人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

61659 Anti-M2-PK (pyruvate Kinase M2)  丙酮酸激酶-M2  0.1ml
61660 anti-Integrin alpha E2  整合素alpha E2 抗體  0.1ml
61661 Anti-Integrin alpha L/CD11a  整合素αL抗體  0.1ml
61662 Anti-CD11b/CD49d  整合素αM/巨噬細(xì)胞表面分子抗體  0.1ml
61663 Anti-Integrin Alpha X/CD11c  整合素αX抗體  0.1ml
61664 Anti-MARCO  巨噬細(xì)胞清道夫受體抗體  0.2ml
61665 Anti-MARCKS  *蛋白激酶C底物Marcks抗體  0.1ml
61666 Anti-Phospho-MARCKS (Ser152/156)  磷酸化*蛋白激酶C底物Marcks抗體  0.1ml
61667 Anti-Phospho-MARCKS (Ser162)  磷酸化*蛋白激酶C底物Marcks抗體  0.1ml
61668 Anti-MAD1  Mad1抗體  0.2ml
61669 Anti-MAdCAM-1  粘膜血管定居因子抗體  0.2ml
61670 Anti-DAXX  Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體  0.2ml
61671 Anti-Phospho-FADD (Ser191)   磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體  0.1ml
61672 Anti-Mafa  v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗體  0.1ml
61673 Anti-MAFbx/Fbx32  泛素蛋白連接酶抗體  0.2ml
61674 Anti-MAG-a/b   髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體  0.1ml
61675 Anti-MAG-a/L-MAG  髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體  0.1ml
61676 Anti-MAGE-1  黑色素瘤相關(guān)抗原抗體  0.1ml
61677 Anti-MAGE-A4  黑色素瘤相關(guān)抗原4抗體  0.2ml
61678 Anti-MAP1LC3A  自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體  0.2ml
61679 Anti-MO25 alpha/CAB39  鈣結(jié)合蛋白39抗體  0.2ml
61680 Anti-Mesothelioma  間質(zhì)細(xì)胞蛋白抗體  0.2ml
61681 Anti-TORC1/CRTC1  環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體  0.2ml
61682 Anti-Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151)  磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體  0.1ml
61683 Anti-MAP3K8/TPL2  絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體  0.2ml
61684 Anti-Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Ser400)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體  0.1ml
61685 Anti-Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Thr290)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體  0.1ml
61686 Anti-MATH1  腸道分化干細(xì)胞MATH-1蛋白抗體  0.1ml
61687 Anti-Morphine  *單克隆抗體  0.2ml
61688 Anti-Morphine  *抗體  0.2ml
61689 Anti-Morphine  *抗體  0.2ml
61690 Anti-Torc2/Crtc2  CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體  0.2ml
61691 Anti-Phospho-Torc2/Crtc2 (Ser171)  磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體  0.1ml
61692 Anti-Morphine  *單克隆抗體  0.2ml
61693 Anti-Amphetamine  苯丙胺單克隆抗體（安非他明）  0.1ml
61694 Anti-MEK1/2(MAPKK1)  絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體  0.1ml
61695 Anti-MEK2/MAPKK2  絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體  0.2ml
61696 Anti-MAPKAP Kinase 2  絲裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗體  0.2ml
61697 Anti-Phospho-MAPKAPK2 (Thr222)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗體  0.1ml
61698 Anti-Phospho-MAPKAPK2 (Thr334)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗體  0.1ml
61699 Anti-Matrilin 1  軟骨基質(zhì)蛋白抗體  0.2ml
61700 Anti-ASK1  細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體  0.1ml
61701 Anti-phospho-ASK1(Ser966)  磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體  0.1ml
61702 Anti-phospho-ASK1(Ser967)  磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體  0.2ml
61703 Anti-phospho-ASK1(Thr845)  磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體  0.1ml
61704 Anti-Maspin  抑癌基因抗體  0.1ml
61705 Anti-MASP  甘露聚糖結(jié)合凝集素*肽酶1抗體  0.2ml
61706 Anti-MASP2  甘露聚糖結(jié)合凝集素*肽酶2抗體  0.2ml
61707 Anti-Matriptase  蛋白裂解酶（一種新的癌基因）抗體  0.1ml
61708 Anti-MBP  髓鞘堿性蛋白抗體  0.1ml
61709 Anti-CMV/HCMV PP65/HHV5 PP65  巨細(xì)胞病毒PP65/CMV低基質(zhì)磷脂蛋白抗體  0.1ml
61710 Anti-HCMV  人巨細(xì)胞病毒人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒  0.1ml
61711 Anti-HCMV UL23  人巨細(xì)胞病毒UL23抗體  0.1ml
61712 Anti-HCMV UL49  人巨細(xì)胞病毒UL49蛋白抗體  0.1ml
61713 Anti-MCP-1/CCL2  單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體(大、小鼠)  0.1ml
61714 Anti-MCP-1/CCL2  單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體(人)  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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