti-phospho-RUNX1/AML1(Ser249) 磷酸化急性髓細(xì)胞白血病1蛋白抗體 0.1ml
62418 Anti-phospho-RUNX1(Ser303) 磷酸化急性髓細(xì)胞白血病1蛋白抗體 0.1ml
62419 Anti-Runx3 Runx3抗體 0.1ml
62420 Anti-S6PDH 6-磷酸*脫氫酶抗體 1ml
62421 Anti-S100B S100B蛋白抗體 0.1ml
62422 Anti-S100A1 S100A1抗體 0.1ml
62423 Anti-S100A13 S100A13抗體 0.1ml
62424 Anti-SAMDC S-腺苷蛋氨酸脫羧酶抗體 0.2ml
62425 Anti-S100-A8/MRP8 S100A8抗體 0.2ml
62426 Anti-S100-A9/MRP14/CFAG S100A9抗體 0.2ml
62427 Anti-Shrimp tropomyosin 南美白對蝦過敏原蛋白(蝦原肌球蛋白)抗體 0.1ml
62428 Anti-SAP-1/Synaptophysin 突觸相關(guān)蛋白-1/突觸素抗體 0.1ml
62429 Anti-SARS putative orflab polyprotein 冠狀病毒抗體 0.2ml
62430 Anti-SARS S-protein 兔抗冠狀病毒表面S蛋白抗體 0.2ml
62431 Anti-SATB1 核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
62432 Anti-Phospho-SATB1 (Ser47) 磷酸化核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
62433 Anti-SCF 干細(xì)胞生長因子抗體 0.1ml
62434 Anti-SCG3/SgIII 分泌粒蛋白3抗體 0.2ml
62435 Anti-SCN1A SCN1A抗體 0.2ml
62436 Anti-SCN2A SCN2A抗體 0.2ml
62437 Anti-SCN9A/NAV1.7 電壓開啟的鈉離子通道SCN9A抗體 0.2ml
62438 Anti-SCP2/NLTP 固醇攜帶蛋白2抗體 0.2ml
62439 Anti-SCP3 聯(lián)會復(fù)合體蛋白3抗體 0.2ml
62440 Anti-SCYLV 甘蔗SCYLV抗體 0.2ml
62441 Anti-SDF-1/CXCL12 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1抗體 0.1ml
62442 Anti-CXCL14 CXC趨化因子14抗體 0.2ml
62443 Anti-Phospho-Aurora B (Thr232)/Aurora C (Thr198) 磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體 0.1ml
62444 Anti-Phospho-Aurora A (Thr288) 磷酸化有絲分裂激酶A抗體 0.1ml
62445 Anti-CXCL16 CXC趨化因子16抗體 0.1ml
62446 Anti-Secretin 分泌素抗體 0.2ml
62447 Anti-Secretin receptor 分泌素受體抗體 0.2ml
62448 Anti-SEL1L SEL1L抗體人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBV preS2Ab)ELISA試劑盒 0.2ml
62449 Anti-Selenoprotein W 硒蛋白W抗體 0.1ml
62450 Anti-Sema3A 臂板蛋白3A抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBV preS2Ab)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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