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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人抗副流感病毒IgG抗體(anti-PIV IgG )ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗副流感病毒IgG抗體(anti-PIV IgG )ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抗副流感病毒IgG抗體(anti-PIV IgG )ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
61827 Anti-MLN 胃動(dòng)素抗體 0.2ml
61828 Anti-mTOR 雷帕霉素靶蛋白抗體 0.2ml
61829 Anti-Phospho-mTOR (Ser2448) 磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 0.1ml
61830 Anti-Phospho-mTOR (Ser2481) 磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 0.1ml
61831 Anti-MTLR 胃動(dòng)素受體抗體 0.2ml
61832 Anti-CA15-3/Muc1/CD227 粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體 0.2ml
61833 Anti-Muc2 粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體 0.2ml
61834 Anti-mucin3/Muc3 粘蛋白-3抗體 0.2ml
61835 Anti-mucin 5B/Muc5B 粘蛋白-5B抗體 0.2ml
61836 Anti-mucin4/Muc4(human) 粘蛋白-4抗體 0.2ml
61837 Anti-MuRF1/Trim63 肌肉細(xì)胞特異性泛素蛋白連接酶1抗體 0.2ml
61838 Anti-MyD88 髓樣分化蛋白抗體 0.2ml
61839 Anti-NIPP1/ARD1 核抑制蛋白磷酸酶1抗體 0.2ml
61840 Anti-Myelin Protein Zero 外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗體 0.1ml
61841 Anti-PMP2 周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗體 0.2ml
61842 Anti-MYSM1 MYSM1抗體 0.2ml
61843 Anti-MYOZ/MYOZ1 MYOZ抗體 0.2ml
61844 Anti-MyoD1/Myf3 肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.2ml
61845 Anti-SM Myosin (Smooth Muscle) 人心肌肌凝蛋白(平滑肌) 小鼠單抗 0.2ml
61846 Anti-CHRNA4 煙堿型乙酰*受體α4抗體 0.1ml
61847 Anti-CHRNA7 煙堿型乙酰*受體α7抗體 0.2ml
61848 Anti-CHRNA2(neuronal) 煙堿型乙酰*受體A2(神經(jīng)型)抗體 0.1ml
61849 Anti-/NADPH oxidase 1 有絲分裂氧化酶1抗體 0.2ml
61850 Anti-Nox3/NADPH oxidase 3 有絲分裂氧化酶2抗體 0.2ml
61851 Anti-NOX4/NADPH oxidase 4 NADPH氧化酶NOX家族的成員4抗體 0.2ml
61852 Anti-Nanog 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 0.1ml
61853 Anti-NAIF1 protein 核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1 0.2ml
61854 Anti-Natrexone 抗納曲酮抗體IgG 0.2ml
61855 Anti-NAP1/NAP1L1 核小體組裝蛋白1抗體 0.2ml
61856 Anti-NB3/CNTN6 神經(jīng)細(xì)胞NB3特定蛋白抗體 0.2ml
61857 Anti-P95/NBS1 DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體 0.2ml
61858 Anti-Phospho-p95/NBS1 (Ser343) 磷酸化DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體 0.1ml
61859 Anti-N-cadherin N-鈣粘附分子抗體 0.1ml
61860 Anti-E-cadherin 上皮鈣粘附分子抗體 0.1ml
61861 Anti-Nck1/Nck2 NCK銜接因子蛋白2抗體 0.2ml
61862 Anti-NCOA2/KAT13C 核受體輔助激活蛋白2抗體 0.2ml
61863 Anti-NCoR1 核受體輔助抑制因子1抗體 0.1ml
61864 Anti-NEDD4L/NEDD4-2 泛素連接酶NEDD4-2抗體 0.2ml
61865 Anti-Phospho-NEDD4L (Ser342) 磷酸化泛素連接酶NEDD4-2抗體 0.1ml
61866 Anti-NCoR2 核受體輔助抑制因子2抗體 0.2ml
61867 Anti-NEP/MME 金屬肽鏈內(nèi)切酶抗體 0.2ml
61868 Anti-NDRG1/Cap43 分化相關(guān)基因NDRG1抗體 0.2ml
61869 Anti-Phospho-NDRG1 (Ser330) 磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體 0.2ml
61870 Anti-Phospho-NDRG1 (Thr346) 磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體 0.1ml
61871 Anti-NDRG2 抑癌基因NDRG2抗體 0.2ml
61872 Anti-NDRG3 抑癌基因NDRG3抗體 0.2ml
61873 Anti-NDRG4 抑癌基因NDRG4抗體 0.2ml
61874 Anti-Nesfatin-1/Nucb2 新的飽食分子蛋白抗體 0.2ml
61875 Anti-NCX1/SLC8A1 鈉鈣交換蛋白1抗體 0.2ml
61876 Anti-NCX2/SLC8A2 鈉鈣交換蛋白2抗體 0.2ml
61877 Anti-Nebulin 伴肌動(dòng)蛋白抗體人抗副流感病毒IgG抗體(anti-PIV IgG )ELISA試劑盒 0.2ml
61878 Anti-NCX3(Na+/Ca2+ exchanger3) 鈉鈣交換蛋白3抗體 0.2ml
61879 Anti-Mycoplasma Gallisepticum 雞毒支原體MG抗體 0.2ml
61880 Anti-NCF/NCF4/p40phox 嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子4抗體 0.2ml
61881 Anti-Phospho-p40phox (Thr154) 磷酸化嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子4抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗副流感病毒IgG抗體(anti-PIV IgG )ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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