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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-10 16:46:17瀏覽次數(shù):212次
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人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
61715 Anti-MCP-2/CCL8 單核細(xì)胞趨化蛋白2抗體(人) 0.2ml
61716 Anti-MCP-2/CCL8 單核細(xì)胞趨化蛋白2抗體(大、小鼠) 0.2ml
61717 Anti-MCP-3/CCL7 單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體 0.2ml
61718 Anti-MCP-3/CCL7 單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體 0.2ml
61719 Anti-CCL9/CCL10 巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1γ抗體 0.2ml
61720 Anti-Mast Cell Tryptase 肥大細(xì)胞蛋白酶7抗體 0.2ml
61721 Anti-TPSB2 肥大細(xì)胞類*β2 0.1ml
61722 Anti-MC-1R 黑皮質(zhì)素-1受體抗體 0.2ml
61723 Anti-MCSF Receptor 巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 0.1ml
61724 Anti-phosphoM-CSF Receptor(Tyr546) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 0.1ml
61725 Anti-phospho CSF1R (Tyr699) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 0.1ml
61726 Anti-phospho-M-CSF Receptor(Tyr708) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 0.1ml
61727 Anti-phospho-CSF1R (Tyr723) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 0.1ml
61728 Anti-phosphoM-CSF Receptor(Tyr809) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 0.1ml
61729 Anti-phospho-CSF1R(Tyr923) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 0.1ml
61730 Anti-MCT1 單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體 0.2ml
61731 Anti-MCM2 微小染色體維持缺陷蛋白2抗體 0.2ml
61732 Anti-MCM3 微小染色體維持缺陷蛋白3抗體 0.2ml
61733 Anti-MCM5 微小染色體維持缺陷蛋白5抗體 0.1ml
61734 Anti-MCM7 微小染色體維持缺陷蛋白7抗體 0.2ml
61735 Anti-MCSF 巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體 0.1ml
61736 Anti-Mcl1 髓樣細(xì)胞白血病-1抗體 0.2ml
61737 Anti-Phospho-Mcl1 (Ser159/Thr163) 磷酸化髓樣細(xì)胞白血病-1抗體 0.1ml
61738 Anti-MDM2 雙微體2癌基因抗體 0.1ml
61739 Anti-Phospho-MDM2 (Ser166) 磷酸化雙微體2癌基因抗體 0.1ml
61740 Anti-MDR1/p-GP/CD243 多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體 0.1ml
61741 Anti-MEF2A 肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體 0.1ml
61742 Anti-Phospho-MEF2A (Thr312) 磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體 0.1ml
61743 Anti-Phospho-MEF2A (Ser408) 磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體 0.1ml
61744 Anti-Megsin *蛋白酶抑制劑B7抗體 0.2ml
61745 Anti-Melamine 三聚氰胺抗體 0.2ml
61746 Anti-Melamine 三聚氰胺抗體 0.2ml
61747 Anti-Melan-A/MART-1/Melanoma HMB45 黑色素瘤相關(guān)抗原/黑色素-A抗體 0.1ml
61748 Anti-MEK1/MAPKK1/MEKK1 MEK1/MAPKK1抗體(N-端) 0.1ml
61749 Anti-Menin/Men1 Menin抑癌蛋白抗體 0.2ml
61750 Anti-Metal ion transporter 擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運蛋白抗體 1ml
61751 Anti-Mfn1 線粒體融合蛋白1抗體 0.2ml
61752 Anti-MGMT O6甲基*DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.1ml
61753 Anti-Metallothionein 金屬硫蛋白抗體 0.2ml
61754 Anti-LAMR1 層粘連蛋白受體1抗體(N端) 0.1ml
61755 Anti-MTA1 腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
61756 Anti-LAMR1(CT) 層粘連蛋白受體1抗體(C端) 0.2ml
61757 Anti-Myf6 生肌調(diào)節(jié)因子6抗體 0.2ml
61758 Anti-LAMR1 層粘連蛋白受體1單克隆抗體 0.1ml
61759 Anti-MICA/MHC I MHC I類鏈相關(guān)蛋白A/組織相容性復(fù)合物1抗體 0.2ml
61760 Anti-Microsporidia protien 蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體 0.2ml
61761 Anti-Midnolin isoform Protein 1 中腦核仁蛋白1抗體 0.1ml
61762 Anti-MIDN 中腦核仁蛋白抗體 0.2ml
61763 Anti-Midkine 中期因子/肝素結(jié)合生長因子抗體 0.2ml
61764 Anti-MLCK 肌球蛋白輕鏈激酶抗體 0.2ml
61765 Anti-MLK3 */*蛋白激酶MLK3抗體 0.2ml
61766 Anti-Phospho-MLK3 (Thr277/Ser281) 磷酸化*/*蛋白激酶MLK3抗體 0.1ml
61767 Anti-MYL1/MYL2 肌球蛋白輕鏈1/2抗體 人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA試劑盒 0.2ml
61768 Anti-Phospho-MYL(Ser19) 磷酸化肌球蛋白輕鏈2抗體 0.1ml
61769 Anti-MYL3/Myosin light chain 3 肌球蛋白輕鏈3抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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