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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-03-14 13:32:28瀏覽次數(shù):166次
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人利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
62284 Anti-Phospho-PRAS40 (Thr246) 磷酸化蛋白激酶AKT底物1抗體 0.1ml
62285 Anti-X protein (N-Terminus) 乙肝病毒X蛋白抗體(N端) 0.2ml
62286 Anti-Profilin 1 前纖維蛋白1抗體 0.2ml
62287 Anti-X protein (C-Terminus) 抗乙肝病毒X蛋白抗體(C端) 0.2ml
62288 Anti-Profilin 2 前纖維蛋白2抗體 0.2ml
62289 Anti-Protein G 重組蛋白G抗體 0.2ml
62290 Anti-Protein A 重組蛋白A抗體 0.2ml
62291 Anti-RAM-11 RAM-11抗體 0.2ml
62292 Anti-RAMP-1 受體活性修飾蛋白1抗體 0.2ml
62293 Anti-RACK1 受體激活蛋白激酶C1抗體 0.2ml
62294 Anti-PRMT1 蛋白質(zhì)*甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.2ml
62295 Anti-PRCP 脯氨酰羧肽酶抗體 0.2ml
62296 Anti-PRDX3 過氧化還原酶3抗體 0.2ml
62297 Anti-RRM1 核糖核苷酸還原酶1抗體 0.2ml
62298 Anti-PRL 泌乳素抗體 0.2ml
62299 Anti-PRL1/PTP4A1 肝再生磷酸酯酶1抗體 0.1ml
62300 Anti-PRL2/PTP4A2 肝再生磷酸酯酶2抗體 0.2ml
62301 Anti-PRL3/PTP4A3 磷酸酯酶3蛋白抗體 0.1ml
62302 Anti-prox-1 prox-1抗體 0.1ml
62303 Anti-PH-4/P4H-TM *水解酶4抗體 0.2ml
62304 Anti-PHD3 *羥化酶抗體 0.2ml
62305 Anti-PHD2 *羥化酶2抗體 0.2ml
62306 Anti-PS-1 (NT) 早老素蛋白-1抗體 0.2ml
62307 Anti-PS-1(CT) 早老素蛋白-1抗體 0.2ml
62308 Anti-PS-1 早老素蛋白-1抗體 0.2ml
62309 Anti-PSA 人前列腺特異性抗原單克隆抗體(包被) 0.2ml
62310 Anti-PSA 鼠抗人前列腺特異性抗原單克隆抗體(檢測(cè)) 0.2ml
62311 Anti-CPSA(mouse monoclonal) 復(fù)合前列腺特異性抗原單克隆抗體 0.2ml
62312 Anti-PMSA/FOLH1 前列腺特異膜抗原抗體 0.2ml
62313 Anti-PSAP/PAP 前列腺酸性磷酸酶抗體 0.1ml
62314 Anti-PSAP/PAP (human) 前列腺酸性磷酸酶抗體(人) 0.1ml
62315 Anti-PSCA 前列腺干細(xì)胞抗原抗體 0.1ml
62316 Anti-PSD93 突觸后密度蛋白93抗體 0.2ml
62317 Anti-Phospho-PSD93 (Tyr340) 磷酸化突觸后密度蛋白93抗體 0.1ml
62318 Anti-PSD95 突觸后密度蛋白95抗體 0.1ml
62319 Anti-Phospho-PSD95 (Tyr236/Tyr240) 磷酸化突觸后密度蛋白95抗體 0.1ml
62320 Anti-PSGL-1/CD162 P選擇素糖蛋白配體1抗體 0.2ml
62321 Anti-PSMD9 蛋白酶調(diào)解因子9 0.2ml
62322 Anti-LMP2 低分子質(zhì)量蛋白2抗體 0.2ml
62323 Anti-Proteasome 20S LMP7 低分子質(zhì)量蛋白7抗體 0.2ml
62324 Anti-P-selectin/CD62p P選擇素抗體 0.1ml
62325 Anti-L-Selectin/CD62L L選擇素抗體 0.1ml
62326 Anti-E-Selectin/CD62E E選擇素抗體 0.1ml
62327 Anti-Patched/PTCH Patched/PTCH抗體 0.2ml
62328 Anti-CD63/MLA1 黑色素瘤相關(guān)抗原抗體 0.1ml
62329 Anti-CD64/IGFR1 免疫球蛋白G Fc段受體I 0.2ml
62330 Anti-CD66a/CEACAM1 癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子1抗體 0.2ml
62331 Anti-PTEN/MMAC1(NT) 一種腫瘤抑制基因抗體(N端) 0.1ml
62332 Anti-PTEN/MMAC1(CT) 一種腫瘤抑制基因抗體(C端) 0.1ml
62333 Anti-Phospho-PTEN (Ser380) 磷酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體 0.1ml
62334 Anti-Phospho-PTEN (Ser380/Thr382/Thr383) 磷酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體 0.1ml
62335 Anti-PGE2 前列腺素E2抗體人利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)ELISA試劑盒 0.1ml
62336 Anti-PTGEs 前列腺素E合成酶抗體 0.2ml
62337 Anti-PTHrP/PTHLH 甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
62338 Anti-PTN 多效生長(zhǎng)因子抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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